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干擾素γ抑制自噬誘導(dǎo)肝癌HepG2細(xì)胞凋亡的作用

發(fā)布時間:2021-10-28 23:36
  目的研究干擾素γ(IFN-γ)通過抑制自噬誘導(dǎo)肝癌Hep G2細(xì)胞凋亡的作用及其作用機制。方法 Hep G2細(xì)胞分為對照組(0)、與9個不同濃度(10,20,30,50,75,100,150,200,300 ng·m L-1IFN-γ)實驗組。IFN-γ處理Hep G2肝癌細(xì)胞24 h,用MTT法測定細(xì)胞的增殖情況;用Annexin V-FITC/碘化丙啶(PI)細(xì)胞凋亡檢測試劑盒檢測細(xì)胞的凋亡情況;以免疫熒光顯微鏡觀察Hep G2細(xì)胞內(nèi)LC3熒光斑點的數(shù)量與分布;用免疫印跡法檢測磷酸化的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活子1(p-Stat1)、干擾素調(diào)節(jié)因子1(IRF1)、聚腺苷酸二磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶-1(PARP1)、自噬調(diào)控因子(Beclin1)、自噬相關(guān)蛋白5(Atg5)、Ⅰ型微管相關(guān)蛋白輕鏈3(LC3)、凋亡蛋白3(Caspase-3)及Caspase-8的蛋白表達(dá)。結(jié)果與對照組(存活率為100%)比較,7個不同濃度(30,50,75,100,150,200,300 ng·m L-1)IFN-γ處理Hep G2細(xì)胞24 h,呈濃度依賴性地降低Hep ... 

【文章來源】:中國臨床藥理學(xué)雜志. 2017,33(04)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】:4 頁

【文章目錄】:
材料與方法
    1材料
        細(xì)胞
        藥品與試劑
        儀器
    2用MTT法測定IFN-γ作用后Hep G2細(xì)胞的存活率
    3以Annexin V-FITC/PI檢測細(xì)胞的凋亡情況
    4在熒光顯微鏡下觀察Hep G2細(xì)胞內(nèi)LC3熒光斑點
    5以免疫印跡法檢測目的蛋白的表達(dá)
    6統(tǒng)計學(xué)處理
結(jié)果
    1 IFN-γ對Hep G2細(xì)胞的增殖抑制作用
    2 IFN-γ誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡比較
    3各組Hep G2細(xì)胞內(nèi)LC3熒光斑點的數(shù)量與分布
    4目的蛋白的表達(dá)的變化
討論


【參考文獻】:
期刊論文
[1]干擾素-α對肝癌細(xì)胞增殖與凋亡的影響[J]. 孫長江.  南通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2008(06)



本文編號:3463527

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