目的:探討PI3K信號(hào)通路抑制劑LY294002與氫鹽水聯(lián)合應(yīng)用對(duì)非小細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞增殖及凋亡的影響,初步探討相關(guān)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在聯(lián)合應(yīng)用中的可能作用機(jī)制。方法:選取處于對(duì)數(shù)生長期的A549細(xì)胞,將其分為DMSO（對(duì)照）組、LY294002組、氫鹽水組和LY294002組+氫鹽水（聯(lián)合治療組）。采用PI3K信號(hào)通路抑制劑LY294002和氫鹽水單獨(dú)或聯(lián)合處理細(xì)胞,采用MTT法檢測(cè)單藥或聯(lián)合治療對(duì)細(xì)胞增殖的影響;檢測(cè)單藥或聯(lián)合治療對(duì)細(xì)胞氧化和抗氧化指標(biāo)超氧化物歧化酶（SOD）活力及丙二醛（MDA）含量的影響;Annexin V/PI雙染細(xì)胞后,以流式細(xì)胞術(shù)分析單藥或聯(lián)合治療對(duì)細(xì)胞凋亡的影響;Western blot檢測(cè)單藥或聯(lián)合治療對(duì)HO-1、p65及PI3K/AKT通路中AKT和p-AKT蛋白表達(dá)水平的影響。RT-PCR檢測(cè)的影響HO-1、p65 m RNA表達(dá)的影響。結(jié)果:（1）與DMS0組相比,LY294002和氫鹽水單藥治療組、聯(lián)合治療組細(xì)胞增殖明顯受到抑制（P<0.05）,且相對(duì)于單藥治療組,LY294002+氫鹽水聯(lián)合治療組細(xì)胞活力明顯受到抑制（P<0.05）... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：89 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

（A,B,C）飽和氫鹽水與PI3K抑制劑LY294002對(duì)A549細(xì)胞增殖的抑制作用Fig.1.Effectsofhydrogen-richsalineandincombinationwithPI3KinhibitorLY294002oncellproliferationinA549cells.(A)Non-Small-CellLungcancercellline(A549)treatedwithhydrogen-richsaline,LY294002andcombinationwasincubatedfor24hours.(B)Forviability,thecellswereincubatedasfortheproliferationassayofMTT.Opticaldensity(OD)

重慶醫(yī)科大學(xué)博士研究生學(xué)位論文2.2 飽和氫鹽水與 PI3K 抑制劑 LY294002 聯(lián)合和 MDA 的影響為了進(jìn)一步探討飽和氫鹽水和 PI3K 聯(lián)合治療在 A的作用，我們對(duì)細(xì)胞 ROS 和 MDA 的濃度進(jìn)行了檢測(cè)氫鹽水組和飽和氫鹽水+PI3K 聯(lián)合治療組 SOD 水平增鹽水+PI3K 聯(lián)合治療組 SOD 水平增高更加明顯。與對(duì)氫鹽水+PI3K 聯(lián)合治療組降低 MDA 水平，其中，飽和MDA 水平降低富較飽和氫鹽水組更加明顯（圖 2B）。水+PI3K 聯(lián)合抑制 A549 細(xì)胞內(nèi)的氧化應(yīng)激水平。圖 2

21圖 3（A, B）飽和氫鹽水與 PI3K 抑制劑 LY294002 對(duì) A549 細(xì)胞凋亡的抑制Fig. 3.Effects of hydrogen-rich saline and LY294002 as single-agents and in combination onthe survival ofA549 cell line. A549 NSCLC cells were treated by hydrogen-rich saline(0.6mmol／L) and LY294002 (1 μmol/L), each alone or in combination, for 24h. Thepercentage of apoptotic cells was determined by Annexin V and PI staining. Mean±SEM. forthree independent experiments are shown. *, P<0.05 versus single drug.


本文編號(hào)：3418026