近年來,乳腺癌發(fā)病率逐年升高,發(fā)病年齡趨于年輕化,難治愈、易于復(fù)發(fā),已經(jīng)成為女性罹患癌癥的首要類型。乳腺癌是具有高度異質(zhì)性的惡性腫瘤,臨床上通過對相關(guān)生物標(biāo)志物表達(dá)量的統(tǒng)計與分析進(jìn)行乳腺癌分子分型。生物標(biāo)志物是癌癥分子分型的基礎(chǔ),分析、探究生物標(biāo)志物在不同階段、不同細(xì)胞系間的表達(dá)程度及其調(diào)控的生理學(xué)行為,是細(xì)化和拓展分子分型的重要研究方向。與此同時,高速發(fā)展的納米材料,以其優(yōu)良的光學(xué)、電學(xué)、磁學(xué)、催化及易修飾等特性,在乳腺癌的檢測、生物分子分析及靶向治療方面得到越來越廣泛的應(yīng)用。通過引入抗體、抗原、適配體或者酶等生物分子,可制備出具有特異性識別功能的納米材料應(yīng)用于癌癥生物標(biāo)志物或癌細(xì)胞的識別、檢測及相關(guān)生物分子特性的探究。在本論文中,我們通過在納米材料的制備及修飾中引入生物分子,成功制備了幾種具有特異性識別功能的納米材料,利用其熒光或催化性質(zhì),初步探究了適配體穩(wěn)定的銀納米簇（Aptamer-Ag NCs）及熒光標(biāo)記適配體在分子分型中的應(yīng)用；孕激素受體抗體（anti-PR）標(biāo)記熒光納米顆粒的靶向行為；Pd/GO復(fù)合納米材料在乳腺癌SNP位點(diǎn)檢測中的應(yīng)用。具體內(nèi)容如下：1. Aptamer... 

【文章來源】：東南大學(xué)江蘇省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：89 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－２?＂ｃｅｌｌ－ａｐｔａｍｅｒ－ｃｅｉｒＨ明治＂夾也、＂體系示意圖

在細(xì)胞內(nèi)聚集，來區(qū)分不同的細(xì)胞類型。??除了適配體特異性靴向細(xì)胞識別細(xì)胞，適配體的多樣性也賦予其在一些技術(shù)手段??上更加廣泛的用途。如圖１－４所示，？１１￥６〇峭＼￥〇１１等［７３］選用一個可與ＩｇＧ抗體Ｆｃ片段特??異性結(jié)合的適配體代替與傳統(tǒng)免疫紀(jì)化標(biāo)記中的二抗，結(jié)合微流控技術(shù)，用于定量分析??免疫組化樣品。傳統(tǒng)免疫組合化棟記標(biāo)本時，首先使用多聚甲酵處理石蠟固定樣本，后??加入一抗與樣本中的抗原結(jié)合，加入修飾有顯色酶（如堿性稱酸釀（ａｌｋａｌｉｎｅｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ，??ＡＰ）和辣根過氧化酶（ｈｏｒｓｅｒａｄｉｓｈ?ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ，ＨＲＰ）的ａｎｔｉ－ＩｇＧ二抗，利用酶催化底物??把底物轉(zhuǎn)變成有色產(chǎn)物［７４］或芙光產(chǎn)物［７５］，通過測定吸光度或巧光強(qiáng)度來定性或近似定量??分析蛋白標(biāo)志物的含量。而在該體系中，利用適配體代替?zhèn)鹘y(tǒng)的含有發(fā)色團(tuán)的ａｎｔｉ－ＩｇＧ??二抗

可與抗原特異性結(jié)合而使得納米材料產(chǎn)生聚集現(xiàn)象，從而可Ｗ通過測定光的吸收??來檢測相關(guān)物質(zhì)的含量。另一方面是指，在納米材料的表面修飾顯色酶，通過酶聯(lián)免疫??反應(yīng)檢測催化底物反應(yīng)前后吸光度的變化來分析待測樣品［８３］。如圖１－６所示，Ｌｉｕ等ｔ８４］??利用Ａｕ納米顆粒和磁性納米探針構(gòu)建了一種Ｈ明治夾也結(jié)構(gòu)來檢測歴胎抗原ＣＥＡ。首??先，在磁性納米顆粒表面修飾抗體蛋白用于捕獲抗原。其次，在Ａｕ納米顆粒的表面同??時引入ｓｓＤＮＡ和抗體，利用ｓｓＤＮＡ末端帶的生物素與帶有ＨＲＰ的親和素相結(jié)合，把??ＨＲＰ引入到Ａｕ納米顆粒的表面。通過抗原抗體特異性結(jié)合構(gòu)建Ｈ段夾屯、體系，利用??ＨＲＰ催化ＴＭＢ化〇２顯色實(shí)現(xiàn)信號放大，通過測定４５０?ｎｍ處的吸收值實(shí)現(xiàn)對抗原的濃??度的定量分析。??１２??


本文編號：3407653