目的:探討術(shù)前超聲引導(dǎo)下細針抽吸細胞學(xué)檢查（US-FNAB）聯(lián)合BRAFT1799A突變、RET/PTC1及RET/PTC3重排對診斷甲狀腺乳頭狀癌（PTC）的特異性及敏感性,為臨床術(shù)前準(zhǔn)確診斷PTC選擇適用的分子標(biāo)記物。方法:收集346個超聲懷疑為甲狀腺惡性結(jié)節(jié)的US-FNAB細胞標(biāo)本及對應(yīng)結(jié)節(jié)（152個）的術(shù)后新鮮組織,采用PCR分別擴增BRAFT1799A、RET/PTC1及RET/PTC3基因,產(chǎn)物經(jīng)基因測序證實。結(jié)果:346個甲狀腺術(shù)前穿刺的結(jié)節(jié)中,選擇觀察而未手術(shù)的結(jié)節(jié)192個,手術(shù)治療152個,未接受手術(shù)建議的結(jié)節(jié)2個。術(shù)前US-FNAB的細胞標(biāo)本中共檢測到51個結(jié)節(jié)發(fā)生BRAFT1799A突變,其細胞學(xué)分類為36個惡性,11個可疑惡性,4個良性。該51個結(jié)節(jié)術(shù)后病理證實均為PTC。20個發(fā)生RET/PTC1重排,其術(shù)前細胞學(xué)結(jié)果為17個惡性,2個可疑惡性,1個濾泡性腫瘤或可疑濾泡性腫瘤,術(shù)后病理證實均為PTC。3個結(jié)節(jié)發(fā)生RET/PTC3重排,其術(shù)前細胞學(xué)結(jié)果為惡性,術(shù)后病理證實均為PTC。對45個術(shù)前US-FNAB標(biāo)本檢測BRAFT1799A突變陰性而術(shù)后病理證實為P... 

【文章來源】：現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展. 2015,15(16)

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【部分圖文】：

細胞學(xué)診斷惡性涂片(SP×200)

現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展www.shengwuyixue.comProgressinModernBiomedicineVol.15NO.16JUN.2015圖1細胞學(xué)診斷惡性涂片(SP×200)Fig.1Cytologicslideofamalignantspecimen(SP×200)圖2細胞學(xué)診斷良性涂片(SP×200)Fig.2Cytologicslideofbenignspecimen(SP×200)前言甲狀腺癌是內(nèi)分泌系統(tǒng)最常見的一類惡性腫瘤，其發(fā)病率呈逐漸上升趨勢[1，2]。該發(fā)病率的增加主要歸因于甲狀腺乳頭狀癌(papillarythyroidcarcinoma,PTC)的增加，尤其是高分辨超聲的引進，使得甲狀腺乳頭狀微小癌的診斷率顯著上升[1-3]。我院分析統(tǒng)計了近14年來我院就診的690例甲狀腺癌的患病趨勢，其中PTC占81.74%，呈逐年上升趨勢，其它甲狀腺癌遞增不明顯[4]。US-FNAB是目前術(shù)前鑒別甲狀腺結(jié)節(jié)良惡性最可靠的診斷工具，但受一些因素的影響，如穿刺樣本不足(10%-21%)或缺乏特征的細胞形態(tài)學(xué)表現(xiàn)(10%-30%)以及細胞學(xué)本身的局限性等，仍有10%-40%的甲狀腺結(jié)節(jié)不能確診，其中有接近44%是惡性[5，6]。這些未被確診的患者就需要進一步的觀察或重復(fù)穿刺，或進行診斷性甲狀腺手術(shù)，其中有70%-80%接受了不必要的手術(shù)[7]。隨著對分子標(biāo)志物研究的不斷深入，已有國外學(xué)者嘗試將分子標(biāo)志物的檢測應(yīng)用到術(shù)前穿刺中，以此進一步提高甲狀腺結(jié)節(jié)的術(shù)前診斷[8-11]。然而，US-FNAB聯(lián)合分子標(biāo)志物的檢測還未得到大規(guī)模的驗證、普及，分子標(biāo)志物對于最優(yōu)診治方案的指導(dǎo)還未得到充分的認識。為此，我們收集了與我院行甲狀腺術(shù)前US-FNAB的細胞學(xué)標(biāo)本及相應(yīng)結(jié)節(jié)的術(shù)后新鮮組織，以此探討B(tài)RAFT1799A點突變、RET/PTC1及RET/PTC3重排在甲狀腺結(jié)節(jié)細針穿刺標(biāo)本中的表達及其對術(shù)前診斷結(jié)節(jié)良惡性的意義。1材料與方法1.1材料收集2013年7月至2014年8月我院收治的進行甲狀腺

現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展www.shengwuyixue.comProgressinModernBiomedicineVol.15NO.16JUN.2015圖3PCR擴增BRAF基因Fig.3BRAFgenewasanalyzedbyPCR圖4BRAFT1799A點突變Fig.4BRAFT1799Amutation所得CDNA進行PCR擴增。擴增體系25μL，反應(yīng)條件及引物參照前期研究[13]。每組PCR均設(shè)有內(nèi)參及空白對照。④瓊脂糖凝膠電泳及測序：同上(圖5、6、7)。1.3統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS19.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)分析,US-FNAB與US-FNAB聯(lián)合BRAFT1799A點突變、RET/PTC重排兩種甲狀腺結(jié)節(jié)術(shù)前診斷方法的比較采用McNemar配對X2檢驗，BRAFT1799A點突變與患者性別、腫瘤大孝被膜外侵犯、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移之間的相關(guān)性采用獨立X2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。2結(jié)果2.1術(shù)前甲狀腺US-FNAB細胞學(xué)結(jié)果與術(shù)后組織病理類型依據(jù)Bethesda病理分級，細胞學(xué)結(jié)果分為：良性230個；非典型3個；濾泡性腫瘤或可疑濾泡性腫瘤10個；可疑惡性22個；惡性75個；無法診斷或不滿意6個，重復(fù)穿刺后，4個細胞學(xué)結(jié)果為良性，另2個仍無法診斷。(最終細胞學(xué)結(jié)果及對應(yīng)術(shù)后病理類型見圖8)2.2術(shù)前US-FNAB細胞學(xué)標(biāo)本及其對應(yīng)結(jié)節(jié)術(shù)后新鮮組織的基因檢測結(jié)果術(shù)前US-FNAB標(biāo)本中共檢測到51個結(jié)節(jié)發(fā)生BRAFT1799A點突變，其細胞學(xué)分類為36個惡性，11個可疑惡性，4個良性。該51個發(fā)生突變的結(jié)節(jié)術(shù)后病理證實均為PTC。20個發(fā)生RET/PTC1重排，其術(shù)前細胞學(xué)結(jié)果為17個惡性，2個可疑惡性，1個濾泡性腫瘤或可疑濾泡性腫瘤，術(shù)后病理證實均為PTC。3個結(jié)節(jié)發(fā)生RET/PTC3重排，其術(shù)前細胞學(xué)結(jié)果為惡性，術(shù)后病理證實均為PTC。對45個術(shù)前US-FNAB標(biāo)本檢測BRAFT1799A突變陰性而術(shù)后病理證實為PTC的結(jié)節(jié)，將其對應(yīng)結(jié)節(jié)的術(shù)中組織行該基因的檢測，僅有1個結(jié)節(jié)的術(shù)后組織中檢測

【參考文獻】：
期刊論文
[1]甲狀腺乳頭狀癌BRAF基因突變及RET/PTC基因重排與血小板源性生長因子B表達的相關(guān)性研究[J]. 王萍,王顏剛,趙文娟,付浴東,王孌,王芳,趙世華.  中華內(nèi)科雜志. 2012 (12)
[2]山東省沿海與內(nèi)陸甲狀腺癌患病模式變遷[J]. 岳曉燕,王斐,于風(fēng)泉,王萍,王顏剛,趙文娟.  現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2010(04)
[3]青島地區(qū)14年甲狀腺癌患者的臨床特點[J]. 吳琍,王萍,趙世華,趙文娟,潘杰,趙鵬,王顏剛.  山東醫(yī)藥. 2008(28)



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