新城疫病毒（Newcastle Disease Virus,NDV）是一種具有較強(qiáng)復(fù)制能力并且可以特異性識(shí)別并殺傷腫瘤細(xì)胞的禽類病毒。臨床實(shí)驗(yàn)已經(jīng)證實(shí)新城疫病毒對(duì)人類危害很小,只有國(guó)外少數(shù)媒體報(bào)道過(guò)人類感染新城疫病毒產(chǎn)生輕度淋巴腺炎和結(jié)膜炎等癥狀,但很快就會(huì)自愈。除此之外,我們發(fā)現(xiàn)NDV除了可以感染腫瘤病毒產(chǎn)生直接殺傷效果之外,還可以通過(guò)對(duì)腫瘤細(xì)胞免疫原性的影響或者誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng)從而達(dá)到殺傷腫瘤細(xì)胞的效果。隨著科學(xué)界對(duì)溶瘤病毒治療腫瘤研究的進(jìn)一步深入,NDV病毒已經(jīng)成為當(dāng)下治療腫瘤的熱門領(lǐng)域。原發(fā)性肝癌是我國(guó)三大高發(fā)惡性腫瘤之一,每年約有12萬(wàn)人死于肝癌。原發(fā)性肝癌的特點(diǎn)是早期難以發(fā)現(xiàn),發(fā)現(xiàn)多為中晚期,治療手段主要為手術(shù)切除、肝動(dòng)脈結(jié)扎、射頻術(shù)。此外放療、化療等傳統(tǒng)療法為輔助手段,這些治療手段收到的效果均不甚理想,所以在肝癌的治療中,應(yīng)該突破傳統(tǒng)思維,這時(shí)候溶瘤病毒治療癌癥的手段也開始走進(jìn)科學(xué)家的視線。溶瘤病毒治療癌癥避免了化療對(duì)人體本身造成的傷害,有效的殺傷肝癌細(xì)胞,但是這種療法的缺點(diǎn)就是對(duì)于不同基因型的同一種腫瘤細(xì)胞,NDV病毒的殺傷力也是各不相同的,這在臨床應(yīng)用的時(shí)候成為一... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

NDV病毒粒子示意圖

19圖 2.1 根據(jù)逆轉(zhuǎn)錄試劑最佳溫度選擇0）逆轉(zhuǎn)錄得到 cDNA 后，PCR 擴(kuò)增需要的 2 個(gè)目的基因，使用 PCR 反應(yīng)(Thermo）反應(yīng)體系：表 1.2 PCR 反應(yīng)體系溫度：

圖 2.2 PCR 反應(yīng)條件（可根據(jù)引物以及最佳退火溫度設(shè)定） PCR 過(guò)后，將產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳，首先取燒杯洗凈BE 溶液，配制 1.5%的瓊脂糖膠，然后放入微波爐加熱至反復(fù) 3 次后靜置。，溫度降低至 70℃附近時(shí)，添加 1.5ulEB（溴化乙錠），搖槽中，直到頁(yè)面達(dá)到刻度時(shí)為準(zhǔn)，如果有氣泡則用槍尖輕后，將洗凈晾干的梳子插入槽中后靜置。膠體凝固，取出梳子，將膠體拿出放置在電泳槽中，左右偏，緩緩倒入 0.5%的 TBE 溶液至沒過(guò)膠體即可。ARK、樣品的順序點(diǎn)樣，點(diǎn)樣過(guò)程中注意避開孔間膠，防源，設(shè)置電泳儀為 100min、100V 結(jié)束后，將膠體放入凝結(jié)果與討論


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