背景和目的:胰腺導(dǎo)管腺癌發(fā)病率逐年上升,5年生存率<5%。對于可切除無轉(zhuǎn)移的患者,手術(shù)并術(shù)后輔助化療是目前最有效的方法,但術(shù)后復(fù)發(fā)率高。周圍神經(jīng)侵犯是胰腺癌標(biāo)志性病理改變之一,在PDAC中PNI的比例高達100%,是術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的主要原因之一。探討胰腺癌周圍神經(jīng)侵犯的相關(guān)機制對其術(shù)后治療及預(yù)防復(fù)發(fā)具有極其重要的意義。本研究探討了GEP100在胰腺癌神經(jīng)侵犯中的作用及相關(guān)機制。材料與方法:首先,利用胰腺癌組織標(biāo)本,檢測了GEP100和神經(jīng)周圍侵犯的相關(guān)性。調(diào)取2013至2017年間浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院肝膽外科行WHIPPLE手術(shù)切除、病例資料完善、病理確診為胰腺導(dǎo)管腺癌的47例病例,免疫組化技術(shù)進行GEP100標(biāo)記染色,并統(tǒng)計學(xué)分析GEP100表達強度和胰腺癌神經(jīng)周圍侵犯的相關(guān)性。其次,利用Western Blot和RT-PCR技術(shù)檢測GEP100蛋白和m RNA在不同胰腺癌細胞株中的表達,選擇出用來實驗的細胞株P(guān)anc-1;并利用sh RNA敲低GEP100在胰腺癌細胞株P(guān)anc-1中的表達,建立胰腺癌細胞（PCs）-小鼠背根神經(jīng)節(jié)（DRG）共同培養(yǎng)模型檢測GEP100對于... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

免疫組化染色:a.正常組織中GEP100弱表達；b.胰腺癌組織中GEP100高

浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文結(jié)果153.2敲低GEP抑制了胰腺癌細胞向小鼠背根神經(jīng)節(jié)的遷移能力3.2.1體外胰腺癌細胞-小鼠DRG共同培養(yǎng)模型的建立。圖2胰腺癌細胞-DRG共同培養(yǎng)體系的建立：A：脊柱組織分離。B：找到DRG。C：分離DRG。D:DRG的培養(yǎng)。E：DRG神經(jīng)纖維的生長。F：腫瘤細胞和DRG共同培養(yǎng)模型，上室為胰腺癌細胞，下室為DRG在基質(zhì)膠中。3.2.2GEP100敲低抑制了胰腺癌細胞向DRG的遷移為了選取實驗用的合適的細胞株，首先我們檢測了不同細胞株中GEP100的表達情況。GEP100有兩個剪切異構(gòu)體，分子量分別為150kDa和120kDa。圖3可見敲低GEP100抑制了胰腺癌細胞Panc-1向DRG的遷移。其中A顯示在不同的細胞株中可以檢測到GEP100的兩個不同的剪切異構(gòu)體的蛋白表達。B顯示GEP100的mRNA也表達于各個細胞株中，而在Panc-1中的表達水平最高。因此，我們選取Panc-1開展后續(xù)的實驗。C顯示GEP100siRNA可以敲降兩個剪切異構(gòu)

浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文 結(jié)果 體的蛋白表達。 為了檢測 GEP100 敲降對于胰腺癌細胞向 DRG 遷移的影響，首先我們確認(rèn)DRG 可以促進 Panc-1 細胞的遷移（如圖 4），D 所示，DRG 可以促進胰腺癌細胞遷移能力提高 36%。而 GEP100siRNA 則抑制 Panc-1 細胞向 DRG 的遷移（E）。


本文編號：3373145