第一部分SPOP的表達(dá)下調(diào)和肝癌的惡性生物表型相關(guān)目的:SPOP在多種腫瘤中扮演抑制腫瘤的角色,但是其在肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）中的功能研究很少,因此本研究旨在觀察SPOP在HCC及癌旁正常肝組織中的表達(dá)方式及相關(guān)的臨床意義。方法:課題組應(yīng)用定量PCR對(duì)74對(duì)HCC及癌旁正常肝組織中的SPOP mRNA轉(zhuǎn)錄進(jìn)行檢測(cè);用Western Bloting和免疫組織化學(xué)（IHC）方法對(duì)44對(duì)配對(duì)的臨床標(biāo)本中的SPOP的蛋白表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè);統(tǒng)計(jì)分析了SPOP的表達(dá)高低與相應(yīng)病人臨床資料之間的相關(guān)性,用Cox風(fēng)險(xiǎn)比例模型分析了SPOP表達(dá)高低與患者生存預(yù)后的關(guān)系。結(jié)果:在74對(duì)肝癌組織中85.1%（63/74）的SPOP mRNA水平下降,統(tǒng)計(jì)結(jié)果示P<0.001;Western Blotting檢測(cè)了44對(duì)HCC組織中的SPOP蛋白水平,結(jié)果示84.1%（37/44）HCC組織中SPOP的蛋白水平下降,統(tǒng)計(jì)結(jié)果P<0.01;IHC檢測(cè)了對(duì)應(yīng)的44對(duì)HCC及配對(duì)癌旁正常肝組織中SPOP的定位和表達(dá)量,結(jié)果顯示SPOP同時(shí)定位在細(xì)胞核和細(xì)胞漿中,... 

【文章來源】：福建醫(yī)科大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：125 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

SPOP的蛋白作用網(wǎng)引自GeneCards

36圖 2.1 74 對(duì)臨床標(biāo)本中 mRNA 表達(dá)情況。A、SPOP 的 mRNA 轉(zhuǎn)錄水平 C 較 N 明顯下調(diào)，占 63/74，85.1%。B、N 和 C 兩兩配對(duì) Wilcoxon 非參數(shù)檢驗(yàn)，P<0.001。N:癌旁正常肝組織，C:肝癌組織。2.4.3 Western Blotting 檢測(cè) SPOP 在 HCC 中表達(dá)下調(diào)為了進(jìn)一步確認(rèn) SPOP 在 HCC 表達(dá)變化情況，我們提取了與 IHC 相對(duì)應(yīng)的 44對(duì)臨床標(biāo)本組織蛋白，根據(jù)測(cè)定的蛋白濃度值，把所有的蛋白濃度統(tǒng)一調(diào)整至相同的濃度后，行 Western blotting 檢測(cè)，結(jié)果提示 SPOP 在 HCC 中的表達(dá)下調(diào)明顯（圖 2.2A），統(tǒng)計(jì)結(jié)果 P<0.05（圖 2.2 B），統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著意義。

37圖 2.244 對(duì)肝癌組織 SPOP 的表達(dá) A: 44 對(duì)組織中 SPOP 的表達(dá)。B: 44 對(duì)組織癌和癌旁統(tǒng)計(jì)分析，P<0.05。N:癌旁正常肝組織，C:肝癌組織。2.4.4 IHC 檢測(cè) SPOP 在 HCC 定位及表達(dá)情況為了明確 SPOP 的功能，需要檢測(cè) SPOP 在細(xì)胞內(nèi)的定位情況。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性，我們首先用 HE 染色進(jìn)一步確認(rèn) 44 對(duì)肝癌和癌旁正常肝組織的組織類型和分化程度，隨機(jī)盲法經(jīng) 2 位有豐富 HCC 診斷經(jīng)驗(yàn)的病理專業(yè)醫(yī)師區(qū)分癌與癌旁，并做好標(biāo)記。然后用 IHC 方法檢測(cè)了 44 對(duì)組織中 SPOP 的定位及表達(dá)方式（圖 2.3 A），結(jié)果表明 SPOP 同時(shí)定位細(xì)胞的核與漿，統(tǒng)計(jì)結(jié)果示在 44 對(duì)肝癌組織中，59.1%（26/44）的 HCC 中的 SPOP 表達(dá)水平下調(diào)，P<0.05（圖 2.3 B），統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著意義。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3394332