MicroRNA（miRNA）是人類肝細胞癌（HCC）腫瘤生長和轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子。越來越多的證據(jù)表明,miR-301b-3p在各種類型的人類癌癥中起著驅(qū)動器的作用。然而,miR-301b-3p的表達模式及其功能作用以及在肝癌中的潛在分子機制仍然知之甚少。我們的研究發(fā)現(xiàn),與鄰近的非腫瘤組織相比,HCC組織中的miR-301b-3p表達顯著上調(diào)。臨床相關(guān)性分析顯示,高水平的miR-301b-3p與腫瘤大小和晚期腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移階段密切相關(guān)。重要的是,高水平的miR-301b-3p預測肝癌患者的整體生存率顯著下降。敲低miR-301b-3p抑制細胞增殖,導致細胞周期停滯在G2/M期,并誘導Huh7和Hep3B細胞凋亡。此外,敲低miR-301b-3p抑制了小鼠肝癌的生長。從機制上講,miR-301b-3p直接與轉(zhuǎn)錄輔助因子退變樣蛋白4（VGLL4）的3’UTR結(jié)合并對其表達負調(diào)控。在肝癌組織中,VGLL4 mRNA的低表達與miR-301b-3p水平呈負相關(guān)。值得注意的是,敲低VGLL4顯著抑制細胞增殖,導致G2/M期停滯并促進HCC細胞凋亡。因此,敲低VGLL4可以挽救miR-301b-3... 

【文章來源】：蚌埠醫(yī)學院安徽省

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

通過qRT-PCR在HCC組織（n=80）和相鄰的非腫瘤組織（n=80）之間檢測到

致癌作用。接下來，miR-301b-3p 在 Huh7 和 Hep3B 細胞中均被其抑制劑敲低（P<0.05，圖 2A）。CCk-8 和細胞克隆形成試驗表明，敲低 miR-301b-3p 明顯降低了 HCC 細胞的增殖（P<0.05，圖 2B 和 C）。此外，流式細胞儀檢測表明，miR-301b-3p 的敲低顯著的增加了凋亡的 Huh7 和 Hep3B 細胞的百分比（P<0.05，圖 2D）。細胞周期分布分析表明，在 Huh7 和 Hep3B 細胞中，miR-301b-3p 的敲低導致細胞周期停滯在 G2/M 期（P<0.05，圖 2E）。因此，miR-301b-3p 通過調(diào)節(jié)細胞增殖、細胞周期進程和細胞凋亡在肝癌中發(fā)揮致癌作用。 圖 2: mi R‐301b‐3p 敲低抑制肝細胞癌（HCC）細胞增殖，導致 G2/M 期阻滯并誘導凋亡。

圖 2A:將 mi R‐301b‐3p 抑制劑或陰性對照（NC）轉(zhuǎn)導到 Huh7 和 Hep3B 細胞中，并進行 q RT‐PCR 檢測 mi R‐301b‐3p 的表達。通過 t 檢驗，* P ＜0.05。圖 2B：CCK-8 實驗表明，mi R-301b-3p 敲低抑制了 HCC 細胞的增殖。通過 ANOVA 或 t 檢驗， * P <0.05 。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]DNA methylation,microRNAs,and their crosstalk as potential biomarkers in hepatocellular carcinoma[J]. Sumadi Lukman Anwar,Ulrich Lehmann.  World Journal of Gastroenterology. 2014(24)



本文編號：3509884