肝癌對(duì)人類(lèi)健康危害嚴(yán)重,發(fā)病率和病死率高,我國(guó)是肝癌的高發(fā)區(qū),肝癌相關(guān)死亡率居全球前列。肝癌早期缺乏典型臨床癥狀,多數(shù)患者起病時(shí)即為肝癌中晚期,失去了外科手術(shù)治療的機(jī)會(huì)。而外科手術(shù)以外的介入、放療及生物治療等療效不甚理想,且肝癌惡性程度高易復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移,中晚期肝癌的治療仍是世界難題,因此,開(kāi)發(fā)有效藥物治療具有重要意義。人工合成的小分子嘌呤類(lèi)似物reversine在包括人前列腺癌、甲狀腺癌、乳腺癌、非小細(xì)胞肺癌及人尿路上皮細(xì)胞腫瘤等中均被證實(shí)具有抗腫瘤作用,并且reversine被證實(shí)是ATP競(jìng)爭(zhēng)性Aurora激酶抑制劑。通過(guò)對(duì)文獻(xiàn)回顧所知目前reversine對(duì)肝癌的研究還未見(jiàn)系統(tǒng)報(bào)導(dǎo),在本研究中,擬探討了 reversine對(duì)人肝癌細(xì)胞HepG2生長(zhǎng)的影響作用及其相關(guān)機(jī)制,為尋找新的肝細(xì)胞癌治療靶點(diǎn)提供理論依據(jù)。本課題探討了 reversine對(duì)人肝癌細(xì)胞HepG2增殖、克隆形成、細(xì)胞凋亡和細(xì)胞DNA含量的影響。人肝癌細(xì)胞HepG2細(xì)胞株經(jīng)不同濃度reversine（0.1μM-1.6μM）處理后,應(yīng)用MTS法檢測(cè)其對(duì)細(xì)胞的增殖能力的影響;采用克隆形成實(shí)驗(yàn)評(píng)估reversine作用于人... 

【文章來(lái)源】：廈門(mén)大學(xué)福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【圖文】：

圖２：?Ｒｅｖｅｒｓｉｎｅ可以抑制人肝癌細(xì)胞ＨｅｐＧ２的增殖

ｒｅｖｅｒｓｉｎｅ?（Ｏ．ｌｐＭ、０＿２ｐＭ、０．４｛ｉＭ、０．８｜ｉＭ、ｌ＿６ｎＭ）處理人肝癌細(xì)胞?ＨｅｐＧ２，??以ＤＭＳ？作為對(duì)照。處理１－２周后，于倒置相差顯微鏡下觀察，當(dāng)細(xì)胞形成適??當(dāng)大小的克隆時(shí)，用結(jié)晶紫染色并計(jì)算細(xì)胞克隆數(shù)目，結(jié)果如圖３。與對(duì)照組??（ＤＭＳＯ）相比，ｒｅｖｅｒｓｉｎｅ處理組的肝癌細(xì)胞的克隆數(shù)目及大小均顯著減小??（Ｐ＜０．０５），且較高濃度（０．２－１．６ｇＭ）處理的肝癌細(xì)胞幾乎不能形成肉眼可見(jiàn)的??２５??

我們使用ＤＡＰＩ對(duì)細(xì)胞核進(jìn)行染色后于熒光顯微鏡下發(fā)現(xiàn)，經(jīng)ｒｅｖｅｒｓｉｎｅ??處理后的細(xì)胞出現(xiàn)多核現(xiàn)象，且多核細(xì)胞的數(shù)量與給藥濃度呈正相關(guān)關(guān)系，結(jié)果??如圖４。??—??■■■??圖４：?Ｒｅｖｅｒｓｉｎｅ處理ＨｅｐＧ２細(xì)胞后，ＨｅｐＧ２細(xì)胞出現(xiàn)多核現(xiàn)象。??Ｆｉｇ．４：?Ａｆｔｅｒ?ｔｒｅａｔｍｅｎｔ?ｗｉｔｈ?ｒｅｖｅｒｓｉｎｅ，ｔｈｅ?ＨｅｐＧ２?ｂｅｃａｍｅ?ｍｕｌｔｉｎｕｃｌｅｓ．??隨后，我們采用ＰＩ對(duì)細(xì)胞核內(nèi)ＤＮＡ進(jìn)行染色標(biāo)記，利用流式細(xì)胞術(shù)分別對(duì)??處理組及對(duì)照組細(xì)胞進(jìn)行ＤＮＡ含量檢測(cè)，用ＣｅｌｌＱｕｅｓｔ?Ｐｒｏ軟件分析所有細(xì)胞中??處于二倍體（２Ｎ），四倍體（４Ｎ）和＾八倍體（８Ｎ）的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)，結(jié)果如圖５。??Ｒｅｖｅｒｓｉｎｅ?處理細(xì)胞?４ｇｈ?后，實(shí)驗(yàn)組（Ｏ．ｌｕＭ、０＿２｜ａＭ、０＿４ｐＭ、０．８ｐＭ、丨．６＿１）??２Ｎ?細(xì)胞百分比分別為?６６．１７％、５８．６５％、４２．７４％、３１．１４％、１６．７７％，對(duì)照組為??６９．３５％。４Ｎ?細(xì)胞百分比分別為?２７．１５％、３０．１７％、３２＿７１％、３４．４０％、２９．６７％


本文編號(hào)：3521547