目的肺癌每年的確診率和死亡率在常見癌癥中都是最高的。肺癌轉移被認為是造成肺癌患者復發(fā)甚至死亡的主要原因。已有大量研究結果表明上皮來源腫瘤通過上皮-間質轉化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）獲得浸潤周圍組織向遠端轉移的能力。近年來雙硫侖（Disulfiram,DSF）因其廣譜抗癌效果而受到廣泛的關注�；谝陨媳尘�,本研究擬探討DSF對TGF-β誘導的非小細胞肺癌A549細胞株發(fā)生EMT的影響,并對其作用機制初步分析。方法本研究以非小細胞肺癌A549細胞株為研究對象,采用濃度不同的雙硫侖及TGF-β處理細胞后開展如下實驗:采用MTT實驗檢測DSF細胞毒性;采用劃痕遷移實驗和Transwell遷移實驗檢測細胞發(fā)生EMT后的遷移能力改變;采用Transwell小室侵襲實驗檢測細胞發(fā)生EMT后的侵襲能力的改變;通過Western blot檢測細胞中EMT相關蛋白（E-cadherin、Vimentin、N-cadherin）的表達改變,并用Western blot檢測Snail、ERK1/2、p-ERK1/2的表達來分析DSF通過什么機制影響EMT過程... 

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EMT相關細胞表型改變[41]

第1章緒論8統(tǒng)中的腫瘤細胞表現(xiàn)出間充質/部分間充質特征，這能幫助腫瘤細胞擴散（b）；腫瘤細胞擴散到遠處組織后，可能通過逆轉EMT，即激活MET程序幫助腫瘤細胞在新位置定居(c)。圖1.1EMT相關細胞表型改變[41]圖1.2腫瘤轉移過程上皮-間質表型的啟動[41]

第4章實驗結果與討論25第4章實驗結果與討論4.1MTT檢測DSF對肺癌A549的細胞毒性作用為確定DSF抗腫瘤的作用并非是通過對腫瘤細胞增殖的抑制，在不同濃度DSF（1μM、2μM、5μM、10μM、20μM、40μM、80μM）處理A549細胞后，用MTT實驗分析細胞生存率。結果如圖4.1所示：A549細胞給藥24小時之后，1μM至20μM實驗組中，與空白對照組細胞相比無明顯差異，DSF對細胞生存率沒有明顯抑制作用，20μM時細胞生存率為97%，40μM時細胞生存率下降為77%，在80μM時細胞的生存率為65%，因此，后續(xù)實驗中將用1μM、2μM、5μM、10μM和20μM濃度DSF進行檢測。圖4.1DSF對肺癌A549細胞生存率的影響（*P<0.05，***P<0.001）

【參考文獻】：
期刊論文
[1]肺癌的流行病學及治療現(xiàn)狀[J]. 姚曉軍,劉倫旭.  現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學. 2014(08)
[2]肺癌家族聚集性的系統(tǒng)評價[J]. 谷俊東,滑峰,鐘殿勝,陳軍,劉紅雨,周清華.  中國肺癌雜志. 2010(03)
[3]非小細胞肺癌外科治療現(xiàn)狀和進展[J]. 支修益,陳東紅.  首都醫(yī)科大學學報. 2009(03)
[4]非小細胞肺癌內科治療的現(xiàn)狀[J]. 郭其森.  中華腫瘤防治雜志. 2009(10)
[5]TGF-β信號轉導與腫瘤[J]. 王守立.  中國腫瘤臨床. 2004(08)



本文編號：3325083