目的:二烯丙基二硫（DADS）是大蒜中脂溶性物質(zhì)的主要成分。研究發(fā)現(xiàn)DADS可以抑制多種腫瘤,并具有低毒性的優(yōu)勢(shì),是一種極具開發(fā)潛力的抗腫瘤藥物。本課題組前期研究證實(shí)了DADS能抑制人胃癌細(xì)胞的增殖,阻滯胃癌細(xì)胞于G2/M期,抑制胃癌細(xì)胞的EMT。硫化氫（H₂S）是繼NO和CO之后,人體內(nèi)第三種重要的內(nèi)源性氣體信使分子。有研究證明,H₂S對(duì)胃粘膜有保護(hù)作用并可以抑制癌癥的生長(zhǎng)。DADS是含硫化合物,可能作為H₂S的供體。因此,我們探討DADS是否通過(guò)產(chǎn)生H₂S抑制胃癌細(xì)胞的生長(zhǎng)并初步研究其機(jī)制。方法:本研究通過(guò)亞甲藍(lán)法硫化氫檢測(cè)試劑盒和熒光探針檢測(cè)試劑盒檢測(cè)各處理組人胃癌SGC-7901細(xì)胞中H₂S含量情況;免疫熒光檢測(cè)H₂S生成關(guān)鍵酶CSE和CBS蛋白在細(xì)胞中的表達(dá)和定位;通過(guò)CCK8、Transwell遷移實(shí)驗(yàn)、Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)、劃痕實(shí)驗(yàn)、流式實(shí)驗(yàn)分別檢測(cè)細(xì)胞增殖、遷移、侵襲、凋亡等方面對(duì)胃癌細(xì)胞的影響;加入CSE抑制劑PPG后,觀察各處理組... 

【文章來(lái)源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁(yè)數(shù)】：84 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

硫化氫試劑盒檢測(cè)不同處理組SGC-7901細(xì)胞中H2S含量情況

22明了DADS能產(chǎn)生H2S，還提示H2S產(chǎn)生的量與DADS濃度有關(guān)。圖3.2熒光探針檢測(cè)不同處理組SGC-7901細(xì)胞中H2S含量情況（10X）3.3不同處理組細(xì)胞形態(tài)學(xué)對(duì)比使用DADS、NaHS分別處理人胃癌SGC-7901細(xì)胞，觀察細(xì)胞形態(tài)變化。如圖3.3所示，Control組、DADS組、NaHS組中細(xì)胞形態(tài)上具有一定的差異。Control

23組中細(xì)胞呈多邊形或者梭形，邊界清楚。DADS組和NaHS組中部分細(xì)胞形態(tài)由多邊形變圓形或者橢圓形。其中DADS組細(xì)胞基本變圓，梭型細(xì)胞基本消失。結(jié)果提示NaHS對(duì)SGC7901細(xì)胞形態(tài)的影響與DADS類似。A:ControlB:DADSC:NaHS圖3.3不同處理組SGC-7901細(xì)胞的形態(tài)學(xué)對(duì)比圖（4X）3.4CSE、CBS在不同細(xì)胞系中的表達(dá)情況據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，在胃癌細(xì)胞中，H2S主要由兩種關(guān)鍵內(nèi)源性酶產(chǎn)生：CSE、CBS，其中胃癌細(xì)胞中主要表達(dá)CSE。為觀察CSE和CBS在胃粘膜上皮細(xì)胞和胃癌細(xì)胞中的表達(dá)情況，我們通過(guò)WesternBlot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)CSE、CBS蛋白在胃黏膜GES-1細(xì)胞、人胃癌SGC-7901細(xì)胞與人胃癌MGC-803細(xì)胞中的表達(dá)。如圖3.4和3.5所示，CSE、CBS蛋白在胃黏膜GES-1細(xì)胞中的表達(dá)相比胃癌SGC-7901細(xì)胞與人胃癌MGC-803細(xì)胞高，而CSE、CBS蛋白在人胃癌SGC-7901細(xì)胞中的表達(dá)相較于人胃癌MGC-803細(xì)胞低。這表明胃癌的發(fā)生發(fā)展可能與內(nèi)源性H2S生成酶CSE、CBS表達(dá)下降有關(guān)。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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