背景及目的:大腸癌（CRC）是我國常見的惡性腫瘤之一,其發(fā)病率及死亡率在近年呈上升趨勢,多數(shù)病人發(fā)病時已處于中晚期,轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)是患者死亡的主要原因。目前,手術(shù)治療輔以放、化療為主要的治療手段,因此早期篩查與診斷大腸癌尤為重要。隨著分子診斷學(xué)的不斷發(fā)展,分子標(biāo)記物逐漸用來早期篩查及診斷惡性腫瘤,其具有高靈敏度及特異性的特點。大量研究證明酪氨酸3-單加氧酶/色氨酸5-單加氧酶激活蛋白,ε肽（Tyrosine 3-monooxygenase/tryptophan 5-monooxygenase activation activation protein,epsilon,YWHAE）參與細(xì)胞的多種生理活動,在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移中發(fā)揮一定的作用。本文研究YWHAE在大腸癌中的表達(dá)情況以及對其生物信息學(xué)進(jìn)行分析。通過挖掘相關(guān)專業(yè)數(shù)據(jù)庫,探索YWHAE在大腸癌發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移中的作用,旨為臨床早期診斷大腸癌提供新型腫瘤標(biāo)志物以及基因治療靶點。方法:本實驗方法涉及以下3個方面:（1）采用色譜與質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)來篩選差異表達(dá)的蛋白。（2）查閱大量相關(guān)文獻(xiàn),篩選出YWHAE作為本次實驗的目標(biāo)蛋白。應(yīng)用We... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖３．２?ＹＷＨＡＥ的質(zhì)譜圖??

?第４章免疫�。咣E試驗驗證ＹＷＨＡＥ在大腸癌中的表達(dá)情況???根據(jù)試劑盒說明書進(jìn)行ＥＣＬ顯色壓膠片，然后用凝膠圖像分析系統(tǒng)??對膠片進(jìn)行掃描，選擇自動吸光度分析，根據(jù)目標(biāo)蛋白ＹＷＨＡＥ與之??相對應(yīng)的內(nèi)參Ｐ?－ａｃｔｉｎ條帶的比值，從而來評價ＹＷＨＡＥ的表達(dá)水??平。??４．２結(jié)果??免疫印跡實驗驗證了?ＹＷＨＡＥ在大腸癌組織中表達(dá)高于癌旁組??織，結(jié)果如圖４．２所示，其中，Ａ為大腸癌組織，Ｂ為癌旁組織。??Ａ?Ｂ??ＹＷＨＡＥ?３０ＫＤ??４３ＫＤ??圖４．２?ＹＷＨＡＥ在大腸癌及癌旁組織中的表達(dá)??４．３討論??免疫印跡實驗（蛋白質(zhì)印跡法）即Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ是分子生物學(xué)、生??物化學(xué)和免疫遺傳學(xué)中經(jīng)常使用的一種實驗方法。其基本原理是通過??特異性抗體對凝膠電泳處理過的細(xì)胞或組織標(biāo)本進(jìn)行著色。通過分析??著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質(zhì)在所分析的細(xì)胞或組織中表??達(dá)情況的信息。蛋白質(zhì)印跡技術(shù)逐漸從對復(fù)雜混合物中的特定蛋白質(zhì)??的鑒定演變?yōu)橹苯訉蝹�細(xì)胞中蛋白質(zhì)檢測，使其成為臨床研究中重??要分析工具。蛋白質(zhì)印跡技術(shù)可以用于作為ＨＩＶ、寄生蟲和真菌病的??臨床診斷［４５］。??１９??

?ｌ?５ｋ＂?１?．?〇．?〇?？?ｍｕｔａｔｅｄ??ｉ４ｋ－??畫?３ｋ－?。?，?？?Ｂ—ｕ＿??ｉ?２ｋ－。細(xì)歉。，。、９?—??■?ｉｋ＿。戮，－？??１?ｏ??２?〇－??ａ．??ＬＵ??＜??，?，?，?，?，?ｒ??§?５ｋ?１０ｋ?１５ｋ?２０ｋ?２５ｋ?３０ｋ??Ｅ??ｍＲＮＡ?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，?ＲＳＥＭ?（Ｂａｔｃｈ?ｎｏｒｍａｌｉｚｅｄ?ｆｒｏｍ?ｌｌｌｕｍｉｎａ?ＨｉＳｅｑ＿ＲＮＡＳｅｑＶ２）：?ＹＷＨＡＥ??圖５．５?ＹＷＨＡＥ與ＴＰ５３之間的表達(dá)相關(guān)性??５．２．３?ＣＯＳＭＩＣ數(shù)據(jù)庫分賭果??通過分析ＣＯＳＭＩＣ數(shù)據(jù)庫，我們可以得到ＹＷＨＡＥ總突變類型??及其比例，如圖３．５所示，該圖顯示了具有突變的所有類型，一共有??３３１例樣本參與研究，括號中的數(shù)據(jù)表示具有特定突變類型的比率，??因為一種樣本不止有一種突變類型，所示說各種突變類型樣本數(shù)量總??和不等于總體樣本數(shù)量。在表中，我們可以觀察到，在各種突變類型??中，無義突變所占比例最小，占０．９１％，錯義突變所占比例最高，達(dá)??１７．５２％。其他突變類型所占比列較小，占比區(qū)間為０．００％－６．０４％。具??體數(shù)據(jù)信息如圖５．６所示。??２７??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]14-3-3蛋白與腫瘤發(fā)生發(fā)展的研究進(jìn)展[J]. 楊建軍,秦環(huán)龍.  世界華人消化雜志. 2010(28)



本文編號：3579006