本文關(guān)鍵詞：熊果酸對EOMA細胞生長影響的實驗研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:通過建立血管瘤內(nèi)皮細胞體外培養(yǎng)模型,利用不同濃度的熊果酸對體外培養(yǎng)的小鼠血管內(nèi)皮瘤細胞(EOMA細胞)進行干預,動態(tài)觀察小鼠血管內(nèi)皮瘤細胞的生長、細胞增殖、凋亡以及血管內(nèi)皮生長因子及其受體(VEGF、VEGFR-2)表達的影響情況,為尋找血管瘤新的治療藥物提供理論依據(jù)。方法:利用小鼠血管內(nèi)皮瘤細胞(EOMA細胞)株進行體外細胞培養(yǎng),將實驗細胞分為B 1組(陰性對照組):添加0.1mlPBS溶液;B 2組:添加0.1ml 10mg/L熊果酸溶液;B 3組:添加0.1ml 20mg/L熊果酸溶液;B 4組(陽性對照組):添加0.1ml 10mg/L普萘洛爾。分別在處理后0h,24h,48h觀察比較各組體外培養(yǎng)的EOMA細胞生長及凋亡的情況。采用HE染色檢測細胞形態(tài)學改變;MTT法檢測細胞增殖情況;流式細胞術(shù)(Annexin V/PI染色法)測定細胞的凋亡情況;用ELISA試驗方法檢測VEGF及VEGFR-2的濃度。所測得的實驗數(shù)據(jù)均使用統(tǒng)計學軟件SPSS20.0描述與分析,定量資料采用均數(shù)及標準差表示,各個時間點上效應指標的比較采用單因素方差分析,組間兩兩比較采用LSD法重復測量資料的組間比較采用重復測量的方差分析,檢驗效能α=0.05,當P0.05時認為差異具有統(tǒng)計學意義。結(jié)果:1.HE染色觀察細胞形態(tài):在干預0h時,B2、B3、B4組與對照組B1相比較,無明顯差異;在干預24h及48h后,B2、B3、B4與對照組B1相比較,細胞生長緩慢,稀疏,聚落生長不明顯,以B3、B4組更甚。2.各組細胞增殖抑制情況:在0h的時候,b1、b2、b3、b4組的光密度值分別是:0.424±0.003、0.422±0.005、0.422±0.008、0.422±0.008,b2、b3、b4組的細胞抑制率為:0.43±0.16%、0.57±0.22%、0.57±0.23%。第24h時各組的光密度值分別是:0.665±0.013、0.621±0.004、0.560±0.024、0.577±0.031,b2、b3、b4組的細胞抑制率分別為:6.62±0.23%、15.71±0.50%、13.28±0.36%。第48h時各組的光密度值分別是:0.879±0.017、0.811±0.032、0.718±0.019、0.745±0.039。b2、b3組、b4組的細胞抑制率分別為:7.78±0.41%、18.31±0.31%、15.21±0.55%。統(tǒng)計分析顯示,在第0h時各組的差異無統(tǒng)計學意義(p0.05)。第24h及48h時,各組的差異具有統(tǒng)計學意義(p0.05)且b2、b3、b4組光密度值均較b1組低,b3、b4較b2低,差異具有統(tǒng)計學意義(p0.05);b3與b4的差異無統(tǒng)計學意義(p0.05)。3.流式細胞術(shù)(annexinv/pi染色法)檢測細胞凋亡率情況:在干預0h時,各細胞組凋亡率分別為:9.606±0.155%、9.828±0.185%、9.778±0.264%、9.746±0.168%。干預后24h,各組細胞凋亡率分別為:11.773±0.412%、14.158±0.408%、17.251±1.324%、17.626±0.466%。干預后48h各組細胞凋亡率分別為:11.390±1.584%、14.946±1.470%、19.886±1.319%、19.971±2.519%。統(tǒng)計分析顯示,在第0h時各組的差異無統(tǒng)計學意義(p0.05)。第24h及48h時,各組的差異具有統(tǒng)計學意義(p0.05);且b2、b3、b4組細胞凋亡率均較b1組高,b3、b4較b2高,差異具有統(tǒng)計學意義(p0.05);b3與b4的差異無統(tǒng)計學意義(p0.05)。4.elisa檢測vegf、vegfr-2濃度情況:在干預0h時,b1、b2、b3、b4組的vegf吸光度值分別是:1.963±0.009、1.957±0.011、1.951±0.007、1.941±0.042,vegf的濃度分別為168.717±0.914、168.096±1.106、167.511±0.741、166.560±4.141。vegfr-2的吸光度值分別是:1.510±0.012、1.506±0.014、1.494±0.020、1.518±0.013。vegfr-2的濃度分別為:2748.299±23.564、2740.891±27.786、2715.728±39.654、2764.186±25.257。在干預24h時,各組的vegf吸光度值分別是:1.952±0.005、1.666±0.008、1.285±0.013、1.264±0.168,vegf的濃度分別為167.659±0.460、139.303±0.788、101.583±1.326、99.519±16.672。vegfr-2的吸光度值分別是:1.492±0.012、1.183±0.012、0.998±0.017、0.989±0.006。vegfr-2的濃度分別為:2712.658±24.758、2093.773±24.508、1724.705±33.030、1705.893±11.665。在干預48h時,各組的vegf吸光度值分別是:1.956±0.007、1.385±0.009、1.187±0.013、1.239±0.153、vegf的濃度分別為168.031±0.716、111.472±0.918、91.905±1.243、97.006±15.155。vegfr-2的吸光度值分別是:1.485±0.020、0.879±0.018、0.707±0.016、0.688±0.020。vegfr-2的濃度分別為:2697.373±39.639、1486.890±36.745、1142.440±32.981、1104.255±41.955。統(tǒng)計分析顯示,在第0h時各組的vegf、vegfr-2的差異無統(tǒng)計學意義(p0.05)。第24h及48h時,各組的差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);且B2、B3、B4組VEGF、VEGFR-2濃度均較B1組低,B3、B4較B2低,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);B3與B4的差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。5.結(jié)果說明藥物干預對體外培養(yǎng)的EOMA細胞具有抑制增殖、促進其凋亡、降低VEGF、VEGFR-2表達的作用,且在48h時比24h時作用更明顯,而在相同時間點熊果酸20mg/L濃度比10mg/L濃度作用更明顯(P0.05),20mg/L熊果酸作用與10mg/L普萘洛爾接近(P0.05)。結(jié)論:1.熊果酸對體外培養(yǎng)的EOMA細胞具有抑制生長、促進凋亡的作用。2.其對EOMA細胞的作用機制可能與其下調(diào)EOMA細胞的VEGF、VEGFR-2的表達水平有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：熊果酸 小鼠血管內(nèi)皮瘤細胞(EOMA細胞) 細胞凋亡 VEGF VEGFR-2
【學位授予單位】：西南醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R732.2
【目錄】：

• 中文摘要4-8
• 英文摘要8-13
• 前言13-14
• 材料與方法14-27
• 結(jié)果27-40
• 討論40-43
• 結(jié)論43-44
• 參考文獻44-47
• 英漢縮略詞對照表47-48
• 致謝48-49
• 熊果酸抗腫瘤機制的研究進展(綜述)49-67
• 參考文獻61-67

【相似文獻】

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 張行行;熊果酸對EOMA細胞生長影響的實驗研究[D];西南醫(yī)科大學;2016年

  本文關(guān)鍵詞：熊果酸對EOMA細胞生長影響的實驗研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：337813