目的:順鉑耐藥是目前治療肺癌過(guò)程中要面臨的主要難關(guān)。耐藥腫瘤的基本特征之一就是代謝異常,特別是糖酵解異常,但其作用機(jī)制尚未被完全闡明。N6-甲基腺苷（m6A）mRNA修飾在調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的多種生物學(xué)功能有著關(guān)鍵作用,影響癌癥的發(fā)生發(fā)展。但是它的功能,特別是關(guān)于癌癥代謝重編程的研究在很大程度上仍然是未知的。我們發(fā)現(xiàn),在肺癌細(xì)胞耐順鉑過(guò)程中存在mRNAs的m6A修飾,甲基轉(zhuǎn)移酶3（Methyltransferase like3,Mettl3）的缺失使得m6A甲基化水平下調(diào),并抑制耐順鉑肺癌細(xì)胞的代謝能力,特別是糖酵解能力。丙酮酸脫氫酶激酶4（Pyruvate Dehydrogenase Kinase 4,PDK4）是癌細(xì)胞進(jìn)行有氧糖酵解關(guān)鍵的上游調(diào)節(jié)基因,同時(shí)也被認(rèn)為是關(guān)鍵的耐藥基因,在耐藥腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起著關(guān)鍵作用。本文通過(guò)探討m6A調(diào)控耐順鉑肺癌細(xì)胞的糖酵解過(guò)程及PDK4翻譯的作用機(jī)制,為有效克服腫瘤耐藥提供一種新的思路及方向。方法:1.常規(guī)體外培養(yǎng)人肺腺癌細(xì)胞株A549以及耐順鉑細(xì)胞A549/CDDP,分別檢測(cè)細(xì)胞的ATP含量、葡萄糖攝取能力及產(chǎn)乳酸能力,比較癌細(xì)胞及耐藥細(xì)胞之間的代... 

【文章來(lái)源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁(yè)數(shù)】：78 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

A549和A549/CDDP的代謝指標(biāo)檢測(cè)A.A549及A549/CDDP細(xì)胞對(duì)順鉑敏感性的存活率檢測(cè)；B.A549及A549/CDDP細(xì)胞的ATP含量；C.A549及A549/CDDP細(xì)胞的葡萄糖攝��；D.A549及A549/CDDP細(xì)胞的

16細(xì)胞代謝產(chǎn)能主要有兩種形式：糖酵解和氧化磷酸化[8]。為了進(jìn)一步證明A549/CDDP主要依賴(lài)糖酵解產(chǎn)能，我們使用SeahorseXF-96細(xì)胞能量代謝分析儀檢測(cè)細(xì)胞的OCR與ECAR以反映線(xiàn)粒體氧化磷酸化和糖酵解水平。圖1.2所示，A549/CDDP的線(xiàn)粒體呼吸能力較低，而糖酵解能力更強(qiáng)。以上結(jié)果說(shuō)明相較于肺癌A549細(xì)胞，耐順鉑肺癌細(xì)胞株A549/CDDP的代謝能力顯著增強(qiáng)，主要是依賴(lài)糖酵解產(chǎn)能。圖1.2A549和A549/CDDP線(xiàn)粒體呼吸（OCR）和糖酵解（ECAR）功能檢測(cè).與A549細(xì)胞相比,n=3.

m6A參與肺癌A549耐藥過(guò)程.

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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