目的:細胞周期蛋白依賴的蛋白激酶3（CDK3）在肺癌侵襲轉移的作用目前還不明確。我們實驗室前期的研究發(fā)現CDK3能磷酸化轉錄因子krüppel-like factor 4（KLF4）的絲氨酸244（Ser244）位點。本課題的目的是研究CDK3/KLF4在肺癌侵襲轉移的作用及機制。方法:（1）Western Blot檢測CDK3和KLF4在肺癌細胞系的表達;（2）TCGA數據庫、肺癌組織芯片、肺癌病人臨床樣本中CDK3和KLF4表達水平的檢測以及分析;（3）構建CDK3過表達和敲低的肺癌細胞穩(wěn)轉株,Transwell migration assay和Transwell invasion assay實驗研究其對肺癌細胞侵襲轉移能力的影響;（4）構建KLF4以及其Ser244位點突變的質粒KLF4-S244A的過表達肺癌細胞穩(wěn)轉株,Transwell migration assay和Transwell invasion assay實驗研究其對肺癌細胞侵襲轉移能力的影響,探索CDK3磷酸化KLF4的Ser244位點對KLF4的功能產生的影響;（5）動物實驗構建肺癌轉移模型研究CDK3、KLF... 

【文章來源】：深圳大學廣東省

【文章頁數】：104 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

qPCR檢測肺癌細胞系中CDK3的mRNA表達水平以BEAS-2B細胞的2-ΔΔCt為標準值，分別用各組的2-ΔΔCt除該值，算出相對值后作圖

圖 2 Western blot 檢測肺癌細胞系中 CDK3 的蛋白表達水平3 在肺癌細胞株及 BEAS-2B 對照細胞的蛋白表達水平，以 β-actin 蛋白作為內參DK3 條帶的灰度值，除以內參 β-actin 的灰度值算出相對灰度值，再以 BEAS-2B對灰度值作為標準值，分別用各組的相對灰度值除以該值，算出值后作圖。CGA 數據庫肺癌病人臨床樣本中 CDK3 的表達水平 TCGA 數據庫中肺癌病人的臨床信息和組織樣本中各個基因在 mRN匯總結果，對照臨床信息找出同時有肺癌組織樣本中 CDK3 表達結果 CDK3 表達結果的患者的數據，統(tǒng)計并加以分析，結果如圖 3 所示：同時有肺癌組織樣本中 CDK3 表達結果和癌旁組織樣本，CDK3 表達，相較于癌旁組織而言，CDK3 在肺癌組織中的表達量更高。CDK3 組織中表達量的不同提示 CDK3 可能在肺癌的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮了一定

3 TCGA 數據庫中在肺癌病人臨床樣本中 CDK3 的 mRNA 表達水本 100 例，與之匹配的肺癌組織樣本 100 例。P<0.05 為有統(tǒng)計學差顯著統(tǒng)計學差異，P<0.001 為有極其顯著的統(tǒng)計學差異。織芯片中 CDK3 表達水平的檢測的肺癌組織芯片，其上包括 110 例肺癌組織樣本和 10 例癌染色后，分析結果并進行打分。對打分結果進行統(tǒng)計分析， CDK3 在肺癌組織中的表達高于在癌旁組織中的表達，和上析結果相吻合。圖5顯示當肺癌具體分類為腺癌和鱗狀細胞織而言，CDK3 的表達水平也是上調。


本文編號：3411635