目的:斑點狀的POZ結(jié)構域蛋白（SPOP）作為E3泛素連接酶的底物識別器,在許多癌癥起著重要作用。前期實驗數(shù)據(jù)表明SPOP在絨毛膜癌中發(fā)揮著抑癌的作用,但SPOP調(diào)控絨毛癌膜的具體機制仍未明確,本文旨在尋找絨毛膜癌中SPOP泛素化底物及SPOP與泛素化底物調(diào)控絨癌的機制。方法:（1）首先將已構建的過表達SPOP和干擾SPOP的慢病毒載體轉(zhuǎn)染到絨毛膜癌JAR細胞中,采用q RT-PCR和Western blot實驗驗證其效率。結(jié)合label-free泛素化修飾定量蛋白質(zhì)組學結(jié)果、SBC基序、前期SPOP研究結(jié)果及絨癌高度侵襲性的特點,篩選相關蛋白。（2）采用Western blot實驗檢測絨毛外滋養(yǎng)層細胞HTR-8/Svneo、絨毛膜癌JAR細胞和JEG3細胞中KIF23的表達情況,免疫熒光實驗檢測KIF23的定位。（3）免疫共沉淀法和Western blot實驗檢測SPOP與驅(qū)動蛋白家族成員23（KIF23）間的相關性。（4）使用小干擾RNA基因沉默KIF23,采用q RT-PCR和Western blot實驗篩選出干擾效率最佳的KIF23-si RNA。采用CCK8法、平板克隆形成實... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學重慶市

【文章頁數(shù)】：89 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
英漢縮略語名詞對照
摘要
ABSTRACT
前言
1 材料
2 實驗方法
3 研究結(jié)果
4 討論
5 全文總結(jié)
參考文獻
文獻綜述 SPOP泛素化底物在腫瘤中的研究進展
    參考文獻
致謝
攻讀碩士學位期間發(fā)表的學術論文


【參考文獻】：
期刊論文
[1]KIF23基因沉默對肝癌HepG2細胞增殖、遷移及侵襲的影響[J]. 劉素娟,林曲,柏明軍,周楚人,陳俊偉,吳春,黃明聲.  中山大學學報(醫(yī)學版). 2018(01)
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碩士論文
[1]低氧誘導的SPOP通過調(diào)節(jié)PTEN/PI3K/AKT信號通路和EMT抑制絨癌的生長轉(zhuǎn)移[D]. 袁冬.重慶醫(yī)科大學 2018



本文編號：3428895