胃癌是全球高發(fā)病率、高致死率的惡性腫瘤之一,雖然近年來全球胃癌的發(fā)病人數(shù)逐年遞減,但是中國胃癌的發(fā)病率和死亡率卻居高不下。由于早期胃癌常常沒有明顯的癥狀,患者就診時(shí)多為中晚期,其預(yù)后一般較差。因此,探索胃癌發(fā)生發(fā)展過程中的分子調(diào)控機(jī)制,有助于發(fā)現(xiàn)胃癌早期診斷的生物標(biāo)記物和治療靶標(biāo),對于提高胃癌患者生存率具有重要意義。RNA修飾是指發(fā)生在RNA堿基上的各種化學(xué)修飾,可影響RNA的穩(wěn)定、代謝和翻譯等過程。RNA修飾在生物體的正常生理功能調(diào)控中發(fā)揮重要作用,其異常與疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。假尿嘧啶修飾（pseudouridylation）是最早被發(fā)現(xiàn)、豐度最高的RNA修飾類型之一。假尿嘧啶合成酶（pseudouridine synthase,PUS）是能夠?qū)⒛蜞奏まD(zhuǎn)換成假尿嘧啶的酶,可在RNA代謝和細(xì)胞生物學(xué)功能調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要的作用。然而,假尿嘧啶修飾在惡性腫瘤中的調(diào)控作用及其分子機(jī)制尚未有研究。我們在胃癌樣本中分析所有已報(bào)道的假尿嘧啶合成酶的m RNA表達(dá)水平,發(fā)現(xiàn)與癌旁組織相比,胃癌組織中假尿嘧啶合成酶PUS7的m RNA表達(dá)存在顯著的表達(dá)差異。同時(shí),我們利用免疫組化方法在組織芯片（90... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：85 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

1PUS7mRNA在胃癌臨床樣本中表達(dá)升高

浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文實(shí)驗(yàn)結(jié)果343.1.2PUS7蛋白在胃癌樣本中顯著低表達(dá)假尿嘧啶合成酶主要通過其蛋白來發(fā)揮生物學(xué)功能，在檢測PUS7在胃癌組織中的RNA表達(dá)水平變化后，我們進(jìn)一步檢測其蛋白水平的變化。首先，我們對30對胃癌及癌旁蛋白樣品進(jìn)行Westernblot檢測，并對PUS7的蛋白水平進(jìn)行定量分析。結(jié)果顯示，相較于癌旁組織，PUS7的蛋白水平在胃癌組織顯著下降（圖3.1.2A-B）。同時(shí)，我們還利用免疫組化方法在組織芯片中檢測PUS7的蛋白表達(dá)水平，結(jié)果顯示，在胃癌組織中PUS7的染色強(qiáng)度較正常組織較弱，提示PUS7蛋白的表達(dá)在臨床組織胃癌樣本中，較癌旁組織有下降趨勢（圖3.1.3A）。針對90對胃癌及其癌旁組織樣本的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，發(fā)現(xiàn)胃癌組織中的PUS7蛋白顯著低于癌旁組織（圖3.1.3B）。綜上所述，PUS7mRNA在胃癌組織中高表達(dá)，其蛋白在胃癌組織中顯著低表達(dá)。圖3.1.2PUS7蛋白在胃癌臨床樣本中的表達(dá)情況。利用Westernblot技術(shù)檢測樣本中PUS7蛋白表達(dá)情況，以β-actin作為內(nèi)參。圖中隨機(jī)選取三對展示，并將30對樣本中PUS7蛋白表達(dá)變化進(jìn)行統(tǒng)計(jì)后，繪制成表格。（B）將30對樣本蛋白表達(dá)繪制成柱狀圖，坐標(biāo)軸上方表示癌組織中PUS7表達(dá)上調(diào)，坐標(biāo)軸下方表示癌組織中PUS7表達(dá)下調(diào)。

浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文實(shí)驗(yàn)結(jié)果35圖3.1.3PUS7蛋白在胃癌臨床組織芯片中的表達(dá)情況。（A）利用免疫組化方法在胃癌組織芯片中檢測PUS7的蛋白表達(dá)情況。紅棕色為PUS7抗體染色區(qū)域，藍(lán)紫色為核染區(qū)域。（B）統(tǒng)計(jì)胃癌組織樣本中PUS7蛋白水平染色強(qiáng)度，將結(jié)果繪制成配對統(tǒng)計(jì)圖。每項(xiàng)實(shí)驗(yàn)獨(dú)立重復(fù)三次，**表示P小于0.01，統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著（Student"sttest)。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Recent developments and innovations in gastric cancer[J]. Mehmet Mihmanli,Enver Ilhan,Ufuk Oguz Idiz,Ali Alemdar,Uygar Demir.  World Journal of Gastroenterology. 2016(17)



本文編號：3394742