發(fā)布時間：2022-01-19 16:52

　　背景與目的肺癌在世界范圍內(nèi)是發(fā)病率和死亡率較高的惡性腫瘤之一,嚴重危害著人們的生命健康安全。大量的研究發(fā)現(xiàn)肺癌細胞在機體內(nèi)可通過多種途徑拮抗機體對于細胞增殖和凋亡的調(diào)控作用,造成肺癌細胞在機體組織內(nèi)的惡性增殖從而對機體內(nèi)正常的組織細胞功能產(chǎn)生損害。近來有研究證實腫瘤壞死因子-α（Tumor necrosis factor-α,TNF-α）可引起腫瘤細胞的凋亡,且其作為由免疫細胞分泌的具有多種復(fù)雜生物活性的細胞因子,可介導(dǎo)包括增殖、分化、炎癥和細胞凋亡在內(nèi)的多種細胞反應(yīng),具有廣泛的抗腫瘤作用。而核轉(zhuǎn)錄因子-κB（Nuclear factor-κB,NF-κ]B）是TNF-α誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)核心,能與多種增強子以及啟動子結(jié)合,抑制NF-κB的活性理論上可以阻斷TNF-α啟動的炎癥反應(yīng)、細胞凋亡以及氧化應(yīng)激的水平變化。熱休克蛋白-70（heat shock protein-70,HSP70）是熱休克蛋白家族（Heat shock proteins,HSPs）中的重要一員可作為分子伴侶參與蛋白質(zhì)的折疊、組裝和降解等生物學過程,有研究發(fā)現(xiàn)HSP70在肺癌組織中的過表達與肺癌患者的不良預(yù)后有... 

【文章來源】：鄭州大學河南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖３．１不同濃度ＴＮＦ－ａ對Ａ５４９細胞增殖活性的影響??：＊，尸＜０．０５??

????３．１．２不同濃度ＴＮＦ－ｃ［對Ａ５４９細胞內(nèi)相關(guān)蛋白的影響??為進一步驗證ＴＮＦ－ａ對Ａ５４９細胞內(nèi)相關(guān)蛋白的影響，使用不同濃度的ＴＮＦ－ａ刺激??Ａ５４９細胞２４ｈ后分別收集各組細胞并提取總蛋白，采用ＢＣＡ法檢測各組總蛋白的濃度，??根據(jù)不同濃度梯度的蛋白標準品在５６２ｎｍ處的吸光度，繪制出蛋白濃度的標準曲線，如??圖３．２所示，接著將各組總蛋白樣本在５６２ｎｍ處的吸光度大小帶入圖３．２中的公式中計??算出各組蛋白樣本的濃度大小，結(jié)果如表３．２所示，最后加入預(yù)先配置好的裂解液將各??組總蛋白樣本的濃度統(tǒng)一稀釋至２ｐｇ４ｉｌ。??準－］?ｙ－２．７２４１ｘ?？??Ｒｓ＝?０．９＾４０－＇??蛋－ｏ．ｓ??度，２?，，？？??吸光度（ｏｄ５６２）??圖３．２蛋白濃度標準曲線??表３．２不同組別提取的總蛋白樣本濃度大小??分組?０．００ｎｍｏｌ／Ｌ?組?０．２５ｍｎｏｌ／Ｌ?組?０．５０ｎｍｏｌ／Ｌ?組?１．００ｎｍｏｌ／Ｌ?組??ＯＤ５６２?０．９７?０．８２?０．８５?０．９０??蛋白濃度（ＨｇＶｌ）?２．６５?２．２２?２．３１?２．４５??不同濃度的ＴＮＦ－ａ對Ａ５４９細胞中ＨＳＰ７０蛋白的表達影響如圖３．３所示，單因素方??差分析的結(jié)果顯示：不同濃度ＴＮＦ－ａ刺激Ａ５４９細胞２４ｈ，細胞中ＨＳＰ７０蛋白的表達變??化不存在統(tǒng)計學上的差異（／＾值：６．８２０，尸＝０．５１８＞０．０５）。結(jié)合上一步ＣＣＫ－８實驗的結(jié)??果，選擇０．５０?ｎｍｏｌ／Ｌ濃度的ＴＮＦ－ａ進行下一步的實驗，以０．５０?ｎｍｏｌ／Ｌ濃度的ＴＮＦ－ａ??刺激Ａ５４９細胞２４ｈ后檢測ＮＯＸ１蛋白、ＮＦ－

????差異均具有統(tǒng)計學意義（ｔ值分別為：５．４６９、５．０１４，?Ｐ＜０．０５）。??ＴＮＦ－ａ?０?０．２５?０．５０?１．００?ｎｉｎｏｌ／Ｌ??ＨＳＰ７０?一一》一??ＧＡＰＤＨ?＿?＿?辦??１．５－１??０?丁??她??，??圖３．３不同濃度ＴＮＦ－ａ對Ａ５４９細胞中ＨＳＰ７０蛋白表達的影響??ＮＦ－ｋＢ??ＧＡＰＤＨ?ＧＡＰＤＨ??？ａ?ｈ?ａ?ｂ??１．５＊１?１．５－，??Ｓ?ｒ＾１?Ｓ?ｒ＾＝－ｉ??泛?１．０－?■?＾?１．０－??＾?Ｉ??２?０?５－?＾?０．５－??ｌｉ?Ｏ??ｚ?ｚ??〇．〇Ｊ??１???１????〇．〇Ｊ—＾一??．／?／?／??圖３．４?ＴＮＦ－ａ對Ａ５４９細胞中ＮＯＸ１、ＮＦ－ｋＢ蛋白表達的影響??注：ａ．空白組ｂ．?ＴＮＦ－ａ組；＊表示與空白組相比，＿Ｐ＜０．０５．??１９??


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