嵌合抗原受體（Chimeric antigen receptors,CAR）由單鏈抗體的可變區(qū)和免疫細胞信號分子組成。將CAR以基因工程的方法表達于免疫細胞表面再過繼輸注的治療方式稱為CAR療法,CAR療法是一種新型的過繼性免疫效應細胞治療（ACT）策略,涉及到重新定向免疫細胞、誘導其攻擊腫瘤細胞的過程。Ad5F11p-GFP載體是一種在Ad5（5型腺病毒）基礎上建立的,攜帶報告基因GFP和Ad11p靶向性基因的新型重組腺病毒。本研究用Ad5F11p-GFP以不同的MOI（感染復數(shù)）感染原代NK細胞、CIK細胞以及免疫細胞系NK-92細胞;用流式細胞術檢測熒光陽性細胞比例,進行熒光顯微鏡照相,用臺盼藍染色計數(shù)分析細胞的增殖,并用LDH法檢測NK-92對白血病細胞系K562和HL-60的殺傷作用。結果表明:25MOI的Ad5F11p-GFP對NK-92的感染效率可以達到大約90%,200MOI Ad5F11p-GFP對CIK感染效率不到40%,Ad5F11p-GFP對原代NK細胞的感染效率更低;同一MOI Ad5F11p-GFP在48h和96h感染效率基本不變;感染Ad5F11p-GFP... 

【文章來源】：天津大學天津市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

CAR的基本結構

圖 2-1 骨架質(zhì)粒 AdEasy-1/F1lp 的結構Figure 2-1 The struction of plasmid AdEasy - 1 / F1lp2.2.2 細胞的獲得與培養(yǎng)1.Ficoll 法分離人外周血單個核細胞

圖 2-2 原代免疫細胞的鑒定。Fig 2-2 Identification of primary immune cells.A：CIK 細胞 B：原代 NK圖2-3為Ad5F11p-GFP 48h時不同MOIs感染三種免疫細胞所測的感染-92 最敏感，10MOI Ad5F11p-GFP 對 NK-92 細胞的感染效率是 68.9%，2


本文編號：3356803