發(fā)布時間：2021-11-14 20:05

　　乳腺癌是女性易發(fā)的惡性腫瘤之一,也是造成女性死亡的主要原因。據(jù)統(tǒng)計,2012年世界范圍內(nèi)新發(fā)病例大約170萬,而其中死亡病例就已接近50萬[1]。來自中國抗癌協(xié)會的統(tǒng)計數(shù)字顯示,目前我國乳腺癌的發(fā)病率以每年3%的速度遞增,且呈現(xiàn)年輕化的趨勢,而且逐漸成為城市中死亡率增長最快的癌癥。因此,為降低乳腺癌患者的死亡率,不僅僅是要早期治療,更重要的是有效防止其惡性進(jìn)展。乳腺癌是起源于乳腺腺上皮組織的惡性腫瘤,原位乳腺癌并不致命,如果能夠做到早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷及早期治療,乳腺癌或可成為療效最佳的實體腫瘤之一。但乳腺癌的早期癥狀往往并不明顯,這就使很多患者錯失最佳治療時機(jī),乳腺癌細(xì)胞一旦脫離原發(fā)病灶,極易通過血液或淋巴液進(jìn)行播散,形成遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移,嚴(yán)重影響乳腺癌患者的生存質(zhì)量和生存率。糖鏈與細(xì)胞膜的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)相連,幾乎覆蓋細(xì)胞膜的整個外表面[2],它決定了細(xì)胞的“面部特征”。唾液酸化修飾是以單磷酸胞苷活化的唾液酸（CMP-Neu5Ac）為底物,經(jīng)唾液酸糖基轉(zhuǎn)移酶（sialyltransferase,ST）催化,將底物中的唾液酸殘基（Neu5Ac）轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜糖蛋白或糖脂末端的過程。唾液酸殘基（Neu... 

【文章來源】：大連醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：98 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
材料和方法
    1.實驗材料
        1.1 實驗對象
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器
    2. 實驗方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2 膜蛋白提取和N-糖鏈的制備
        2.3 質(zhì)譜儀檢測甲基化的N-糖鏈
        2.4 慢病毒制備及轉(zhuǎn)染
        2.5 RNA提取和實時熒光定量PCR分析(qRT-PCR)
        2.6 蛋白提取和免疫印跡分析
        2.7 CCK-8 細(xì)胞增殖實驗
        2.8 劃痕試驗
        2.9 細(xì)胞侵襲實驗
        2.10 免疫熒光實驗
        2.11 裸鼠體內(nèi)成瘤實驗
        2.12 免疫組織化學(xué)
        2.13 雙熒光素酶實驗
        2.14 統(tǒng)計學(xué)分析
第一部分 質(zhì)譜分析乳腺癌組織和細(xì)胞株表面N-糖鏈的組成差異
    結(jié)果
        1.乳腺癌組織和癌旁組織膜蛋白N-糖鏈的組成
        2.乳腺癌細(xì)胞株及正常乳腺上皮細(xì)胞膜蛋白N-糖鏈的組成
    討論
    結(jié)論
第二部分 實時熒光定量PCR檢測組織和細(xì)胞株唾液酸糖基轉(zhuǎn)移酶(ST) 基因mRNA的表達(dá)及ST8SIA4在組織和細(xì)胞株中蛋白的表達(dá)
    結(jié)果
        1. 唾液酸糖基轉(zhuǎn)移酶（ST）基因在乳腺癌和癌旁組織中的表達(dá)
        2. 唾液酸糖基轉(zhuǎn)移酶（ST）基因在乳腺癌細(xì)胞株MDA-MB-231、MCF-7 及正常乳腺上皮細(xì)胞株MCF-10A中的表達(dá)
        3. ST8SIA4在乳腺癌組織及細(xì)胞株中的表達(dá)
    討論
    結(jié)論
第三部分 特異性下調(diào)MDA-MB-231 細(xì)胞中的ST8SIA4的表達(dá)，觀察其對乳腺癌細(xì)胞體外的增殖和侵襲能力、體內(nèi)成瘤性的影響
    結(jié)果
        1. ST8SIA4的表達(dá)調(diào)控對乳腺癌MDA-MB-231 細(xì)胞體外增殖和侵襲能力的影響
        2. ST8SIA4的表達(dá)調(diào)控對乳腺癌MDA-MB-231 細(xì)胞體內(nèi)成瘤性的影響
    討論
    結(jié)論
第四部分 mi R-26a和miR-26b對ST8SIA4的靶向調(diào)控作用
    結(jié)果
        1. miR26a和miR26b在乳腺癌組織及細(xì)胞株中的表達(dá)
        2.miR-26a和miR-26b的表達(dá)調(diào)控介導(dǎo)ST8SIA4表達(dá)
        3. ST8SIA4為miR-26a和miR-26b的靶基因
    討論
    結(jié)論
第五部分 mi R-26a/b靶向調(diào)控ST8SIA4的表達(dá)對乳腺癌細(xì)胞增殖和侵襲能力的影響
    結(jié)果
        1. miR-26a/26b靶向調(diào)控ST8SIA4的表達(dá)對MDA-MB-231 細(xì)胞增殖和侵襲能力的影響
        2. miR-26a/26b靶向調(diào)控ST8SIA4的表達(dá)對MCF-7 細(xì)胞增殖和侵襲能力的影響
    討論
結(jié)論
全文討論
全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]TRAIL分子靶點在肺癌治療中的研究及應(yīng)用[J]. 劉乾,馬玲娣,王勇.  中國肺癌雜志. 2009(03)
[2]細(xì)胞膜表面糖鏈結(jié)構(gòu)與腫瘤轉(zhuǎn)移的關(guān)系[J]. 丁怡甜,邢艷麗,辛現(xiàn)良,耿美玉.  現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2007(06)
[3]Correlation of glycosyltransferases mRNA expression in extrahepatic bile duct carcinoma with clinical pathological characteristics[J]. Xiao-Ling Jin, Shu-Sen Zheng, Bing-Sheng Wang and Hui-Li Chen Nanjing, China Department of General Surgery, Nanjing First Hospi- tal Affiliated to Nanjing Medical University, Nanjing 210006, China ; Department of Hepatobiliary Surgery, First Affiliated Hospital, Zhe- jiang University School of Medicine, Hangzhou 310003, China ; Department of General Surgery, Zhongshan Hospital, Fudan Universi- ty, Shanghai 200032 , China; and Key Laboratory of Glycocon- jugate Research, Ministry of Health, Department of Biochemistry, Fudan University School of Medicine, Shanghai 200032, China.  Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International. 2004(02)

博士論文
[1]ST3GAL家族和ST6GALNAC家族在人慢性粒細(xì)胞白血病多藥耐藥性中的作用[D]. 李巖.大連醫(yī)科大學(xué) 2015

碩士論文
[1]miR-224-3p靶向調(diào)控巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶FUT4在乳腺癌多藥耐藥中的研究[D]. 馮曉斌.大連醫(yī)科大學(xué) 2016



本文編號：3495273