【目的】體外共培養(yǎng)模擬慢性淋巴系白血�。–hronic lymphocytic leukemia,CLL）骨髓微環(huán)境以探討骨髓基質(zhì)細(xì)胞介導(dǎo)伏立諾他（Vorinostat,Vor）化療耐藥的機(jī)制,從而揭示Vor臨床治療CLL病人失敗的原因,進(jìn)而提出克服骨髓微環(huán)境導(dǎo)致的CLL化療耐藥,改善CLL病人臨床治療效果的新方案�！痉椒ā矿w外采用CLL患者外周血新鮮分離的原代細(xì)胞與人類骨髓基質(zhì)細(xì)胞系NKtert進(jìn)行共培養(yǎng),以此構(gòu)建細(xì)胞共培養(yǎng)體系模擬CLL病人白血病微環(huán)境化療耐藥新模型;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)單培養(yǎng)和共培養(yǎng)CLL細(xì)胞對(duì)化療藥物Vor的藥物敏感性;流式細(xì)胞術(shù)、腺病毒轉(zhuǎn)染技術(shù)、Western blot技術(shù)檢測(cè)共培養(yǎng)CLL和NKtert細(xì)胞的自噬及線粒體自噬水平;流式細(xì)胞術(shù)聯(lián)合體外H₂O₂檢測(cè)試劑盒測(cè)定共培養(yǎng)CLL和NKtert細(xì)胞的活性氧水平;外源性添加H₂O₂和抗氧化劑探究細(xì)胞自噬與高氧化應(yīng)激態(tài)的相關(guān)性;體外檢測(cè)共培養(yǎng)CLL和NKtert細(xì)胞的耗氧量、葡萄糖攝取率以及糖酵解相關(guān)蛋白的變化以解析細(xì)胞自噬與糖酵解...

【文章來(lái)源】： 南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：53 頁(yè)

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
中英文縮略詞表
第1章 引言
第2章 材料與方法
    2.1 主要試劑
    2.2 主要儀器
    2.3 研究對(duì)象
    2.4 細(xì)胞計(jì)數(shù)
    2.5 單培養(yǎng)及共培養(yǎng)體系的構(gòu)建
    2.6 細(xì)胞存活率的測(cè)定
    2.7 流式細(xì)胞儀測(cè)定ROS
    2.8 線粒體質(zhì)量測(cè)定
    2.9 Western blot分析
    2.10 細(xì)胞內(nèi)LC3 分布測(cè)定
    2.11 O₂ 水平對(duì)CLL細(xì)胞存活率的影響
    2.12 耗氧率測(cè)定
    2.13 葡萄糖攝取率測(cè)定
    2.14 乳酸測(cè)定
    2.15 β-羥丁酸（酮體）測(cè)定
    2.16 細(xì)胞內(nèi)ATP含量測(cè)定
    2.17 siRNA轉(zhuǎn)染
    2.18 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
第3章 結(jié)果
    3.1 Vor誘導(dǎo)共培養(yǎng)下CLL細(xì)胞存活增加
    3.2 自噬抑制誘導(dǎo)共培養(yǎng)下CLL細(xì)胞存活降低
    3.3 共培養(yǎng)下Vor誘導(dǎo)NKtert細(xì)胞自噬及線粒體自噬
    3.4 Vor誘導(dǎo)CLL細(xì)胞內(nèi)ROS水平升高
    3.5 共培養(yǎng)下ROS促進(jìn)NKtert細(xì)胞自噬及線粒體自噬
    3.6 共培養(yǎng)下Vor激活NKtert細(xì)胞啟動(dòng)糖酵解
    3.7 共培養(yǎng)下糖酵解產(chǎn)物輔助CLL細(xì)胞存活
    3.8 Vor聯(lián)合自噬抑制改善CLL治療效果
第4章 討論
第5章 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
綜述
    1.前言
    2.骨髓微環(huán)境促進(jìn)化療藥物處理后白血病細(xì)胞的死亡
    3.活性氧同造血及白血病進(jìn)展的關(guān)系
    4.靶向自噬克服白血病耐藥
    5.靶向活性氧克服白血病耐藥性
    6.活性氧誘導(dǎo)自噬治療白血病
    7.結(jié)論與展望
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Role of autophagy in tumorigenesis,metastasis,targeted therapy and drug resistance of hepatocellular carcinoma [J]. Fang Huang,Bing-Rong Wang,Yi-Gang Wang.  World Journal of Gastroenterology. 2018(41)
[2]Reactive oxygen species: A double-edged sword in oncogenesis [J]. Jin-Shui Pan, Jian-Lin Ren, Division of Gastroenterology, Zhongshan Hospital Xiamen University, Xiamen 361004, Fujian Province, China; Gastroenterology Institute of Xiamen University, Xiamen 361004, Fujian Province, China; Gastroenterology Center of Xiamen, Xiamen 361004, Fujian Province, China Mei-Zhu Hong, Division of Infectious Diseases, the 174th Hospital of PLA, Xiamen 361003, Fujian Province, China.  World Journal of Gastroenterology. 2009(14)



本文編號(hào)：3478713