背景:雙香葉酰化是細(xì)胞內(nèi)一種重要的蛋白質(zhì)修飾方式。多種細(xì)胞內(nèi)信號(hào)分子需經(jīng)雙香葉酰化修飾后方能發(fā)揮其在細(xì)胞增殖、分化、遷移及存活等方面的生物學(xué)功能。雙香葉酰化介導(dǎo)的蛋白質(zhì)修飾過(guò)程已被證明在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起重要作用,但目前其促腫瘤作用的機(jī)理及信號(hào)途徑仍不清楚。目的:本課題以胃癌以及三陰性乳腺癌為研究系統(tǒng),著重探討雙香葉酰化信號(hào)對(duì)促癌蛋白YAP/TAZ的調(diào)控作用,確定雙香葉�；�-YAP/TAZ信號(hào)通路對(duì)腫瘤生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移及浸潤(rùn)的促進(jìn)效應(yīng),揭示雙香葉�；�-YAP/TAZ信號(hào)通路激活腫瘤細(xì)胞增殖、遷移及侵襲的內(nèi)在機(jī)制。同時(shí)鑒定胃癌及三陰性乳腺癌診斷和治療的新型分子靶標(biāo),為臨床開(kāi)發(fā)新的靶向治療藥物以及為腫瘤患者預(yù)后預(yù)測(cè)等提供理論依據(jù)。方法:1、用阿托伐他�。ˋtorvastatin,簡(jiǎn)稱(chēng)AT）、雙香葉�；D(zhuǎn)移酶I抑制劑（GGTI-298）處理細(xì)胞以抑制細(xì)胞內(nèi)雙香葉酰化信號(hào),同時(shí)加入香葉基香葉醇（GGOH）以恢復(fù)雙香葉�；盘�(hào)。2、用慢病毒表達(dá)系統(tǒng)在三陰性乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞和胃癌AGS細(xì)胞中構(gòu)建YAP1、TAZ、CYR61、E2F1等基因敲低的細(xì)胞株。3、對(duì)于不同處理組細(xì)胞與不同敲低細(xì)胞株... 

【文章來(lái)源】：江蘇大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】：147 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

Hippo通路示意圖[83]

雙香葉酰化信號(hào)在腫瘤細(xì)胞增殖和遷移中的作用機(jī)制研究 括肺癌[133-138]、乳腺癌[119]、大腸癌[139]、肝癌[140]、胃癌[141]、胰腺癌[142]和神經(jīng)膠質(zhì)瘤[143]等。多種結(jié)果表明 YAP/TAZ 表達(dá)升高或核定位增強(qiáng)與腫瘤惡性程度（如組織學(xué)分級(jí)高、TNM 分期晚、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移）呈正相關(guān)[133-136]，YAP/TAZ 基因表達(dá)量高或活性強(qiáng)的癌癥患者，腫瘤轉(zhuǎn)移率高，預(yù)后差[139,141]。

江蘇大學(xué)博士學(xué)位論文15（6）逆轉(zhuǎn)錄PCR：檢測(cè)不同藥物處理組細(xì)胞或不同細(xì)胞株內(nèi)相關(guān)基因表達(dá)差異。（7）實(shí)時(shí)熒光定量PCR：檢測(cè)不同細(xì)胞株和不同處理組細(xì)胞之間相關(guān)基因的mRNA表達(dá)水平差異。（8）WesternBlotting：檢測(cè)不同細(xì)胞株和不同處理組細(xì)胞之間蛋白水平差異。（9）免疫熒光：觀察和檢測(cè)不同細(xì)胞株與不同處理組細(xì)胞內(nèi)相關(guān)基因表達(dá)及亞細(xì)胞定位情況。（10）活細(xì)胞染色：觀察和檢測(cè)不同細(xì)胞株以及不同處理組細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞核與有絲分裂狀態(tài)。（11）免疫組化：檢測(cè)胃賁門(mén)癌和癌旁組織CYR61的表達(dá)。（12）基因芯片：檢測(cè)AT和GGOH處理后細(xì)胞內(nèi)各基因的變化水平。1.4.3實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（1）驗(yàn)證雙香葉�；盘�(hào)對(duì)YAP/TAZ通路的調(diào)控作用圖1.5雙香葉酰化信號(hào)對(duì)YAP/TAZ通路的調(diào)控作用

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]非酒精性脂肪肝的患病率及與代謝綜合征關(guān)系的研究[J]. 王凌,沈振海,徐勤,陸昀.  中國(guó)療養(yǎng)醫(yī)學(xué). 2010(05)



本文編號(hào)：3366374