目的探討長(zhǎng)鏈非編碼RNA（long non-coding RNA,LncRNA）LOC100506123對(duì)胰腺癌細(xì)胞增殖及遷移的影響。方法采用實(shí)時(shí)定量PCR（qRT-PCR）技術(shù)檢測(cè)胰腺癌組織及細(xì)胞系（AsPC-1、BxPC-3、Panc-1、CFPAC-1,以正常胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞HPDE為對(duì)照）中LOC100506123的表達(dá)情況。并通過(guò)siRNA技術(shù)下調(diào)LOC100506123表達(dá),構(gòu)建siRNA經(jīng)Lipofectamine 2000^TM脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染細(xì)胞（對(duì)照組為siR-NC,實(shí)驗(yàn)組為siR-1、siR-2）,采用CCK-8、Transwell小室實(shí)驗(yàn)分別檢測(cè)胰腺癌細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移能力。結(jié)果 1LncRNA LOC100506123在胰腺癌組織及細(xì)胞系中表達(dá)顯著升高（P<0.05）。2下調(diào)LOC100506123表達(dá),胰腺癌細(xì)胞的增殖及遷移能力顯著降低（P<0.05）。結(jié)論高表達(dá)的LncRNA LOC100506123能促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞的增殖及遷移。 

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LOC100506123在胰腺癌組織及細(xì)胞系中的表達(dá)

LOC100506123在胰腺癌組織中的表達(dá)顯著高于正常胰腺(P＜0.05，圖1A)。檢測(cè)LOC100506123在細(xì)胞株的表達(dá)情況，結(jié)果表明:LOC100506123在胰腺癌細(xì)胞系A(chǔ)sPC-1、BxPC-3、Panc-1、CFPAC-1中的表達(dá)明顯高于正常胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞系HPDE(P＜0．01)。其中尤以AsPC-1、CFPAC-1更為顯著，分別是正常細(xì)胞的20、18．8倍(圖1B)。2．2胰腺癌細(xì)胞對(duì)siRNA片段的有效攝取及干擾效率在胰腺癌AsPC-1細(xì)胞轉(zhuǎn)染FAM-siRNA后，經(jīng)24h培養(yǎng)換液后在熒光顯微鏡下觀察顯示:細(xì)胞狀態(tài)良好，F(xiàn)AM-siRNA熒光強(qiáng)度高，且均勻分布在細(xì)胞內(nèi)，轉(zhuǎn)染效率約達(dá)90%(圖2)。分別在24、48h收集轉(zhuǎn)染siRNA(NC、siR-1、siR-2、siR-3)的胰腺癌細(xì)胞，提取細(xì)胞總RNA后采用qRT-PCR檢測(cè)LncRNALOC100506123的干擾效率，結(jié)果顯示，siR-1、siR-2干擾效率更為明顯(圖3)。A:在正常胰腺與胰腺癌組織中的表達(dá)a:P＜0．01，與正常胰腺組織比較;B:在正常胰腺細(xì)胞與胰腺癌細(xì)胞中的表達(dá)b:P＜0．01，與HPDE細(xì)胞比較圖1LOC100506123在胰腺癌組織及細(xì)胞系中的表達(dá)A:白光;B:熒光圖2轉(zhuǎn)染FAM-siRNA后24h胰腺細(xì)胞形態(tài)(×100)842第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2017，39(9)http://aammt．tmmu．edu．cn

A:24h;B:48h圖3轉(zhuǎn)染siRNA后不同時(shí)間各組胰腺癌細(xì)胞LncRNALOC100506123的表達(dá)2．3干擾LOC100506123表達(dá)后對(duì)胰腺癌細(xì)胞增殖的影響在胰腺癌細(xì)胞系A(chǔ)sPC-1、CFPAC-1中下調(diào)LOC100506123表達(dá)后，采用CCK-8檢測(cè)細(xì)胞的增殖情況。結(jié)果顯示，AsPC-1、CFPAC-1的細(xì)胞增殖能力明顯減弱(圖4)。a:P＜0．05，b:P＜0.01，與NC組比較A:AsPC-1細(xì)胞;B:CFPAC-1細(xì)胞圖4LOC100506123對(duì)AsPC-1和CFPAC-1細(xì)胞增殖的影響2．4干擾LOC100506123表達(dá)后對(duì)胰腺癌細(xì)胞遷移的影響在胰腺癌細(xì)胞系A(chǔ)sPC-1、CFPAC-1中下調(diào)LOC100506123表達(dá)后，采用Transwell檢測(cè)細(xì)胞的遷移情況。結(jié)果顯示，AsPC-1、CFPAC-1的細(xì)胞遷移能力明顯減弱(圖5)。圖5LOC100506123對(duì)AsPC-1和CFPAC-1細(xì)胞遷移的影響(HE×200)http://aammt．tmmu．edu．cn第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2017，39(9)843

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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