MicroRNA（miRNA）是人類肝細(xì)胞癌（HCC）腫瘤生長和轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子。越來越多的證據(jù)表明,miR-301b-3p在各種類型的人類癌癥中起著驅(qū)動器的作用。然而,miR-301b-3p的表達(dá)模式及其功能作用以及在肝癌中的潛在分子機制仍然知之甚少。我們的研究發(fā)現(xiàn),與鄰近的非腫瘤組織相比,HCC組織中的miR-301b-3p表達(dá)顯著上調(diào)。臨床相關(guān)性分析顯示,高水平的miR-301b-3p與腫瘤大小和晚期腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移階段密切相關(guān)。重要的是,高水平的miR-301b-3p預(yù)測肝癌患者的整體生存率顯著下降。敲低miR-301b-3p抑制細(xì)胞增殖,導(dǎo)致細(xì)胞周期停滯在G2/M期,并誘導(dǎo)Huh7和Hep3B細(xì)胞凋亡。此外,敲低miR-301b-3p抑制了小鼠肝癌的生長。從機制上講,miR-301b-3p直接與轉(zhuǎn)錄輔助因子退變樣蛋白4（VGLL4）的3’UTR結(jié)合并對其表達(dá)負(fù)調(diào)控。在肝癌組織中,VGLL4 mRNA的低表達(dá)與miR-301b-3p水平呈負(fù)相關(guān)。值得注意的是,敲低VGLL4顯著抑制細(xì)胞增殖,導(dǎo)致G2/M期停滯并促進HCC細(xì)胞凋亡。因此,敲低VGLL4可以挽救miR-301b-3... 

【文章來源】：蚌埠醫(yī)學(xué)院安徽省

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

通過qRT-PCR在HCC組織（n=80）和相鄰的非腫瘤組織（n=80）之間檢測到

致癌作用。接下來，miR-301b-3p 在 Huh7 和 Hep3B 細(xì)胞中均被其抑制劑敲低（P<0.05，圖 2A）。CCk-8 和細(xì)胞克隆形成試驗表明，敲低 miR-301b-3p 明顯降低了 HCC 細(xì)胞的增殖（P<0.05，圖 2B 和 C）。此外，流式細(xì)胞儀檢測表明，miR-301b-3p 的敲低顯著的增加了凋亡的 Huh7 和 Hep3B 細(xì)胞的百分比（P<0.05，圖 2D）。細(xì)胞周期分布分析表明，在 Huh7 和 Hep3B 細(xì)胞中，miR-301b-3p 的敲低導(dǎo)致細(xì)胞周期停滯在 G2/M 期（P<0.05，圖 2E）。因此，miR-301b-3p 通過調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期進程和細(xì)胞凋亡在肝癌中發(fā)揮致癌作用。 圖 2: mi R‐301b‐3p 敲低抑制肝細(xì)胞癌（HCC）細(xì)胞增殖，導(dǎo)致 G2/M 期阻滯并誘導(dǎo)凋亡。

圖 2A:將 mi R‐301b‐3p 抑制劑或陰性對照（NC）轉(zhuǎn)導(dǎo)到 Huh7 和 Hep3B 細(xì)胞中，并進行 q RT‐PCR 檢測 mi R‐301b‐3p 的表達(dá)。通過 t 檢驗，* P ＜0.05。圖 2B：CCK-8 實驗表明，mi R-301b-3p 敲低抑制了 HCC 細(xì)胞的增殖。通過 ANOVA 或 t 檢驗， * P <0.05 。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]DNA methylation,microRNAs,and their crosstalk as potential biomarkers in hepatocellular carcinoma[J]. Sumadi Lukman Anwar,Ulrich Lehmann.  World Journal of Gastroenterology. 2014(24)



本文編號：3509884