研究背景和意義越來(lái)越多的證據(jù)表明,上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）是一個(gè)公認(rèn)的從一個(gè)分化的上皮細(xì)胞可以轉(zhuǎn)化為去分化狀態(tài)遷移的間質(zhì)表型的過程,它在胚胎發(fā)育、器官纖維化、傷口的愈合和腫瘤的轉(zhuǎn)移的調(diào)控起著至關(guān)重要的作用。EMT的關(guān)鍵過程包括降低細(xì)胞與細(xì)胞間粘附分子E-cadherin,間質(zhì)蛋白如Vimentin、N-cadherin的表達(dá)量增加,激活經(jīng)典Wnt/β-catenin信號(hào)通路。新的證據(jù)表明EMT在結(jié)直腸癌侵襲和轉(zhuǎn)移能力的獲得中起著至關(guān)重要的作用。一些轉(zhuǎn)錄因子（TF）,如Twist,Snail,Slug,ZEBl/2作為主要的EMT的誘導(dǎo)因素,直接或間接抑制E-cadherin在結(jié)腸癌細(xì)胞中的表達(dá)。所以,靶向治療抑制EMT對(duì)結(jié)直腸癌患者有重大意義。叉頭框（Forkheadbox,FOX）K1由翼狀螺旋的DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域和N-末端和C-末端轉(zhuǎn)錄域構(gòu)成。FOXK1是一個(gè)新的可能能夠預(yù)測(cè)EMT的轉(zhuǎn)錄因子。先前有研究發(fā)現(xiàn)FOXK1是結(jié)直腸癌的抑癌基因。我們課題組的前期研究發(fā)現(xiàn)FOXK1誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞EMT促進(jìn)結(jié)直腸癌細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力。Snail也是一種鋅指轉(zhuǎn)錄因子,通過直接抑制E-cadherin的... 

【文章來(lái)源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：111 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１－１?（Ａ）Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ檢測(cè)８對(duì)新鮮收集的結(jié)直腸癌患者組織ＦＯＸＫ１和Ｓｎａｉｌ的表達(dá)；（Ｂ）??通過比較各條帶的灰度值來(lái)定量相蛋白表達(dá)的相關(guān)性；（Ｃ）Ｓｐｅａｒｍａｎ’ｓ相關(guān)分析被用于確定??

圖１－２?（Ａ）Ｗｅｓｔｅｍ?ｂｌｏｔ分析Ｆ０ＸＫ１和Ｓｎａｉｌ的表達(dá)在顯示的細(xì)胞系中的表達(dá)

?Ｌ〇Ｖ〇?ＳＷ１１１６??圖１－２?（Ａ）Ｗｅｓｔｅｍ?ｂｌｏｔ分析Ｆ０ＸＫ１和Ｓｎａｉｌ的表達(dá)在顯示的細(xì)胞系中的表達(dá)。??Ｆｉｇｕｒｅｌ－２．?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔｔｉｎｇ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?Ｆ０ＸＫ１?ａｎｄ?Ｓｎａｉｌ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｉｎｄｉｃａｔｅｄ?ＣＲＣ?ｃｅｌｌｓ．??４．３?ＦＯＸＫｌ是轉(zhuǎn)錄因子ＳｎａＵ的轉(zhuǎn)錄激活靶點(diǎn)??４．３．１?ＣｈＩＰ實(shí)驗(yàn)確定Ｆ０ＸＫ１啟動(dòng)子片段中Ｓｎａｉｌ結(jié)合位點(diǎn)??我們利用ＴＦｓｅａｒｃｈ軟件分析得到在Ｆ０ＸＫ１轉(zhuǎn)錄子啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄其實(shí)位點(diǎn)上??游５００ｂｐ內(nèi)存在兩個(gè)ＧＴ盒，分別位于－４７６？４８２（ＧＴ盒ｌ，ＦＯＸＫｌ－ｌ），－５９卜５９７（ＧＴ??盒２，?Ｆ０ＸＫ１－２），為了證明Ｆ０ＸＫ１與Ｓｎａｉｌ結(jié)合，我們通過染色質(zhì)免疫共沉淀??（ＣｈＩＰ）實(shí)驗(yàn)證明Ｓｎａｉｌ可以和Ｆ０ＸＫ１啟動(dòng)子結(jié)合，如圖所示，我們分別采用??ＳＷ８０及ＬｏＶｏ兩者細(xì)胞，用ＣｈＩＰ實(shí)驗(yàn)后獲得的ＤＮＡ產(chǎn)物進(jìn)行ＰＣＲ實(shí)驗(yàn)，ＰＣＲ??產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖跑膠實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明：Ｓｎａｉｌ能與ＦＯＸＫ１啟動(dòng)子區(qū)域內(nèi)的ＧＴ盒??１結(jié)合。??Ｆ０ＸＫ１?ｐｒｏｍｏｔｅｒ??Ｉｎｐｕｔ?ＩｇＧ?Ｓｎａｉｌ?Ｉｎｐｕｔ?ＩｇＧ?Ｓｎａｉｌ??ｂＩｂ＾ｂ??ＳＷ４８０?ＬｏＶｏ??圖１－３使用Ｓｎａｉｌ抗體或?qū)φ眨桑纾沁M(jìn)行染色質(zhì)免疫沉淀（ＣｈＩＰ）。Ｓｎａｉｌ結(jié)合的ＦＯＸＫ１啟??３４??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]miRNA調(diào)控惡性黑色素瘤細(xì)胞上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化的分子網(wǎng)絡(luò)及機(jī)制[J]. 王冬,李永君,丁楠,王均云,楊瓊,楊雅冉,李艷明,方向東,趙華.  遺傳. 2015(07)
[2]Cyr61和WISP-3在非小細(xì)胞肺癌組織中的表達(dá)及其臨床意義[J]. 呂建發(fā),鄒友成,張純偉,毛志福.  中國(guó)肺癌雜志. 2010(12)



本文編號(hào)：3450840