目的篩選經(jīng)17-AAG-M預(yù)處理的人非小細胞肺癌A549細胞在X-ray作用下差異表達的miRNA;分析出適用于聯(lián)合17-AAG-M、X-ray以治療NSCLC的miRNA;研究其在A549細胞中的作用和對放射反應(yīng)能力的影響,評估其與17-AAG-M和X-ray聯(lián)合治療NSCLC的潛在適用性;并分析其對A549細胞電離輻射后DNA損傷反應(yīng)（DDR）的影響。方法溶劑透析法制備17-AAG單包膠束（17-AAG-M）。高分辨透射電子顯微鏡觀察膠束的形態(tài)特征及分布,納米粒度及zeta電位分析儀測定膠束的粒徑大小和分散度,紫外分光光度法測定濃度。芯片實驗篩選經(jīng)17-AAG-M預(yù)處理的A549細胞在4Gy照射后24h差異表達的miRNA。通過TCGA數(shù)據(jù)庫分析可能涉及放射反應(yīng)的興趣miRNA在腫瘤中的表達情況及與LUAD臨床參數(shù)的關(guān)系,預(yù)測出適用于聯(lián)合17-AAG-M和X-ray以共同治療肺癌的miRNA（目標miRNA）。利用miRbase數(shù)據(jù)庫預(yù)測目標miRNA:hsa-miR-30a-3p的靶基因以進行GO及KEGG分析,通過qPCR檢測A549細胞中hsa-miR-30a-3p在17-A... 

【文章來源】：蘇州大學(xué)江蘇省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．３．１１７－ＡＡＧ－Ｍ的表征（左：１７－ＡＡＧ－Ｍ的粒徑分布圖；右：１７－ＡＡＧ－Ｍ的電??

＿樣的，Ｘ－ｒａｙ也能夠增加ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ對１７－ＡＡＧ－Ｍ預(yù)??處理的Ａ５４９細胞的抑制效果（ｐ＜０．０５）。??以上ＭＴＴ實驗結(jié)果表明，過表達ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ可以抑制Ａ５４９細胞活力，??并且在Ｘ－ｒａｙ和１７－ＡＡＧ－Ｍ作用下細胞毒性更強。??Ｉ￣—Ｉ?Ｉ—￣Ｉ??１００－１?｜?｜?１００－１??ｒ＿?■?■?ｒ＿?■?＿?了??『■?■?■?■?＿４。．?■?■??Ｍｕｍ?，?ｉｍｍｍ?．??Ｖ？７?／／／／??／?／?，、／??圖２．３，１過表達ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ對Ａ５４９細胞活力的影響??注：Ｐ＜０．０５?力?＜０．０１?力?＜０．００１?力?＜０．０００１?力?“＊＊＊＊?”；誤差線：均數(shù)土標準差??２．３．２過表達ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ對Ａ５４９細月包增殖的影響??通過對ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ的ＧＯ分析發(fā)現(xiàn)，某參與１調(diào)節(jié)了細胞增殖過靡。為了??確定ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ對Ａ５４９細胞增殖的影晌，并進一步檢測其聯(lián)合Ｘ－ｒａｙ、１７－??ＡＡＧ－Ｍ后的效應(yīng)進行了克隆形成實驗。如圖２．３．２所示，ＮＣ組、ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－??３ｐ?組、ＮＣ＋Ｘ－ｒａｙ?組和?ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ＋Ｘ－ｒａｙ?組黨隆形成率分剔為?９４．００％、??２９??

胞差異表達ｍｉＲＮＡ的篩選及其放射敏惑性的影響?第二部分??２．１０Ｇｙ降至１．７８Ｇｙ，說明過表達ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ后Ａ５４９細胞的平均致死照射劑??量降低，細胞對Ｘ－ｒａｙ的敏感性増加，放射増敏比為１．１８＞１，ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ具??有放射增敏作用（表６）。??鑒于ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ是在１７－ＡＡＧ－Ｍ預(yù)處理的Ａ５４９細胞中篩選出與Ｘ－ｒａｙ??相關(guān)，對ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ聯(lián)合１７－ＡＡＧ－Ｍ后的放射敏感性灘響亦進行了．實驗：分析＇。??從圖２．３．３和表５胃以看出，在４Ｇｙ、６Ｇｙ、８Ｇｙ的照射劑量下，與ＮＣ組相比，??聯(lián)合組的細胞存活分數(shù)更低（ｐ＜〇．〇５）。聯(lián)合組的以降至１．４２Ｇｙ，放射增敏比為??１．４８＞１?（表６）。說明ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ聯(lián)合１７－ＡＡＧ－Ｍ后，Ａ５４９細胞的放射敏感??性更強。但值得注意的是克服肩區(qū)所需的準閾劑量Ｄｑ有所增大，說明聯(lián)合１７－??ＡＡＧ－Ｍ后在較低的照射劑量下可能存在一定的放射抗性。??”?令?ＮＣ??ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ??ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ－１７－ＡＡＧ－Ｍ??Ｉ，??０．０１：??Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ??０?２?４?６?８??Ｍ?ｔｔ?（Ｃｙ）??圖２．３．３過表達ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ對Ａ５４９細胞放射敏感性的影響??表５不同處理條件下Ａ５４９細胞的存活分數(shù)（％）（又土ＳＤ）???分組?〇Ｇｙ?２Ｇｙ?４Ｇｙ?６Ｇｙ?８Ｇｙ??ＮＣ?１００?土８．８０?５３．９６±５．０６ａ?２６．３０士?０．６３ａ?７．１１?士?０．３１ａ?１．３８?士?０．１６

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3418804