目的:結(jié)腸癌（colorectal cancer,CRC）發(fā)病率呈逐年上升的趨勢,但目前對結(jié)腸癌的發(fā)病機(jī)制仍不清楚。鈣周期素結(jié)合蛋白（Calcyclin-binding protein,Cacy BP/SIP）主要表達(dá)于細(xì)胞質(zhì)中,本課題組前期研究發(fā)現(xiàn),胃泌素可刺激結(jié)腸癌細(xì)胞SW480中Cacy BP/SIP發(fā)生核轉(zhuǎn)位,且促進(jìn)細(xì)胞增殖。本研究為進(jìn)一步篩選Cacy BP/SIP入核后下游相互作用的靶蛋白,探索Cacy BP/SIP入核后下游結(jié)合分子的信號通路,探究其在結(jié)腸癌發(fā)生發(fā)展中的可能作用。方法:采用胃泌素刺激人結(jié)腸癌SW480細(xì)胞胞質(zhì)中的Cacy BP/SIP進(jìn)入細(xì)胞核,構(gòu)建Cacy BP/SIP核轉(zhuǎn)位細(xì)胞模型,用激光共聚焦掃描顯微鏡術(shù)和蛋白免疫印跡（Western Blot）驗(yàn)證細(xì)胞模型成功建立。培養(yǎng)未給予胃泌素刺激的結(jié)腸癌SW480細(xì)胞為未刺激組,提取造模組與未刺激組核蛋白,采用i TRAQ技術(shù)結(jié)合LC-MS/MS,篩選兩組差異蛋白,行Mascot數(shù)據(jù)庫檢索,Go在線對差異蛋白進(jìn)行功能注釋聚類分析,并運(yùn)用KEGG對蛋白富集的信號通路進(jìn)行分析。結(jié)果:1.胃泌素刺激人結(jié)腸癌SW480... 

【文章來源】：寧夏醫(yī)科大學(xué)寧夏回族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

胃泌素刺激前、后CacyBP/SIP在結(jié)腸癌細(xì)胞SW480中的表達(dá)

以相同的蛋白含量進(jìn)行 SDS-PAGE 分析，電泳檢測結(jié)果表明，蛋白完整性較好，證明制備的蛋白質(zhì)樣品合格（圖 2）。混合物進(jìn)行 SCX 分級，明顯降低了每個(gè)組分的復(fù)雜程度，提高了后續(xù)色譜及質(zhì)譜檢測的效率。

SDS-PAGE檢測膠圖

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]New cancer suppressor gene for colorectal adenocarcinoma:Filamin A[J]. Zi-Qiang Tian,Jian-Wei Shi,Xiao-Ran Wang,Zhong Li,Gui-Ying Wang.  World Journal of Gastroenterology. 2015(07)
[2]人結(jié)腸癌細(xì)胞中CacyBP/SIP核轉(zhuǎn)位差異表達(dá)基因的驗(yàn)證[J]. 王安萍,趙盈盈,劉欣,翟惠虹.  天津醫(yī)藥. 2014(05)
[3]二氯化鈷致人結(jié)腸癌細(xì)胞系CacyBP/SIP核轉(zhuǎn)位[J]. 謝福利,仇長青,趙盈盈,楊博,馮珊珊,翟惠虹.  基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床. 2012(11)
[4]前列腺素E2對結(jié)腸癌細(xì)胞CacyBP/SIP核轉(zhuǎn)位的影響[J]. 謝福利,翟惠虹.  重慶醫(yī)學(xué). 2012(29)
[5]表皮生長因子對CacyBP/SIP過表達(dá)慢病毒載體轉(zhuǎn)染的結(jié)腸癌細(xì)胞CacyBP/SIP核轉(zhuǎn)位的影響[J]. 謝福利,翟惠虹.  山東醫(yī)藥. 2012(23)
[6]生物信息學(xué)技術(shù)研究[J]. 馮思玲.  信息技術(shù). 2009(05)
[7]結(jié)腸癌細(xì)胞中CacyBP/SIP的表達(dá)及核轉(zhuǎn)位現(xiàn)象[J]. 翟惠虹,陳雄,盧媛媛,王新,樊代明.  世界華人消化雜志. 2008(35)
[8]蛋白質(zhì)組學(xué)研究技術(shù)及其聯(lián)合應(yīng)用[J]. 于靖,王方.  醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志. 2007(04)
[9]中國惡性腫瘤死亡率20年變化趨勢和近期預(yù)測分析[J]. 李連弟,魯鳳珠,張思維,牧人,孫秀娣,皇甫小梅,孫杰,周有尚,歐陽寧慧,饒克勤,陳育德,孫愛明,薛志福,夏毅.  中華腫瘤雜志. 1997(01)

博士論文
[1]CacyBP/SIP核轉(zhuǎn)位在結(jié)腸癌中的意義[D]. 翟惠虹.第四軍醫(yī)大學(xué) 2007



本文編號：3387977