嵌合抗原受體（Chimeric antigen receptors,CAR）由單鏈抗體的可變區(qū)和免疫細(xì)胞信號(hào)分子組成。將CAR以基因工程的方法表達(dá)于免疫細(xì)胞表面再過(guò)繼輸注的治療方式稱為CAR療法,CAR療法是一種新型的過(guò)繼性免疫效應(yīng)細(xì)胞治療（ACT）策略,涉及到重新定向免疫細(xì)胞、誘導(dǎo)其攻擊腫瘤細(xì)胞的過(guò)程。Ad5F11p-GFP載體是一種在Ad5（5型腺病毒）基礎(chǔ)上建立的,攜帶報(bào)告基因GFP和Ad11p靶向性基因的新型重組腺病毒。本研究用Ad5F11p-GFP以不同的MOI（感染復(fù)數(shù)）感染原代NK細(xì)胞、CIK細(xì)胞以及免疫細(xì)胞系NK-92細(xì)胞;用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)熒光陽(yáng)性細(xì)胞比例,進(jìn)行熒光顯微鏡照相,用臺(tái)盼藍(lán)染色計(jì)數(shù)分析細(xì)胞的增殖,并用LDH法檢測(cè)NK-92對(duì)白血病細(xì)胞系K562和HL-60的殺傷作用。結(jié)果表明:25MOI的Ad5F11p-GFP對(duì)NK-92的感染效率可以達(dá)到大約90%,200MOI Ad5F11p-GFP對(duì)CIK感染效率不到40%,Ad5F11p-GFP對(duì)原代NK細(xì)胞的感染效率更低;同一MOI Ad5F11p-GFP在48h和96h感染效率基本不變;感染Ad5F11p-GFP... 

【文章來(lái)源】：天津大學(xué)天津市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

CAR的基本結(jié)構(gòu)

圖 2-1 骨架質(zhì)粒 AdEasy-1/F1lp 的結(jié)構(gòu)Figure 2-1 The struction of plasmid AdEasy - 1 / F1lp2.2.2 細(xì)胞的獲得與培養(yǎng)1.Ficoll 法分離人外周血單個(gè)核細(xì)胞

圖 2-2 原代免疫細(xì)胞的鑒定。Fig 2-2 Identification of primary immune cells.A：CIK 細(xì)胞 B：原代 NK圖2-3為Ad5F11p-GFP 48h時(shí)不同MOIs感染三種免疫細(xì)胞所測(cè)的感染-92 最敏感，10MOI Ad5F11p-GFP 對(duì) NK-92 細(xì)胞的感染效率是 68.9%，2


本文編號(hào)：3356803