目的:尋找乳腺癌的特異性分子標(biāo)志是乳腺癌診斷和治療的要點(diǎn),非編碼RNA作為新型靶點(diǎn),在腫瘤治療中的作用受到越來越多的關(guān)注。通過生物信息學(xué)分析尋找乳腺癌的特異性lncRNA標(biāo)志物,發(fā)現(xiàn)AFAP1-AS1和是乳腺癌增殖和遷移的潛在標(biāo)志物,miR-21是它的潛在靶點(diǎn)。旨在研究AFAP1-AS1對乳腺癌細(xì)胞增殖和遷移能力的影響,探討AFAP1-AS1對miR-21是否具有靶向作用,闡明AFAP1-AS1參與乳腺癌進(jìn)程的機(jī)制是否與調(diào)控miR-21/PTEN軸有關(guān),以期為乳腺癌治療尋找新的分子標(biāo)志和有效靶點(diǎn)。方法:使用生物信息學(xué)方法尋找乳腺癌的lncRNA標(biāo)志物;采用qRT-PCR檢測mRNA的水平;Western blot實驗檢測蛋白的水平;采用LF-2000對乳腺癌細(xì)胞進(jìn)行多種序列的瞬時轉(zhuǎn)染。采用MTT、克隆形成和EdU實驗檢測乳腺癌細(xì)胞的增殖能力;劃痕實驗、Transwell實驗檢測乳腺癌細(xì)胞的遷移能力。采用RNA pull down實驗研究AFAP1-AS1與miR-21的結(jié)合;通過雙熒光素酶報告基因?qū)嶒烌炞CmiR-21對PTEN的靶向作用。用無胸腺裸鼠構(gòu)建乳腺癌異種移植瘤模型,研究AFA... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：120 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－２．沉默ＡＦＡＰｌ－ＡＳｌ對乳腺癌細(xì)胞增殖的影響??Ａ．?ＭＴＴ實驗檢測沉默ＡＦＡＰｌ－ＡＳｌ對乳腺癌細(xì)胞增殖的影響；Ｂ．克隆形成實驗檢測沉默??ＡＦＡＰＩ－ＡＳ１?對乳腺癌細(xì)胞增殖的影響

?第二章?ＡＦＡＰ１－ＡＳ１通過乾向調(diào)節(jié)ｍｉＲ－２１影響乳腺癌細(xì)胞的增殖和遷移???ＮＣ?ｓｉＲＮＡ－１?ｓｉＲＮＡ－２?ｓｉＲＮＡ－３??■■■■??咖咖ＨＨ??■■■■??ＭＤＡ－ＭＢ－２３１?ＤＡＰＩ?．，二?＜?｜?ｈ＇?，?］??■■■■??ＭＣＦ－７?ＭＤＡ－ＭＢ－２３１??５０－ｊ?８０－??＾?￣ｒ?３??Ｓ－４０－?Ｍ?？？６０－?＾??Ｉｆ?－?■?．．?＾?ｉｆ?Ｉ??�。。博枺�?■丁?．?ｔ?ｉｉ４０．?■?ｔ?，＊??〇？〇?ａ?〇?２〇－??？?＾?１０－?？?〇■??〇Ｊ＿??〇Ｊ＿???ＪＶ?Ｊｂ?ｖＯ?ＪＳ?ＪＶ?Ｊｂ??／?／?／?，，，??圖２－３．?ＥｄＵ實驗檢測沉默ＡＦＡＰｌ－ＡＳｌ對乳腺癌細(xì)胞增殖的影響；＊，Ｐ＜０．０５；＊＊，Ｐ＜０．０１：??＊＊＊，?Ｐ＜０．００１〇??Ｆｉｇｕｒｅ?２－３．?ＥｄＵ?ａｓｓａｙ?ｗａｓ?ｕｓｅｄ?ｔｏ?ｄｅｔｅｃｔ?ｔｈｅ?ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ＡＦＡＰ１－ＡＳ１?ｋｎｏｃｋｄｏｗｎ?ｏｎ?ｔｈｅ??ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｂｒｅａｓｔ?ｃａｎｃｅｒ?ｃｅｌｌｓ．?＊，?Ｐ＜０．０５；?＊＊，?Ｐ＜０．０１；?＊＊＊，?Ｐ＜０．００１〇??３０??

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本文編號：3463205