目的:探究S100A6蛋白在無功能性垂體腺瘤（NFPAs）組織的表達(dá)及亞細(xì)胞定位;結(jié)合患者臨床資料,分析其表達(dá)與臨床特征的相關(guān)性;探究S100A6蛋白在NFPAs患者血清中表達(dá)情況及臨床意義;以鼠來源垂體腺瘤細(xì)胞系（TtT/GF）為研究對象,從生物細(xì)胞功能層面進(jìn)一步探究S100A6對垂體腺瘤細(xì)胞的增殖、遷移、侵襲發(fā)揮的作用。本研究擬通過以上實(shí)驗(yàn),初步明確S100A6蛋白在NFPAs中表達(dá)的臨床意義,明確S100A6對垂體腺瘤細(xì)胞的生物學(xué)功能,以期發(fā)現(xiàn)新的NFPAs侵襲標(biāo)志物或潛在的分子治療靶點(diǎn)。方法:通過免疫組化檢測NFPAs組織樣本的S100A6蛋白的表達(dá)及分布情況;基于對應(yīng)NFPAs患者的臨床資料,用統(tǒng)計軟件分析S100A6表達(dá)與患者臨床特征之間的相關(guān)性。ELISA檢測S100A6蛋白在NFPAs患者血清中表達(dá)情況及臨床意義;標(biāo)準(zhǔn)的細(xì)胞培養(yǎng)方法培養(yǎng)垂體腺瘤細(xì)胞系TtT/GF,再通過siRNA轉(zhuǎn)染方法下調(diào)S100A6的表達(dá);Western Blot檢測siRNA轉(zhuǎn)染后TtT/GF細(xì)胞的S100A6、β-catenin的表達(dá);Edu標(biāo)記法、集落形成法（colony formation）... 

【文章來源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

1臨床樣本收集流程

第三章實(shí)驗(yàn)結(jié)果與圖表分析13我們收集到的70例NFPAs樣本的患者男女比為1.41：1；男性41例，女性29例�；颊甙l(fā)病年齡范圍17-70周歲，平均年齡為51.6±10.8歲，患者大部分集中在40-60周歲之間�；颊呷朐喊Y狀以視力視野障礙、頭暈頭痛為主（62.9%），性功能障礙、乏力（15.7%），無明顯癥狀者（21.4%）也較常見。腫瘤體積絕大多數(shù)是大腺瘤以上（>1cm），約占66例（94.3%）；其中巨腺瘤17例（≥4cm）占24.3%；微腺瘤僅4例，約占5.7%。基于MRI等影像學(xué)的Knosp分級中，判定為3-4級的25例（35.7%），其中經(jīng)過術(shù)中識別及術(shù)后病理檢查確認(rèn)為存在侵襲行為的有23例，約占22.8%。3.2S100A6在NFPAs組織蛋白水平表達(dá)情況我們通過免疫組化檢測S100A6蛋白在NFPAs的表達(dá)及定位情況。免疫組化結(jié)果顯示，在正常垂體中，S100A6表達(dá)較弱，并且主要在細(xì)胞核表達(dá)。S100A6蛋白在NFPAs組織中細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)，細(xì)胞間隙中均有表達(dá),主要以細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞外液表達(dá)為主。（圖3.2.A）。我們用WB檢測正常垂體與垂體腺瘤的定量表達(dá)差異。WB結(jié)果顯示，相比于正常垂體，S100A6在NFPAs中表達(dá)較高。(圖3.2.B,P<0.05)圖3.2AS100A6蛋白在NFPAs和正常垂體的亞細(xì)胞定位

第三章實(shí)驗(yàn)結(jié)果與圖表分析14圖3.2BS100A6在NFPAs和正常垂體中表達(dá)的對比3.3S100A6在NFPAs中表達(dá)情況與患者臨床特征相關(guān)性分析我們通過免疫組化技術(shù)檢測收集的70例NFPAs樣本中S100A6表達(dá)，并且收集患者相關(guān)的臨床資料，利用統(tǒng)計軟件分析S100A6表達(dá)與臨床各特性的相關(guān)性。S100A6在樣本中表達(dá)結(jié)果符合正態(tài)分布，陽性面積占比均數(shù)為0.015±0.002。我們定義大于等于0.015的表達(dá)量為高表達(dá)，小于0.015的為低表達(dá)。我們共識別出31例樣本為高表達(dá)，39例樣本低表達(dá)。統(tǒng)計分析結(jié)果顯示，S100A6表達(dá)與NFPAs患者年齡、性別、腫瘤大孝臨床癥狀均不存在相關(guān)性。然而，31例樣本為高表達(dá)的NFPAs樣本中，有18例NFPAs是侵襲性NFPAs,統(tǒng)計結(jié)果顯示，NFPAs的侵襲性與S100A6表達(dá)高低存在顯著相關(guān)性。

【參考文獻(xiàn)】：
碩士論文
[1]S100A6在乳腺癌中的表達(dá)及其對乳腺癌細(xì)胞的作用和機(jī)制探討[D]. 游莉.重慶醫(yī)科大學(xué) 2011



本文編號：3402674