自1993年,Ambro等人在線蟲(chóng)體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了miRNA的存在,并將研究成果發(fā)表在《Cell》等權(quán)威雜志上之后,針對(duì)miRNA的功能和作用的研究也越來(lái)越多。毫無(wú)疑問(wèn),miRNA作為調(diào)控基因表達(dá)的小分子,參與調(diào)控了各種腫瘤的發(fā)生發(fā)展。已有研究指出,人類(lèi)基因組中大約50%的miRNA定位于染色體脆性位點(diǎn)序列中,這意味著miRNA的轉(zhuǎn)錄相對(duì)容易出現(xiàn)異常的表達(dá)缺失或擴(kuò)增,從而在細(xì)胞癌變過(guò)程中產(chǎn)生必不可少的關(guān)聯(lián)性。結(jié)直腸癌（colorectal cancer,CRC）是發(fā)生在直腸或結(jié)腸的惡性腫瘤之一,已經(jīng)成為了當(dāng)前全球范圍內(nèi)最常見(jiàn)的消化系統(tǒng)惡性腫瘤。其發(fā)生發(fā)展的進(jìn)程也是受到了多種基因的協(xié)同調(diào)控,并且在發(fā)病的各個(gè)階段其參與調(diào)控的miRNA種類(lèi)和強(qiáng)度也有所差異,形成了一個(gè)長(zhǎng)期而復(fù)雜的調(diào)控過(guò)程。而探明結(jié)直腸癌的個(gè)體基因表達(dá)差異,是開(kāi)展個(gè)體化治療的前提條件。近年來(lái),大量的研究已經(jīng)揭示,結(jié)直腸癌患者的腫瘤組織和血清中均存在著多種特異性miRNA,在結(jié)直腸癌的診斷、預(yù)后判斷和靶向治療等方面均具有巨大價(jià)值。已有研究證實(shí),血清中miRNA-141的差異化表達(dá)能夠作為診斷結(jié)直腸癌發(fā)生肝轉(zhuǎn)移的早期評(píng)價(jià)指標(biāo),并且血清m... 

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

結(jié)直腸癌組織中miRNA-141的表達(dá)

3.2.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)本研究采用統(tǒng)計(jì)軟件 SSPS18.0 統(tǒng)計(jì)和分析原始數(shù)據(jù)，數(shù)據(jù)均以 MEAN的形式表示，各組的差異水平通過(guò) t 檢驗(yàn)（student’s t text）和卡方檢驗(yàn)進(jìn)行分P＜0.05 被認(rèn)為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.3.1 重組質(zhì)粒的轉(zhuǎn)染效率由于用于轉(zhuǎn)染人結(jié)直腸癌 HT29 細(xì)胞的重組質(zhì)粒中包含 GFP 基因，因熒光倒置顯微鏡下可見(jiàn)綠色熒光。通過(guò)計(jì)算明視野與熒光視野的細(xì)胞數(shù)量，對(duì)轉(zhuǎn)染效率進(jìn)行計(jì)算。統(tǒng)計(jì)結(jié)果如圖 3.1 顯示，GFP 標(biāo)記的 miRNA-141 過(guò)質(zhì)粒及空載質(zhì)粒的轉(zhuǎn)染效率良好，兩組人結(jié)直腸癌 HT29 細(xì)胞的轉(zhuǎn)染率>70%，表明可以用于后續(xù)研究。

第 3 章 miR-141 對(duì)人結(jié)直腸癌細(xì)胞 HT29 生物學(xué)行為 作用組過(guò)表達(dá)質(zhì)粒對(duì) HT29 細(xì)胞中 miRNA-141 表達(dá)水平的作用 miRNA-141 過(guò)表達(dá)質(zhì)粒穩(wěn)定轉(zhuǎn)染 HT29 細(xì)胞成功后，提取 采用實(shí)時(shí)定量 PCR 定量檢測(cè) miR-141 的水平。結(jié)果如圖 3.2穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的 HT29 細(xì)胞中 miR-141 的表達(dá)水平出現(xiàn)了顯著的增相比，p<0.001），表明 miRNA-141 過(guò)表達(dá)質(zhì)粒在轉(zhuǎn)染 HT29達(dá)，可以用于后續(xù)的功能研究。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Differential expression of serum miR-126,miR-141 and miR-21 as novel biomarkers for early detection of liver metastasis in colorectal cancer[J]. Jie Yin,Zhigang Bai,Jianning Song,Yun Yang,Jin Wang,Wei Han,Jun Zhang,Hua Meng,Xuemei Ma,Yao Yang,Tingting Wang,Weirong Li,Zhongtao Zhang.  Chinese Journal of Cancer Research. 2014(01)
[2]結(jié)腸癌治療概況[J]. 劉見(jiàn)榮,侯風(fēng)剛.  遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2014(02)



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