發(fā)布時間：2022-01-20 22:32

　　目的研究胃動蛋白2（Gastrokine 2,GKN2）對CD44（+）SGC7901胃癌干細(xì)胞（Gastric cancer stem cells,GCSCs）增殖、遷移、侵襲、周期和凋亡的影響,初步闡明GKN2對GCSCs的抑制作用,為臨床設(shè)計有效治療胃癌的策略提供理論依據(jù)。方法1、構(gòu)建GKN2載體質(zhì)粒,瞬時轉(zhuǎn)染人胃癌MKN28細(xì)胞,熒光顯微鏡下觀察轉(zhuǎn)染效率,Western Blot驗證GKN2轉(zhuǎn)染是否成功;從GKN2轉(zhuǎn)染的細(xì)胞培養(yǎng)上清液中收集分泌蛋白,超濾法進行純化和濃縮;采用BCA蛋白定量法測定蛋白濃度,考馬斯亮藍(lán)染色、Western Blot驗證分泌蛋白為GKN2。2、采用免疫磁珠細(xì)胞分選（Magnetic cell sorting,MACS）技術(shù)從人胃癌SGC7901細(xì)胞中分選出CD44（+）GCSCs,免疫熒光檢測分選效率。3、運用CCK-8、腫瘤克隆球形成、Transwell遷移、Transwell侵襲和流式細(xì)胞術(shù)分析GKN2對GCSCs增殖、遷移、侵襲、周期和凋亡的影響;CCK-8實驗比較GKN2與5-Fu和VP-16對GCSCs的增殖抑制作用。結(jié)果1、轉(zhuǎn)染實驗結(jié)果顯... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：99 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 緒論
    1.1 前言
    1.2 技術(shù)路線
第2章 實驗材料與方法
    2.1 實驗材料
    2.2 實驗方法
第3章 實驗結(jié)果
第4章 討論
第5章 結(jié)論
參考文獻
文獻綜述
    References
基金項目
作者攻讀學(xué)位期間的科研成果
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]胃癌相關(guān)下調(diào)基因在胃癌及癌前病變中的表達及其意義[J]. 趙占偉,方誠,王飛,雙劍博,王剛,華謹(jǐn),杜建軍.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2014(03)
[2]Cancer stem cells in colorectal cancer from pathogenesis to therapy: Controversies and perspectives[J]. Caterina Fanali,Donatella Lucchetti,Marisa Farina,Maddalena Corbi,Valerio Cufino,Achille Cittadini,Alessandro Sgambato.  World Journal of Gastroenterology. 2014(04)
[3]Trefoil factors:Tumor progression markers and mitogens via EGFR/MAPK activation in cholangiocarcinoma[J]. Kanuengnuch Kosriwong,Trevelyan R Menheniott,Andrew S Giraud,Patcharee Jearanaikoon,Banchob Sripa,Temduang Limpaiboon.  World Journal of Gastroenterology. 2011(12)
[4]Expression of trefoil factors 1 and 2 in precancerous condition and gastric cancer[J]. Shu-Qing Shi, Jian-Ming Yang, Department of Gastroenterology, Zhejiang Provincial People’s Hospital, Hangzhou 310014, Zhejiang Province, China Jian-Ting Cai, Department of Gastroenterology, Second Affiliated Hospital, Zhejiang University School of Medicine, Hangzhou 310009, Zhejiang Province, China.  World Journal of Gastroenterology. 2006(19)
[5]胃癌相關(guān)新基因GDDR的研究[J]. 杜建軍,竇科峰,彭淑牖,李江濤,劉穎斌,王為忠,管文賢,高志清.  中華外科雜志. 2005(01)
[6]Expression of TFF2 and Helicobacter pylori infection in carcinogenesis of gastric mucosa[J]. Guo-Yong Hu Bao-Ping Yu Wei-Guo Dong Mu-Qi Li Jie-Ping Yu He-Sheng Luo Zong-Xue Rang Gastroenterology Department,Renmin Hospital of Wuhan University,Wuhan 430060,Hubei Province,China.  World Journal of Gastroenterology. 2003(05)
[7]胃癌下調(diào)基因組cDNA抑制消減文庫的建立及鑒定[J]. 杜建軍,竇科峰,王為忠.  中華醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)雜志. 2002(02)

碩士論文
[1]GKN2在胃癌中的表達及對MKN28細(xì)胞的抑制作用[D]. 劉姣.南華大學(xué) 2015
[2]GDDR在胃癌凋亡中的作用[D]. 王飛.第四軍醫(yī)大學(xué) 2014
[3]DADS抑制CD44+人胃癌細(xì)胞AGS“干樣”特性的作用研究[D]. 段海瑞.南華大學(xué) 2012
[4]DATS對人胃癌SGC-7901細(xì)胞中CSCs樣細(xì)胞的作用及機制初步研究[D]. 陳真?zhèn)?南華大學(xué) 2011



本文編號：3599643