結(jié)直腸癌（Colorectal cancer,CRC）作為如今普外科最常見的消化道腫瘤之一,由于缺乏有效的分子診斷及治療靶標(biāo),疾病一旦確診,患者基本都已經(jīng)位于中晚期,而目前主要的治療手段還是以手術(shù)治療為主,多數(shù)患者預(yù)后不是很理想。長鏈非編碼RNA（long non-coding RNA）屬于一類長度約為220nt的非編碼RNA,已有研究表明其參與結(jié)直腸癌等多種惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展。然而,lnc RNA AC007392.4在結(jié)直腸癌中的功能尚不清楚,因此,本研究首次系統(tǒng)性探索其在結(jié)直腸癌中的生物學(xué)功能,并且初步探索在結(jié)直腸癌中AC007392.4發(fā)揮生物學(xué)功能的潛在分子機制。目的:結(jié)直腸癌為我國常見的惡性腫瘤之一,本研究以前期篩選的lnc RNA AC007392.4為研究對象,探討其參與結(jié)直腸癌惡性生物學(xué)功能及潛在分子機制,為結(jié)直腸癌的臨床診斷和治療提供重要參考依據(jù)。方法:通過癌癥基因組圖譜（the Cancer Genome Atlas,TCGA）分析長鏈非編碼RNA AC007392.4在結(jié)直腸組織的表達情況,接著通過臨床樣本驗證AC007392.4在結(jié)直腸癌中的表達;通過皮爾森相... 

【文章來源】：蚌埠醫(yī)學(xué)院安徽省

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

AC007392.4在結(jié)直腸癌組織中高表達（A）且與臨床病理分期有關(guān)（B）

19表達差異性，結(jié)果顯示：相較于41例正常的癌旁組織，AC007392.4在480例結(jié)直腸癌組織中顯著高表達，且相對于低分期（StageI-II）的組織中，其在高分期（StageIII-IV）的組織中表達量也具有差異性，說明AC007392.4可能參與結(jié)直腸癌的病理進展，與結(jié)直腸癌的發(fā)生發(fā)展具有一定的相關(guān)性。3.2臨床樣本驗證AC007392.4在結(jié)直腸癌中高表達圖2AC007392.4在結(jié)直腸癌組織中的表達顯著高于其對應(yīng)的癌旁組織（5對）此步驟由上�？党晒緟f(xié)助完成，樣本均來源于蚌埠醫(yī)學(xué)院附屬腫瘤醫(yī)院的結(jié)直腸癌術(shù)后患者，結(jié)果顯示AC007392.4在臨床樣本中的含量具有差異性，相較于配對的癌旁組織來說，其在結(jié)直腸癌組織中顯著高表達，具有統(tǒng)計學(xué)意義，這進一步驗證了AC007392.4在結(jié)直腸癌中具有表達差異性，提示其可能參與結(jié)直腸癌的發(fā)生發(fā)展。

22與細胞周期的調(diào)控與DNA修復(fù)等，而在生物學(xué)途徑中，AC007392.4主要富集與細胞周期及有絲分裂G2/M期等。這些結(jié)果共同提示了AC007392.4極有可能與細胞周期有關(guān)，尤其在G2/M期中發(fā)揮生物學(xué)功能。3.5瞬時轉(zhuǎn)染效率的驗證圖5SW480細胞轉(zhuǎn)染過表達載體及轉(zhuǎn)染siRNA效率的驗證為了使后續(xù)的實驗結(jié)果更加的靠，同時也為了保證脂質(zhì)體Lipofectamine6000的轉(zhuǎn)染效率，我們通過實時熒光定量PCR對瞬時轉(zhuǎn)染效率進行了驗證，轉(zhuǎn)染后提取細胞中的總RNA，通過反轉(zhuǎn)錄及擴增反應(yīng)，以β-actin作為內(nèi)參對照。結(jié)果可以看出，無論是過表達或敲低，AC007392.4的RNA表達水平均發(fā)生了明顯的變化，具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），證明了本研究的轉(zhuǎn)染方法及轉(zhuǎn)染效率可信，這對于下一步的功能驗證及機制探索具有重要的鋪墊作用。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]HOTAIR:an oncogenic long non-coding RNA in different cancers[J]. Mohammadreza Hajjari,Abbas Salavaty.  Cancer Biology & Medicine. 2015(01)

碩士論文
[1]結(jié)直腸癌相關(guān)長鏈非編碼RNA的篩選與功能研究[D]. 張俏.蚌埠醫(yī)學(xué)院 2015



本文編號：3588382