目的缺氧是很多腫瘤組織共有的表現(xiàn),其具有誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞代謝改變,促進(jìn)血管新生,增強(qiáng)浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移及產(chǎn)生耐藥等特性。在血液系統(tǒng)惡性疾病中,同樣可以發(fā)現(xiàn)瘤細(xì)胞處于一個(gè)缺氧微環(huán)境。缺氧可以激活重要的轉(zhuǎn)錄因子缺氧誘導(dǎo)因子-1 α（hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α）表達(dá),是導(dǎo)致多發(fā)性骨髓瘤（mutiple myeloma,MM）血管新生能力增強(qiáng)的重要因素,而血管新生與MM疾病進(jìn)展和預(yù)后密切相關(guān)。藤黃酸是藤黃中提取的有效成分,在眾多實(shí)體瘤體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)中均顯示出良好的抗腫瘤效果。本研究主要探討藤黃酸是否可以抑制缺氧時(shí)MM的HIF-1 α及其下游血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）表達(dá),并探討相關(guān)具體分子機(jī)制。方法通過(guò)對(duì)藤黃酸、漢黃芩和姜黃素三種中藥有效成分進(jìn)行CCK-8細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn),選取對(duì)MM細(xì)胞無(wú)明顯細(xì)胞毒性濃度,在缺氧條件下干預(yù)MM細(xì)胞,通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清VEGF表達(dá)含量變化,實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)不同缺氧時(shí)間對(duì)MM細(xì)胞VEGF基因表達(dá)變化、藥物對(duì)缺氧培養(yǎng)MM細(xì)胞HIF-1 α... 

【文章來(lái)源】：東南大學(xué)江蘇省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
縮略詞表
第一章 前言
    1 多發(fā)性骨髓瘤與缺氧
    2 藤黃酸抗腫瘤的機(jī)制
    3 本課題的研究任務(wù)
第二章 文獻(xiàn)綜述 缺氧與HIF-1 α的研究進(jìn)展
    1 缺氧與血管新生
    2 HIF-1 α的激活及對(duì)下有基因的誘導(dǎo)
    3 HIF-1 α在非腫瘤疾病中的作用
    4 HIF-1 α與腫瘤
    5 MM中缺氧與HIF-1 α作用
第三章 材料與方法
    1 主要實(shí)驗(yàn)試劑
    2 主要儀器耗材
    3 實(shí)驗(yàn)室器械準(zhǔn)備
    4 試驗(yàn)方法
        4.1 細(xì)胞系和培養(yǎng)條件
        4.2 瑞氏染色
        4.3 細(xì)胞增殖-毒性試驗(yàn)
        4.4 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)
        4.5 逆轉(zhuǎn)錄PCR檢測(cè)
        4.6 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)
        4.7 Western Blot方法檢測(cè)細(xì)胞各蛋白表達(dá)水平
        4.8 裸鼠皮下移植瘤模型的建立
        4.9 腫瘤生長(zhǎng)測(cè)量和抑制率
        4.10 病理組織學(xué)檢測(cè)
        4.11 免疫熒光染色
        4.12 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
第四章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    1 MM細(xì)胞株瑞氏染色形態(tài)觀察
    2 CCK-8法檢測(cè)三種中藥成分不同濃度時(shí)對(duì)MM細(xì)胞株影響
    3 缺氧對(duì)MM細(xì)胞VEGF mRNA表達(dá)水平的影響
    4 三種中藥成分對(duì)MM細(xì)胞常氧和缺氧下VEGF mRNA影響
    5 常氧與缺氧下藤黃酸對(duì)MM細(xì)胞VEGF分泌的影響
    6 常氧與缺氧下藤黃酸對(duì)U266細(xì)胞VEGF蛋白表達(dá)的影響
    7 常氧與缺氧下藤黃酸對(duì)U266細(xì)胞HIF-1 αmRNA表達(dá)的影響
    8 常氧與缺氧下藤黃酸對(duì)U266細(xì)胞HIF-1 α蛋白表達(dá)的影響
    9 免疫熒光染色觀察藤黃酸對(duì)U266細(xì)胞在缺氧下HIF-1 α的影響
    10 PI3K/Akt/mTOR通路涉及缺氧下HIF-1 α/VEGF蛋白的合成
    11 PI3K/Akt/mTOR通路抑制劑對(duì)HIF-1 α/VEGF表達(dá)的影響
    12 PI3K/Akt/mTOR通路對(duì)HIF-1 α/VEGF mRNA影響
    13 藤黃酸對(duì)U266細(xì)胞裸鼠體內(nèi)成瘤的影響
    14 CD31,VEGF和HIF-1 α在裸鼠移植瘤中的表達(dá)情況
第五章 討論
    1 多發(fā)性骨髓瘤與缺氧
    2 藤黃酸對(duì)HIF-1 α/VEGF的抑制作用
    3 藤黃酸下調(diào)HIF-1 α/VEGF的作用機(jī)制
第六章 總結(jié)與展望
    1 總結(jié)
    2 展望
參考文獻(xiàn)
博士階段發(fā)表文章
個(gè)人簡(jiǎn)介
致謝



本文編號(hào)：3330607