目的:探究S100A6蛋白在無功能性垂體腺瘤（NFPAs）組織的表達及亞細胞定位;結合患者臨床資料,分析其表達與臨床特征的相關性;探究S100A6蛋白在NFPAs患者血清中表達情況及臨床意義;以鼠來源垂體腺瘤細胞系（TtT/GF）為研究對象,從生物細胞功能層面進一步探究S100A6對垂體腺瘤細胞的增殖、遷移、侵襲發(fā)揮的作用。本研究擬通過以上實驗,初步明確S100A6蛋白在NFPAs中表達的臨床意義,明確S100A6對垂體腺瘤細胞的生物學功能,以期發(fā)現(xiàn)新的NFPAs侵襲標志物或潛在的分子治療靶點。方法:通過免疫組化檢測NFPAs組織樣本的S100A6蛋白的表達及分布情況;基于對應NFPAs患者的臨床資料,用統(tǒng)計軟件分析S100A6表達與患者臨床特征之間的相關性。ELISA檢測S100A6蛋白在NFPAs患者血清中表達情況及臨床意義;標準的細胞培養(yǎng)方法培養(yǎng)垂體腺瘤細胞系TtT/GF,再通過siRNA轉染方法下調S100A6的表達;Western Blot檢測siRNA轉染后TtT/GF細胞的S100A6、β-catenin的表達;Edu標記法、集落形成法（colony formation）... 

【文章來源】：南昌大學江西省 211工程院校

【文章頁數】：48 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

1臨床樣本收集流程

第三章實驗結果與圖表分析13我們收集到的70例NFPAs樣本的患者男女比為1.41：1；男性41例，女性29例�；颊甙l(fā)病年齡范圍17-70周歲，平均年齡為51.6±10.8歲，患者大部分集中在40-60周歲之間�；颊呷朐喊Y狀以視力視野障礙、頭暈頭痛為主（62.9%），性功能障礙、乏力（15.7%），無明顯癥狀者（21.4%）也較常見。腫瘤體積絕大多數是大腺瘤以上（>1cm），約占66例（94.3%）；其中巨腺瘤17例（≥4cm）占24.3%；微腺瘤僅4例，約占5.7%�；贛RI等影像學的Knosp分級中，判定為3-4級的25例（35.7%），其中經過術中識別及術后病理檢查確認為存在侵襲行為的有23例，約占22.8%。3.2S100A6在NFPAs組織蛋白水平表達情況我們通過免疫組化檢測S100A6蛋白在NFPAs的表達及定位情況。免疫組化結果顯示，在正常垂體中，S100A6表達較弱，并且主要在細胞核表達。S100A6蛋白在NFPAs組織中細胞核、細胞質，細胞間隙中均有表達,主要以細胞質、細胞外液表達為主。（圖3.2.A）。我們用WB檢測正常垂體與垂體腺瘤的定量表達差異。WB結果顯示，相比于正常垂體，S100A6在NFPAs中表達較高。(圖3.2.B,P<0.05)圖3.2AS100A6蛋白在NFPAs和正常垂體的亞細胞定位

第三章實驗結果與圖表分析14圖3.2BS100A6在NFPAs和正常垂體中表達的對比3.3S100A6在NFPAs中表達情況與患者臨床特征相關性分析我們通過免疫組化技術檢測收集的70例NFPAs樣本中S100A6表達，并且收集患者相關的臨床資料，利用統(tǒng)計軟件分析S100A6表達與臨床各特性的相關性。S100A6在樣本中表達結果符合正態(tài)分布，陽性面積占比均數為0.015±0.002。我們定義大于等于0.015的表達量為高表達，小于0.015的為低表達。我們共識別出31例樣本為高表達，39例樣本低表達。統(tǒng)計分析結果顯示，S100A6表達與NFPAs患者年齡、性別、腫瘤大孝臨床癥狀均不存在相關性。然而，31例樣本為高表達的NFPAs樣本中，有18例NFPAs是侵襲性NFPAs,統(tǒng)計結果顯示，NFPAs的侵襲性與S100A6表達高低存在顯著相關性。

【參考文獻】：
碩士論文
[1]S100A6在乳腺癌中的表達及其對乳腺癌細胞的作用和機制探討[D]. 游莉.重慶醫(yī)科大學 2011



本文編號：3402674