[目的]肺癌是全世界癌癥相關(guān)死亡最常見的原因,非小細(xì)胞肺癌占所有肺癌病例的85%,盡管目前在治療方面已經(jīng)取得了許多積極進(jìn)展,但患者的總體生存率仍然較低。大多數(shù)患者在診斷時已經(jīng)發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,預(yù)后不良。急需開發(fā)創(chuàng)傷性小且特異度、靈敏度較高,能夠早期診斷肺癌的新型生物標(biāo)志物。越來越多的證據(jù)證明了 lncRNA參與非小細(xì)胞肺癌發(fā)生發(fā)展的過程,本次課題基于前期研究基礎(chǔ),在lncRNA芯片結(jié)果中挑選一批有潛在價值的lncRNA進(jìn)行研究,構(gòu)建相對定量的實時熒光定量PCR檢測方法,尋找有潛力作為新型的腫瘤診斷生物標(biāo)志物的lncRNA分子,為其進(jìn)一步的功能研究奠定基礎(chǔ),為非小細(xì)胞肺癌早期診斷治療以及預(yù)后評估提供新思路。[方法]應(yīng)用課題組前期LncRNA+mRNA表達(dá)譜芯片結(jié)果,篩選出8條有潛力作為診斷標(biāo)志物的候選lncRNA。隨后發(fā)現(xiàn)其中3條lncRNA分子無法設(shè)計適宜引物探針?biāo)爝M(jìn)行剔除。緊接著,我們構(gòu)建多重?zé)晒舛縋CR檢測方法,驗證5條lncRNA分子在20對非小細(xì)胞肺癌組織和配對組織以及42例非小細(xì)胞肺癌組血清,46例良性肺疾病組血清,48例健康組血清中的表達(dá)情況,使用Mann-Whitney非... 

【文章來源】：昆明醫(yī)科大學(xué)云南省

【文章頁數(shù)】：85 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２?ＩｎｃＲＮＡ聚類分析結(jié)果??２５??

２目的基因的篩選??２．１共有表達(dá)基因的篩選??本課題的目的為篩選能夠作為非小細(xì)胞肺癌診斷標(biāo)志物的ＩｎｃＲＮＡ分子，只??有能在大多數(shù)個體中表達(dá)的分子才有潛力作為診斷標(biāo)志物。因此，根據(jù)表達(dá)一致??性原則，我們篩選出在樣本間共有表達(dá)的ＩｎｃＲＮＡ分子，見圖３。圖中篩選出的??ＩｎｃＲＮＡ為在２３對肺癌組織和癌旁組織樣本中１８對樣本所共有表達(dá)上調(diào)的１２??條?ＩｎｃＲＮＡ?〇??§＿?３９０??Ｍ，?ＥＮＳＧ０００００２４９８５９．２?■■??＜?ＥＮＳＧ０００００２５６５６４．１??Ｚ?ＥＮＳＧ０００００２５７９２４１??〇?ｏ?ＥＮＳＧ０００００２６２８８０?１??—Ｌ０Ｃ１４５８３７?２７９?Ｉ??＂Ｓ?ｎｃ－ＨＯＸＣ９－１３９??ｒｏ?ＸＬＯＣ＿００５２２１??｜ｇ＿?ＸＬＯＣ３〇４４４１?１８９?Ｉ??＾?°?ＸＬＯＣ＿００９６７７??＝?ＩＥＮＳＧ０００００２６３５８５１１??〇?ＬＩＴ３４６４?１１７??Ｉ?ＪＸＬＱＣ－Ｑ０？５２７?７５?■■■■??ｚ〇．?■ＯＵＬＪＵＵ??２３?２２?２１?２０?１９?１８?１７?１６?１５?１４?１３?１２??Ｎｕｍｂｅｒ?ｏｆ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｓａｍｐｌｅｓ??圖３共有表達(dá)上調(diào)的ＩｎｃＲＮＡ??２．２目的基因的篩選??２．?２．?１進(jìn)一步挑選出其中基因差異表達(dá)倍數(shù)ＦＣ?（ａｂｓ）彡２以及；？彡０．０５的高表達(dá)??ＩｎｃＲＮＡ，最終挑選出８條ＩｎｃＲＮＡ，見表１１。（ＦＣ由高到低排序）??表１１挑選出的差異表達(dá)的ＩｎｃＲＮＡ??ＬｎｃＲＮＡ?Ｎａｍｅ?Ｐ?ＦＣ?Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ?Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ

６?ｕｐ?２?＋??ＥＮＳＧ０００００２５６５６４．１?５．３０Ｅ－０４?３．６９?ｕｐ?１２?＋??ＸＬＯＣ—０００５２７?１．１９Ｅ－０９?３．２２?ｕｐ?１?＋??ＥＮＳＧ０００００２４９８５９．２?１．６２Ｅ－０４?２．９０?ｕｐ?８?＋??２．２．２在２３對肺癌患者癌組織和癌旁組織中芯片檢測結(jié)果顯示，相對于癌旁組??織，８條ＩｎｃＲＮＡ都呈高表達(dá)狀態(tài)，且表達(dá)一致性較好（除個別樣本外，在２３??對樣本中都為高表達(dá)狀態(tài)），有作為診斷標(biāo)志物的潛力。見圖４－圖１１。??門?ＸＬＯＣ＿００９６７７?門??ｃ－｜?Ｉ?：???Ｉ?－??ｎ?ｎ?ｎ?ｃｎ??１〇－?■???Ｉ???—?—???Ｉ?—?１???—????Ｉ?Ｉ?—??Ｉ?—??ｈａ?Ｉ?Ｉ?ｉ?ｌ?Ｉ?ｎ?１?？?ｓ?ｉ?ｎ??腿：疆ｌｌｉｉｉｉｉ??ｖ?ｖ－?〇?Ｃｊ?ＣＤ?Ｏ?Ｏ?ＣＪ?Ｗ?ｇＴ＞?ＣＤ?Ｑ?Ｑ?〇?ＣＤ?ＣＤ?Ｑ?Ｏ?ｖ?Ｑ?Ｑ?Ｃｊ?〇?〇?？—?ｖ?ｒ￣?ｒ?ｗ￣??ｔ－?ｔ－?ｍ?ｉｒ＞?ｉｎ?ｔｒｉ?ｉｒ＞?ｔｒｉ?ｕ￣＞?ｉｎ?ｕｉ?＾?ｒｓｊ?ｏ＜ｉ?？—?？－?ｒｘ?（Ｎ??ｖ?ｗ＂＂?ｗ－￣?＾?ｗ—?ｗ—?＾?＾?ｗ—?Ｖ?＾?＾?＾?＾?＾?ｗ￣?ｗ—?ｗ—?ｗ—??ｏ１?卜１?〇丨卜丨?＜＿）＿?卜＿?〇丨卜丨?ＣＪ１?卜＿?ｏＶ１０１?卜＿?ｏＶ１?Ｌ）１?？－＿?〇丨卜１?（Ｊ＿?卜，ｕＶ１０１?卜１?〇＿?卜＿?（Ｊ１１－丨?〇丨?ｌ－＇Ｏ１?卜１?〇＿?？－＿〇？卜１?〇＿卜丨?〇丨》－＿?Ｏ１??ｎ?廠］廠Ｉ廠！廠］廠Ｉ廠Ｉ

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]實時熒光定量PCR技術(shù)及其應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 梁子英,劉芳.  現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技. 2020(06)
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[3]全球女性乳腺癌流行情況研究[J]. 師金,梁迪,李道娟,王立群,靳晶,張亞琛,賀宇彤.  中國腫瘤. 2017(09)
[4]長鏈非編碼RNAFENDRR對宣威肺癌XWLC-05細(xì)胞增殖、遷移及侵襲的影響[J]. 陳冉,王玉明,段勇,張艷亮,宋貴波,吳春燕,孫巖,杜娜,肖成.  中國腫瘤生物治療雜志. 2017(07)
[5]長鏈非編碼RNA研究進(jìn)展[J]. 楊峰,易凡,曹慧青,梁子才,杜權(quán).  遺傳. 2014(05)
[6]實時熒光定量PCR技術(shù)研究進(jìn)展及其應(yīng)用[J]. 陳旭,齊鳳坤,康立功,李景富.  東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2010(08)
[7]實時熒光定量RT-PCR內(nèi)參基因的選擇[J]. 陳鳳花,王琳,胡麗華.  臨床檢驗雜志. 2005(05)

碩士論文
[1]FENDRR在宣威地區(qū)人群肺癌發(fā)生發(fā)展中分子機(jī)制的初步探討[D]. 趙瑜.昆明醫(yī)科大學(xué) 2019
[2]云南宣威肺癌相關(guān)LncRNAs的初步篩選及表達(dá)研究[D]. 李慶.昆明醫(yī)科大學(xué) 2015



本文編號：3532802