目的肺癌每年的確診率和死亡率在常見癌癥中都是最高的。肺癌轉(zhuǎn)移被認(rèn)為是造成肺癌患者復(fù)發(fā)甚至死亡的主要原因。已有大量研究結(jié)果表明上皮來源腫瘤通過上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）獲得浸潤周圍組織向遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移的能力。近年來雙硫侖（Disulfiram,DSF）因其廣譜抗癌效果而受到廣泛的關(guān)注。基于以上背景,本研究擬探討DSF對TGF-β誘導(dǎo)的非小細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞株發(fā)生EMT的影響,并對其作用機(jī)制初步分析。方法本研究以非小細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞株為研究對象,采用濃度不同的雙硫侖及TGF-β處理細(xì)胞后開展如下實驗:采用MTT實驗檢測DSF細(xì)胞毒性;采用劃痕遷移實驗和Transwell遷移實驗檢測細(xì)胞發(fā)生EMT后的遷移能力改變;采用Transwell小室侵襲實驗檢測細(xì)胞發(fā)生EMT后的侵襲能力的改變;通過Western blot檢測細(xì)胞中EMT相關(guān)蛋白（E-cadherin、Vimentin、N-cadherin）的表達(dá)改變,并用Western blot檢測Snail、ERK1/2、p-ERK1/2的表達(dá)來分析DSF通過什么機(jī)制影響EMT過程... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

EMT相關(guān)細(xì)胞表型改變[41]

第1章緒論8統(tǒng)中的腫瘤細(xì)胞表現(xiàn)出間充質(zhì)/部分間充質(zhì)特征，這能幫助腫瘤細(xì)胞擴(kuò)散（b）；腫瘤細(xì)胞擴(kuò)散到遠(yuǎn)處組織后，可能通過逆轉(zhuǎn)EMT，即激活MET程序幫助腫瘤細(xì)胞在新位置定居(c)。圖1.1EMT相關(guān)細(xì)胞表型改變[41]圖1.2腫瘤轉(zhuǎn)移過程上皮-間質(zhì)表型的啟動[41]

第4章實驗結(jié)果與討論25第4章實驗結(jié)果與討論4.1MTT檢測DSF對肺癌A549的細(xì)胞毒性作用為確定DSF抗腫瘤的作用并非是通過對腫瘤細(xì)胞增殖的抑制，在不同濃度DSF（1μM、2μM、5μM、10μM、20μM、40μM、80μM）處理A549細(xì)胞后，用MTT實驗分析細(xì)胞生存率。結(jié)果如圖4.1所示：A549細(xì)胞給藥24小時之后，1μM至20μM實驗組中，與空白對照組細(xì)胞相比無明顯差異，DSF對細(xì)胞生存率沒有明顯抑制作用，20μM時細(xì)胞生存率為97%，40μM時細(xì)胞生存率下降為77%，在80μM時細(xì)胞的生存率為65%，因此，后續(xù)實驗中將用1μM、2μM、5μM、10μM和20μM濃度DSF進(jìn)行檢測。圖4.1DSF對肺癌A549細(xì)胞生存率的影響（*P<0.05，***P<0.001）

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3325083