研究背景及目的:肺癌是我國發(fā)病率和死亡率較高的疾病,其中約85%為非小細(xì)胞肺癌（non-small cell Lung cancer,NSCLC）。以鉑類為基礎(chǔ)的聯(lián)合化療是目前臨床應(yīng)用最為廣泛的化療方案,然而長期使用鉑類藥物常出現(xiàn)耳毒性、腎毒性等副作用及耐藥反應(yīng),嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量及治療效果。最近研究表明,化療藥物的使用可能通過重塑腫瘤微環(huán)境中免疫細(xì)胞組成、改變腫瘤細(xì)胞自身免疫分子如PD-L1的表達(dá)等途徑抑制腫瘤免疫應(yīng)答,從而導(dǎo)致腫瘤免疫逃逸。因此,鉑類化療藥物是否會通過誘導(dǎo)肺癌腫瘤免疫抑制從而限制自身的抗腫瘤作用,是臨床上值得關(guān)注的問題。目前鉑類藥物對于NSCLC細(xì)胞PD-L1表達(dá)影響的相關(guān)研究尚少,其內(nèi)在的調(diào)控機(jī)制仍不清楚。本文擬研究卡鉑對NSCLC細(xì)胞PD-L1表達(dá)的影響及其關(guān)鍵調(diào)控機(jī)制,從而為腫瘤細(xì)胞PD-L1表達(dá)調(diào)控提供新思路,為鉑類藥物參與腫瘤免疫逃逸提供新證據(jù),并為鉑類藥物化療與免疫療法聯(lián)用提供支持依據(jù)。研究內(nèi)容和方法:體外培養(yǎng)人源非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系H292細(xì)胞、A549細(xì)胞和H1299細(xì)胞,采用實時熒光定量PCR、Western blotting、細(xì)胞免疫熒光及流式... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：84 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－２卡鉑以濃度依賴性方式上調(diào)ＮＳＣＬＣ細(xì)胞中ＰＤ－Ｌｌ?ｍＲＮＡ的表達(dá)水平??（Ａ）?Ｈ２９２細(xì)胞分別在含０?ｎＭ，?１０?ｐＭ．?２０?ｎＭ，?３０?ｎＭ．?４０?ｈＭ．?５０?ｎＭ卡鉬的培養(yǎng)基中培養(yǎng)４８??小時，（Ｂ）?Ａ５４９?細(xì)胞和（Ｃ）?Ｈ１２９９?細(xì)胞分別在含?０?ｎＭ，?２５ｊｉＭ，?５０?ｎＭ．?７５＾Ｍ，?ｌＯＯｆｉＭ，?１５０?ｎＭ??

?碩士學(xué)位論文???ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ?ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ，?＊?Ｐ＜０．０５，?＊＊?Ｐ＜０．０１，?＊＊＊?Ｐ＜０．００５?ｖｅｒｓｕｓ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｇｒｏｕｐ?ｂｙ?ｏｎｅ－ｗａｙ??ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｖａｒｉａｎｃｅ?ａｎａｌｙｓｉｓ．??Ａ?ＰＤ－Ｌ１?ＤＡＰＩ?Ｍｅｒｇｅ??咖■■■??一?■■■??Ｂ??Ｈ２９２?ｃｅｌｌ??；２．５１?＊??ｇ：２．０－??ｃｌ??１１，０：?＿??ｎ?■??ｉ?〇，ＬＢＩ＿??Ｃｏｎｔｒｏｌ?Ｓ０（ｉＭ?ＣＢＰ??圖１－Ｓ卡銷上調(diào)Ｈ２９２細(xì)胞ＰＤ－Ｌ１蛋白表達(dá)??（Ａ－Ｂ）?Ｈ２９２細(xì)胞經(jīng)過５（）?ｆｉＭ卡鈷刺激４８小時，利用免疫熒光顯微鏡檢測細(xì)胞內(nèi)ＰＤ－Ｌ１??的定位。ＰＤ－Ｌ１被抗體標(biāo)記為紅色熒光，細(xì)胞核經(jīng)ＤＡＰＩ染色為藍(lán)色。ＡＯＤ代表平均光密??度。＊Ｐ＜０．０５，＊＊Ｐ＜０．０１，＊＊＊Ｐ＜０．０（）５經(jīng)單樣本Ｔ檢驗分析后與對照組相比．差異具有統(tǒng)計??學(xué)意義。??Ｆｉｇｕｒｅ．１－５?Ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎ?ｕｐｒｃｇｕｌａｔｃｄ?ｔｈｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ＰＤ－Ｌ１?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｉｎ?Ｈ２９２?ｃｅｌｌｓ??（Ａ－Ｂ）?Ｈ２９２?ｃｅｌｌ?ｗｅｒｅ?ｔｒｅａｔｅｄ?ｗｉｔｈ?５０?（，ｉＭ?ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎ?ｆｏｒ?４８ｈ．?ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ?ｌｏｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ＰＤ－Ｌ１?ｗｅｒｅ??３１??

?項士學(xué)位論文???Ｂ??ＩＩ２９２?ｃｅｌｌ??Ｃ??？２?１００ｎ??Ｋ??＾?８０－?？?．??６０－?＿??ｊ：：ｌ?ｍ?￣??＾?Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＣＢＰ（５０ｕＭ）??圖１－６卡怕刺激ＮＳＣＬＣ細(xì)胞ＰＤ－Ｌ１可抑制Ｔ細(xì)胞增殖??（Ａ－Ｂ）Ｈ２９２細(xì)胞經(jīng)５〇ｎＭ卡鉑刺激４８小時后繼續(xù)與Ｔ細(xì)胞共培養(yǎng)７２小時。采用流式細(xì)胞??術(shù)檢測Ｔ細(xì)胞的增殖能力。＊ｐ＜?０．０５，＊＊?ｐ＜?０．０１，＊＊＊?ｐ＜?０．００５采用獨立樣本ｔ檢驗，與對??照組比較，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。??Ｆｉｇｕｒｅ．?１－６?Ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎ?ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ?ｏｆ?ＮＳＣＬＣ?ｃｅｌｌｓ?ＰＤ－Ｌ１?ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ?Ｔ?ｃｅｌｌ?ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ??（Ａ－Ｂ）?Ｈ２９２?ｃｅｌｌｓ?ｗｅｒｅ?ｔｒｅａｔｅｄ?ｗｉｔｈ?５０｜ｉＭ?ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎ?ｆｏｒ?４８ｈ?ｐｒｉｏｒ?ｔｏ?ｃｏ－ｃｕｌｔｕｒｅｄ?ｗｉｔｈ?Ｔ?ｃｅｌｌｓ?ｆｏｒ??７２ｈ．?Ｔｈｅ?ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ?ｃａｐａｃｉｔｙ?ｏｆ?Ｔ?ｃｅｌｌｓ?ｗａｓ?ｄｅｔｅｃｔｅｄ?ｂｙ?ｆｌｏｗ?ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ．?＊?Ｐ＜０．０５；?＊＊?Ｐ＜０．０１?；??＊＊＊?ｐ＜〇?ｑｑ５?ｖｅｒｓｕｓ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｇｒｏｕｐ?ｂｙ?ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ?ｓａｍｐｌｅ?Ｔ－ｔｅｓｔ．??１．３．４?ＥＧＦＲ、ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ及ＥＲＫ等信號通路參與卡鉑上調(diào)ＮＳＣＬＣ細(xì)胞ＰＤ－??Ｌ１蛋白表達(dá)??１．３．４．１卡鉑可激活Ｈ２９２細(xì)胞ＥＧＦＲ、ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ及ＥＲＫ等信號通路??研宄表明，多種信號通路可參與ＰＤ－ＬＩ


本文編號：3559640