目的:順鉑耐藥是目前治療肺癌過程中要面臨的主要難關(guān)。耐藥腫瘤的基本特征之一就是代謝異常,特別是糖酵解異常,但其作用機制尚未被完全闡明。N6-甲基腺苷（m6A）mRNA修飾在調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的多種生物學(xué)功能有著關(guān)鍵作用,影響癌癥的發(fā)生發(fā)展。但是它的功能,特別是關(guān)于癌癥代謝重編程的研究在很大程度上仍然是未知的。我們發(fā)現(xiàn),在肺癌細(xì)胞耐順鉑過程中存在mRNAs的m6A修飾,甲基轉(zhuǎn)移酶3（Methyltransferase like3,Mettl3）的缺失使得m6A甲基化水平下調(diào),并抑制耐順鉑肺癌細(xì)胞的代謝能力,特別是糖酵解能力。丙酮酸脫氫酶激酶4（Pyruvate Dehydrogenase Kinase 4,PDK4）是癌細(xì)胞進行有氧糖酵解關(guān)鍵的上游調(diào)節(jié)基因,同時也被認(rèn)為是關(guān)鍵的耐藥基因,在耐藥腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起著關(guān)鍵作用。本文通過探討m6A調(diào)控耐順鉑肺癌細(xì)胞的糖酵解過程及PDK4翻譯的作用機制,為有效克服腫瘤耐藥提供一種新的思路及方向。方法:1.常規(guī)體外培養(yǎng)人肺腺癌細(xì)胞株A549以及耐順鉑細(xì)胞A549/CDDP,分別檢測細(xì)胞的ATP含量、葡萄糖攝取能力及產(chǎn)乳酸能力,比較癌細(xì)胞及耐藥細(xì)胞之間的代... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

A549和A549/CDDP的代謝指標(biāo)檢測A.A549及A549/CDDP細(xì)胞對順鉑敏感性的存活率檢測；B.A549及A549/CDDP細(xì)胞的ATP含量；C.A549及A549/CDDP細(xì)胞的葡萄糖攝��；D.A549及A549/CDDP細(xì)胞的

16細(xì)胞代謝產(chǎn)能主要有兩種形式：糖酵解和氧化磷酸化[8]。為了進一步證明A549/CDDP主要依賴糖酵解產(chǎn)能，我們使用SeahorseXF-96細(xì)胞能量代謝分析儀檢測細(xì)胞的OCR與ECAR以反映線粒體氧化磷酸化和糖酵解水平。圖1.2所示，A549/CDDP的線粒體呼吸能力較低，而糖酵解能力更強。以上結(jié)果說明相較于肺癌A549細(xì)胞，耐順鉑肺癌細(xì)胞株A549/CDDP的代謝能力顯著增強，主要是依賴糖酵解產(chǎn)能。圖1.2A549和A549/CDDP線粒體呼吸（OCR）和糖酵解（ECAR）功能檢測.與A549細(xì)胞相比,n=3.

m6A參與肺癌A549耐藥過程.

【參考文獻】：
期刊論文
[1]CDH13基因啟動子甲基化對非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞順鉑耐藥機制的研究[J]. 王燕,楊家盛,王鈞.  國際呼吸雜志. 2018 (12)
[2]miR-103a-3p在乳腺癌組織和血清中的表達(dá)及通過下調(diào)PDK4抑制乳腺癌細(xì)胞的有氧糖酵解及增殖[J]. 張亞珍,何貴省,吳曉明,宋杰峰,吳煌福.  中國腫瘤生物治療雜志. 2018(05)
[3]Clinicopathological predictors of long-term benefit in breast cancer treated with neoadjuvant chemotherapy[J]. Marco Galvez,Carlos A Castaneda,Joselyn Sanchez,Miluska Castillo,Lia Pamela Rebaza,Gabriela Calderon,Miguel De La Cruz,Jose Manuel Cotrina,Julio Abugattas,Jorge Dunstan,Henry Guerra,Omar Mejia,Henry L Gomez.  World Journal of Clinical Oncology. 2018(02)
[4]缺氧誘導(dǎo)因子-1α參與癌細(xì)胞遷移和侵襲的作用機理[J]. 蔣珺,康曉曦,羅成,王立魁,張燕.  生命科學(xué). 2016(09)
[5]二氯乙酸聯(lián)合順鉑對人結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞凋亡的影響[J]. 孫潔,孟祥軍.  中華普通外科雜志. 2015 (02)
[6]二氯乙酸鈉誘導(dǎo)肺腺癌細(xì)胞株A549凋亡的實驗研究[J]. 朱明珍,茅國新,蔣華,王勇軍.  現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生. 2014(03)

碩士論文
[1]FoxO3a通過抑制PDK4影響PC9細(xì)胞對Gefitinib耐藥的作用機制[D]. 匡飛.鄭州大學(xué) 2018
[2]EGLN1和PDK4在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)及臨床意義[D]. 陳艷榮.第三軍醫(yī)大學(xué) 2017
[3]長鏈非編碼RNA分子UCA1介導(dǎo)胃癌多藥耐藥的機制研究[D]. 張哲.第四軍醫(yī)大學(xué) 2015
[4]二氯乙酸協(xié)同低劑量溶瘤麻疹病毒治療神經(jīng)膠質(zhì)瘤[D]. 李春妍.南京大學(xué) 2013



本文編號：3612745