發(fā)布時(shí)間：2021-11-17 22:01

　　目的:乳腺癌是我國(guó)女性中最常見的惡性腫瘤,其發(fā)病率和死亡率均處于女性惡性腫瘤的首位,嚴(yán)重危害女性的生命健康。隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的發(fā)展,目前臨床上乳腺癌的治療方法主要包括外科手術(shù)治療、放化療、內(nèi)分泌治療等,雖然在乳腺癌疾病的早期診斷和治療措施方面得以改善,但未能降低乳腺癌的死亡率。因此,探討如何提高對(duì)乳腺癌的治療水平具有重要的臨床意義。目前,隨著間質(zhì)干細(xì)胞（Mesenchymal Stem Cells,MSCs）在腫瘤治療中的潛在價(jià)值得到了越來越多研究者的關(guān)注,現(xiàn)研究表明MSCs可通過其分泌體參與腫瘤進(jìn)展和腫瘤微環(huán)境的調(diào)節(jié)。胞外囊泡（Extracellular Vesicles,EVs）是由多種類型的細(xì)胞分泌的膜性納米囊泡,在生理和病理?xiàng)l件下都能介導(dǎo)細(xì)胞間的通訊。然而,關(guān)于它們相互作用的潛在機(jī)制和功能,仍然存在許多未解之謎。本研究旨在探討人臍帶間質(zhì)干細(xì)胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs）來源的EVs（hUCMSC-EVs）對(duì)人乳腺癌細(xì)胞增殖、遷移的影響及機(jī)制研究。方法:（1）從醫(yī)院取來新鮮的臍帶組織,采用組織塊貼壁法分離... 

【文章來源】：江蘇大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
中英文注釋表
第一章 緒論
    1.1. 概述
    1.2. 間質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性
    1.3. 間質(zhì)干細(xì)胞在腫瘤微環(huán)境中的促腫瘤作用
    1.4. 間質(zhì)干細(xì)胞的抗腫瘤作用
    1.5. 胞外囊泡
    1.6. 間質(zhì)干細(xì)來源的胞外囊泡
    1.7. 胞外囊泡與腫瘤
    1.8. 胞外囊泡應(yīng)用
第二章 研究目的、方法、方案及意義
    2.1 研究目的
    2.2 研究方法和內(nèi)容
    2.3 研究意義
第三章 間質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng)以及EVS的提取與鑒定
    3.1. 試劑材料與儀器
        3.1.1. 標(biāo)本來源及細(xì)胞
        3.1.2. 所有試劑和材料
        3.1.3. 主要實(shí)驗(yàn)儀器
    3.2. 相關(guān)溶液的配制
        3.2.1 PBS 的配制(1000 ml)
        3.2.2 L-DMEM培養(yǎng)液(1000 ml)
        3.2.3 0.25% 胰酶的配制(1000 ml)
        3.2.4 凍存液的配制(10 ml)
        3.2.5 4% 多聚甲醛的配制
        3.2.6 Western-blot相關(guān)溶液的配制
    3.3. 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1. hUC-MSCs分離培養(yǎng)及傳代
        3.3.2. 細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇
        3.3.3. hUC-MSCs表面標(biāo)記鑒定
        3.3.4. hUC-MSCs多向分化潛能鑒定
        3.3.5. hUC-MSCs來源EVs的分離和純化
        3.3.6. hUC-MSC-EVs掃描電鏡檢測(cè)
        3.3.7. hUC-MSC-EVs透射電鏡檢測(cè)
        3.3.8. hUC-MSC-EVs表面標(biāo)記鑒定
        3.3.9. hUC-MSC-EVs粒徑測(cè)定
        3.3.10. Western blot
    3.4. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.4.1. 細(xì)胞分離培養(yǎng)和鑒定
        3.4.2. 細(xì)胞多向分化潛能鑒定
        3.4.3. 細(xì)胞表面標(biāo)記鑒定
        3.4.4. hUC-MSC-EVs形態(tài)學(xué)特征
        3.4.5. 粒徑分析儀檢測(cè)hUC-MSC-EVs大小
        3.4.6. 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)hUC-MSC-EVs表面標(biāo)記
        3.4.7. Western blot檢測(cè)hUC-MSC-EVs標(biāo)志蛋白
    3.5. 討論
第四章 HUC-MSC-EVS對(duì)乳腺癌細(xì)胞增殖和遷移的影響
    4.1. 試劑材料與儀器
        4.1.1. 標(biāo)本來源及細(xì)胞
        4.1.2. 所有試劑和材料
        4.1.3. 主要實(shí)驗(yàn)儀器
    4.2. 相關(guān)溶液的配制
        4.2.1. H-DMEM培養(yǎng)液(1000 ml)
        4.2.2. MTT的配制
    4.3. 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1. hUC-MSC-EVs內(nèi)化實(shí)驗(yàn)
        4.3.2. MTT
        4.3.3. 平板克隆
        4.3.4. 劃痕實(shí)驗(yàn)
        4.3.5. Transwell
        4.3.6. Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)
        4.3.7. Western blot
        4.3.8. 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    4.4. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.4.1. hUC-MSC-EVs內(nèi)化實(shí)驗(yàn)
        4.4.2. hUC-MSC-EVs對(duì)乳腺癌細(xì)胞增殖的影響
        4.4.3. hUC-MSC-EVs對(duì)乳腺癌細(xì)胞遷移的影響
        4.4.4. hUC-MSC-EVs對(duì)乳腺癌細(xì)胞侵襲的影響
        4.4.5. hUC-MSC-EVs對(duì)乳腺癌細(xì)胞相關(guān)蛋白的影響
    4.5. 討論
第五章 HUC-MSC-EVS對(duì)乳腺癌細(xì)胞增殖和遷移的機(jī)制研究
    5.1. 試劑材料與儀器
        5.1.1. 標(biāo)本來源及細(xì)胞
        5.1.2. 所有試劑和材料
        5.1.3. 主要實(shí)驗(yàn)儀器
    5.2. 相關(guān)溶液的配制
    5.3. 實(shí)驗(yàn)方法
        5.3.1. 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    5.4. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        5.4.1. hUC-MSC-EVs對(duì)U0126處理后的乳腺癌細(xì)胞增殖的影響
        5.4.2. hUC-MSC-EVs對(duì)U0126處理后的乳腺癌細(xì)胞遷移的影響
        5.4.3. hUC-MSC-EVs對(duì)U0126處理后的乳腺癌細(xì)胞侵襲的影響
        5.4.4. hUC-MSC-EVs對(duì)U0126處理后的乳腺癌細(xì)胞相關(guān)蛋白的影響
    5.5. 討論
第六章 主要結(jié)論與展望
    6.1. 主要結(jié)論
    6.2. 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文、獲獎(jiǎng)及參加會(huì)議
    一、發(fā)表論文情況
    二、獲獎(jiǎng)情況
    三、參加會(huì)議情況


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]MAGI1 inhibits migration and invasion via blocking MAPK/ERK signaling pathway in gastric cancer[J]. Shuqin Jia,Jiajia Lu,Tingting Qu,Yi Feng,Xiaohong Wang,Caixia Liu,Jiafu Ji.  Chinese Journal of Cancer Research. 2017(01)



本文編號(hào)：3501711