目的:檢測miR-16-5p在原發(fā)性肝癌（以下簡稱“肝癌”）組織樣本及細(xì)胞中的表達(dá),探索其對肝癌細(xì)胞增殖、侵襲及遷移能力的影響,并研究相關(guān)分子機(jī)制。方法:1.通過qRT-PCR檢測肝癌組織標(biāo)本及配對的癌旁組織標(biāo)本;正常肝細(xì)胞及肝癌細(xì)胞中miR-16-5p的表達(dá)情況。2.采用RTCA系統(tǒng)、Tranwwell小室侵襲實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)來檢測過表達(dá)miR-16-5p后對HepG2人肝癌細(xì)胞增殖、侵襲和遷移能力的影響。3.使用生物信息學(xué)在線數(shù)據(jù)庫預(yù)測miR-16-5p下游靶基因并用雙熒光素酶報(bào)告基因及Western bolt等技術(shù)進(jìn)行驗(yàn)證。4.WB檢測過表達(dá)miR-16-5p對EMT相關(guān)蛋白表達(dá)的影響。5.細(xì)胞實(shí)驗(yàn)檢測共同轉(zhuǎn)染VEGFA對miR-16-5p功能的影響。結(jié)果:1.與癌旁組織相比,miR-16-5p在肝癌組織中的表達(dá)明顯降低,差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）;在HepG2、HuH-7人肝癌細(xì)胞株中的表達(dá)較HL-7702人正常肝細(xì)胞株明顯降低,差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001）;2.上調(diào)miR-16-5p的表達(dá)后,HepG2細(xì)胞增殖、侵襲及遷移的能力均顯著減弱,差異存... 

【文章來源】：皖南醫(yī)學(xué)院安徽省

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

AmiR-16-5p在肝癌組織及癌旁組織中的表達(dá)

皖南醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文24圖1BmiR-16-5p在HL-7702、HepG2及Huh-7細(xì)胞株中的表達(dá)2.HepG2細(xì)胞轉(zhuǎn)染miR-16-5p效率檢測使用瞬時(shí)轉(zhuǎn)染，在HepG2細(xì)胞過表達(dá)miR-16-5p后用qRT-PCR檢測細(xì)胞中miR-16-5p表達(dá)量，結(jié)果如圖2所示。與NC組和空白組（Control）相比，轉(zhuǎn)染mimics組中miR-16-5p的表達(dá)量顯著升高，差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.001）。并且可穩(wěn)定表達(dá)72h-96h，可進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。圖2HepG2細(xì)胞轉(zhuǎn)染miR-16-5p效率檢測

皖南醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文24圖1BmiR-16-5p在HL-7702、HepG2及Huh-7細(xì)胞株中的表達(dá)2.HepG2細(xì)胞轉(zhuǎn)染miR-16-5p效率檢測使用瞬時(shí)轉(zhuǎn)染，在HepG2細(xì)胞過表達(dá)miR-16-5p后用qRT-PCR檢測細(xì)胞中miR-16-5p表達(dá)量，結(jié)果如圖2所示。與NC組和空白組（Control）相比，轉(zhuǎn)染mimics組中miR-16-5p的表達(dá)量顯著升高，差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.001）。并且可穩(wěn)定表達(dá)72h-96h，可進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。圖2HepG2細(xì)胞轉(zhuǎn)染miR-16-5p效率檢測

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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