當前,中國乳腺癌位于女性癌癥發(fā)病的第一位,女性癌癥死亡例數(shù)的第五位。乳腺癌不僅威脅著女性的生活質(zhì)量,而且對整個社會經(jīng)濟、家庭幸福均帶來不良影響,是一個世界關(guān)注的公共衛(wèi)生問題。盡管乳腺癌存在較好的預后情況,但五年生存率仍與美國等發(fā)達國家存在差距。接受早期治療的乳腺癌患者的5年生存率可達90%以上,說明早期診斷是乳腺癌患者獲得較好預后的關(guān)鍵。乳腺癌是一種異源性癌,遺傳和表觀遺傳的變化都會影響其發(fā)生和發(fā)展。然而,與乳腺癌相關(guān)的潛在分子和生物學功能仍不清楚。因此我們從表觀遺傳入手,探究在乳腺癌中存在差異表達的非編碼RNA及其在乳腺癌中的作用和調(diào)控機制,為乳腺癌提供潛在的臨床早期篩查、診斷和治療靶點。本文通過微陣列分析探究長鏈非編碼RNA（Long non-coding RNA,lncRNA）在乳腺癌中的表達失調(diào)情況,并發(fā)現(xiàn)一種尚未被研究過的非編碼RNA LncNONHSAT028712（簡稱Lnc712）在乳腺癌細胞株中高表達,并在臨床乳腺癌組織標本中得到驗證。這一現(xiàn)象提示Lnc712的表達可能與乳腺癌的發(fā)生或發(fā)展息息相關(guān),并可能為乳腺癌的臨床早期篩查提供幫助。隨后我們使用特異性的siRNA干... 

【文章來源】：江南大學江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

lncRNA的功能與其在細胞中的位置相關(guān)Fig1-1FunctionsoflncRNAsareassociatedwiththeircellularlocalizationLncRNA的順式調(diào)節(jié)是通過募集轉(zhuǎn)錄因子、染色質(zhì)修飾劑或者含有染色質(zhì)的組織器將lncRNA和相關(guān)效應(yīng)蛋白錨定到基因啟動子的DNA-RNA三元組來調(diào)節(jié)局部基因表

江南大學碩士學位論文8離Hsp90-Cdc37-客戶蛋白三元復合物。最終促進了客戶蛋白與Hsp90結(jié)合（圖1-2）。圖1-3Hsp90-Cdc37-客戶蛋白周期的模式圖Fig.1-3AspeculativemodelfortheHsp90-Cdc37-clientproteincycle1.1.6CDK2簡述在細胞的有絲分裂中，細胞周期蛋白依賴性激酶2（Cyclin-dependentkinases2，CDK2）是十分重要的調(diào)節(jié)因子，從晚期G1期到整個S期均活躍。CDK2通過細胞周期蛋白E1或E2與細胞周期蛋白A2的結(jié)合而激活，通過CAK復合物（CDK7，MAT1和細胞周期蛋白H）磷酸化，通過細胞分裂周期蛋白25A（CDC25A）的抑制去磷酸化。在G1期晚期，活化的CDK2-細胞周期蛋白E與CDK4/CDK6-細胞周期蛋白D磷酸化Rb一起從Rb釋放E2F，這啟動了細胞周期進程所需的基因的轉(zhuǎn)錄[79]。除了Rb外，CDK2還控制其他調(diào)節(jié)蛋白的磷酸化，從而將其他信號通路與細胞周期進程聯(lián)系起來。例如，SMAD3被CDK2-細胞周期蛋白E磷酸化會限制其轉(zhuǎn)錄活性，并最終減慢細胞周期進程[80]。CDK2還可以使幾種調(diào)控DNA復制的成分復合物磷酸化，這也是啟動DNA復制的關(guān)鍵一步。這其中包括CDC6，是將微型染色體維持（MCM）蛋白加載到DNA和MCM解旋酶蛋白上以控制DNA復制起始所必需的[81]。最后，CDK2在協(xié)調(diào)細胞周期向中心體復制方面具有重要作用[82]，因為將目標中心體蛋白[83]和中心線卷曲螺旋蛋白[84]

第三章實驗結(jié)果與討論23第三章實驗結(jié)果與討論3.1乳腺癌中存在高表達的Lnc7123.1.1微陣列分析篩選在乳腺癌細胞中表達失調(diào)的lncRNA為了鑒定與乳腺癌進展或耐藥性產(chǎn)生有關(guān)的長鏈非編碼RNA，我們比較了來自MCF-7細胞和MCF-7/ADM細胞的lncRNA圖譜。MCF-7/ADM細胞是通過長期阿霉素培養(yǎng)而產(chǎn)生阿霉素抗性的乳腺癌細胞，與親本對照MCF-7細胞（MCF-7/WT）相比，它們具有更強的增殖，轉(zhuǎn)移和對化療藥物的抵抗能力[100,101]。因此，在MCF-7/ADM細胞中差異表達的lncRNA可能與調(diào)節(jié)癌癥擴散、進展或化學耐藥性息息相關(guān)。在60個明顯存在表達差異的lncRNA中，LncRNANONHSAT028712（Lnc712）在MCF-7/ADM細胞中具有更高的表達水平(圖3-1)。并通過文獻檢測，發(fā)現(xiàn)未有Lnc712與乳腺癌早期篩查，診斷的相關(guān)報道，也沒有其在乳腺癌中的作用機制的研究。圖3-1MCF-7/ADM和MCF-7/WT細胞中不同lncRNA的熱圖，分析重復三次Fig.3-1HierarchicalclusteringofdistinctlncRNAinMCF-7/ADMandMCF-7/WTcells.Proflingwasreplicated3times3.1.2實時熒光定量PCR分析Lnc712在乳腺癌中的表達與其他化學抗性相關(guān)蛋白（例如p-糖蛋白[102]和谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶P1[103]）在化學敏感性癌細胞中低表達不同，實時熒光定量PCR結(jié)果（圖3-2）顯示，雖然Lnc712在耐藥細胞中有較高的表達水平，但它也可以在MCF-7/WT細胞中被檢測到。因此，我們認為Lnc712可能參與了涉及乳腺癌細胞增殖的其他信號通路。為了驗證這種假設(shè)，我

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Metronomic chemotherapy for non-metastatic triple negative breast cancer: Selection is the key[J]. Connie Rabanal,Rossana Ruiz,Silvia Neciosup,Henry Gomez.  World Journal of Clinical Oncology. 2017(06)



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