目的:1.探討SMAC類似物L(fēng)CL161聯(lián)合Caspase酶抑制劑（Caspase inhibitors,CI）對乳腺癌耐藥細(xì)胞的影響;2.釆用TMT聯(lián)合質(zhì)譜蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù),篩選乳腺癌耐藥細(xì)胞經(jīng)LCL161聯(lián)合CI作用下響應(yīng)的差異蛋白,并通過采用生物信息學(xué)分析,探討差異蛋白之間的相互調(diào)控關(guān)系及其參與的信號通路。3.篩選目的差異蛋白,利用平行反應(yīng)檢測技術(shù)驗證目的蛋白,鑒定LCL161聯(lián)合CI促進(jìn)乳腺癌耐藥細(xì)胞凋亡的靶標(biāo)蛋白,研究經(jīng)過LCL161聯(lián)合CI處理過后的乳腺癌耐藥細(xì)胞發(fā)生了哪些變化,探索LCL161聯(lián)合CI促進(jìn)乳腺癌耐藥細(xì)胞凋亡的可能發(fā)生機(jī)制,為后續(xù)治療乳腺癌耐藥和藥物靶向標(biāo)志物提供研究線索。方法:1.CCK-8法檢測LCL161聯(lián)合CI對人乳腺癌耐藥細(xì)胞MCF-7/DDP存活率的影響。2.采用同位素相對標(biāo)記與絕對定量（Tandem Mass Tag,TMT）技術(shù),篩選經(jīng)LCL161聯(lián)合CI處理后對誘導(dǎo)乳腺癌耐藥細(xì)胞凋亡相關(guān)的差異表達(dá)蛋白,并利用生物信息學(xué)數(shù)據(jù)庫對所有差異蛋白進(jìn)行分析。3.篩選與LCL161聯(lián)合CI誘導(dǎo)乳腺癌耐藥細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白并利用平行反應(yīng)監(jiān)測（parallel... 

【文章來源】：蚌埠醫(yī)學(xué)院安徽省

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

(A)肽段的質(zhì)量精度分布(B)肽段的長度分布

19圖2-2(A)不同比較組中差異表達(dá)蛋白數(shù)量分布柱形圖(B)差異表達(dá)蛋白定量火山圖Figure2-1(A)Histogramofthenumberofdifferentiallyexpressedproteinsindifferentcomparisongroups(B)Quantitativevolcanomapofdifferentiallyexpressedproteins2.2.3差異蛋白GO分析在GO分析中,分子過程條目中主要富集于綁定結(jié)合(52%)、催化活性(20%)和分子功能調(diào)節(jié)劑(6%)；在生物過程條目里,主要富集于細(xì)胞過程(14%)、單一生物過程(13%)和生物調(diào)節(jié)(12%)；在細(xì)胞組成條目里,富集于前3位的分別是細(xì)胞(26%)、細(xì)胞器(24%)和膜(14%)。我們發(fā)現(xiàn)其中差異蛋白Q12834參與了多個生物過程以及具有多種分子功能。由此可見,差異蛋白參與了LCL161聯(lián)合CI在促進(jìn)乳腺癌耐藥細(xì)胞凋亡中且較多的生物過程且具有多種分子功能。見圖2-3。B.

21圖2-4（A）差異蛋白的KEGG通路顯著性富集分析Figure2-4（A）AnalysisofKEGGpathwayenrichmentofdifferentialproteins


本文編號：3309156