第一部分SPOP的表達下調(diào)和肝癌的惡性生物表型相關(guān)目的:SPOP在多種腫瘤中扮演抑制腫瘤的角色,但是其在肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）中的功能研究很少,因此本研究旨在觀察SPOP在HCC及癌旁正常肝組織中的表達方式及相關(guān)的臨床意義。方法:課題組應(yīng)用定量PCR對74對HCC及癌旁正常肝組織中的SPOP mRNA轉(zhuǎn)錄進行檢測;用Western Bloting和免疫組織化學(xué)（IHC）方法對44對配對的臨床標(biāo)本中的SPOP的蛋白表達水平進行檢測;統(tǒng)計分析了SPOP的表達高低與相應(yīng)病人臨床資料之間的相關(guān)性,用Cox風(fēng)險比例模型分析了SPOP表達高低與患者生存預(yù)后的關(guān)系。結(jié)果:在74對肝癌組織中85.1%（63/74）的SPOP mRNA水平下降,統(tǒng)計結(jié)果示P<0.001;Western Blotting檢測了44對HCC組織中的SPOP蛋白水平,結(jié)果示84.1%（37/44）HCC組織中SPOP的蛋白水平下降,統(tǒng)計結(jié)果P<0.01;IHC檢測了對應(yīng)的44對HCC及配對癌旁正常肝組織中SPOP的定位和表達量,結(jié)果顯示SPOP同時定位在細胞核和細胞漿中,... 

【文章來源】：福建醫(yī)科大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：125 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

SPOP的蛋白作用網(wǎng)引自GeneCards

36圖 2.1 74 對臨床標(biāo)本中 mRNA 表達情況。A、SPOP 的 mRNA 轉(zhuǎn)錄水平 C 較 N 明顯下調(diào)，占 63/74，85.1%。B、N 和 C 兩兩配對 Wilcoxon 非參數(shù)檢驗，P<0.001。N:癌旁正常肝組織，C:肝癌組織。2.4.3 Western Blotting 檢測 SPOP 在 HCC 中表達下調(diào)為了進一步確認 SPOP 在 HCC 表達變化情況，我們提取了與 IHC 相對應(yīng)的 44對臨床標(biāo)本組織蛋白，根據(jù)測定的蛋白濃度值，把所有的蛋白濃度統(tǒng)一調(diào)整至相同的濃度后，行 Western blotting 檢測，結(jié)果提示 SPOP 在 HCC 中的表達下調(diào)明顯（圖 2.2A），統(tǒng)計結(jié)果 P<0.05（圖 2.2 B），統(tǒng)計學(xué)上有顯著意義。

37圖 2.244 對肝癌組織 SPOP 的表達 A: 44 對組織中 SPOP 的表達。B: 44 對組織癌和癌旁統(tǒng)計分析，P<0.05。N:癌旁正常肝組織，C:肝癌組織。2.4.4 IHC 檢測 SPOP 在 HCC 定位及表達情況為了明確 SPOP 的功能，需要檢測 SPOP 在細胞內(nèi)的定位情況。為了保證實驗結(jié)果的可靠性，我們首先用 HE 染色進一步確認 44 對肝癌和癌旁正常肝組織的組織類型和分化程度，隨機盲法經(jīng) 2 位有豐富 HCC 診斷經(jīng)驗的病理專業(yè)醫(yī)師區(qū)分癌與癌旁，并做好標(biāo)記。然后用 IHC 方法檢測了 44 對組織中 SPOP 的定位及表達方式（圖 2.3 A），結(jié)果表明 SPOP 同時定位細胞的核與漿，統(tǒng)計結(jié)果示在 44 對肝癌組織中，59.1%（26/44）的 HCC 中的 SPOP 表達水平下調(diào)，P<0.05（圖 2.3 B），統(tǒng)計學(xué)上有顯著意義。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]原發(fā)性肝癌診療規(guī)范（2017年版）[J]. National Health and Family Planning Commission of the People’s Republic of China;.  臨床肝膽病雜志. 2017(08)
[2]Practice guidelines for the pathological diagnosis of primary liver cancer: 2015 update[J]. Wen-Ming Cong,Hong Bu,Jie Chen,Hui Dong,Yu-Yao Zhu,Long-Hai Feng,Jun Chen.  World Journal of Gastroenterology. 2016(42)
[3]Hepatocellular carcinoma: Where are we?[J]. Roberto Mazzanti,Umberto Arena,Renato Tassi.  World Journal of Experimental Medicine. 2016(01)
[4]Role of radiotherapy in the management of hepatocellular carcinoma:A systematic review[J]. Maria-Aggeliki Kalogeridi,Anna Zygogianni,George Kyrgias,John Kouvaris,Sofia Chatziioannou,Nikolaos Kelekis,Vassilis Kouloulias.  World Journal of Hepatology. 2015(01)



本文編號：3394332