目的:研究黑色素瘤分化相關(guān)基因-7（melanoma differentiation associated gene 7,MDA-7）/IL-24對Burkitt淋巴瘤細(xì)胞的促分化作用并探討其作用機(jī)制。方法:構(gòu)建穩(wěn)定過表達(dá)MDA-7/IL-24的人Burkitt淋巴瘤Raji和Daudi細(xì)胞株,MTS法檢測穩(wěn)定轉(zhuǎn)染MDA-7/IL-24對Raji和Daudi細(xì)胞活力的影響;Transwell小室實(shí)驗(yàn)檢測轉(zhuǎn)染MDA-7/IL-24對Raji和Daudi細(xì)胞侵襲和遷移能力的影響;流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡水平及免疫表型;Western blotting技術(shù)檢測轉(zhuǎn)染MDA-7/IL-24對Raji和Daudi細(xì)胞表達(dá)分化相關(guān)蛋白Myb、BLIMP1及BCL-6的影響;建立裸鼠Raji細(xì)胞移植瘤模型,檢測在體內(nèi)環(huán)境中穩(wěn)定轉(zhuǎn)染MDA-7/IL-24對Raji細(xì)胞生物活性的影響。結(jié)果:過表達(dá)MDA-7/IL-24的Raji和Daudi細(xì)胞其增殖（P<0.05）、侵襲（P<0.01）及遷移（P<0.01）能力均明顯下降,但凋亡細(xì)胞無明顯增加（P>0.05）,表達(dá)CD45及CD13... 

【文章來源】：中國腫瘤生物治療雜志. 2017,24(08)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

轉(zhuǎn)染MDA-7/IL-24對Raji和Daudi細(xì)胞形態(tài)及免疫表型的影響（×1000）

中國腫瘤生物治療雜志,2017,24(8)*P<0.05,**P<0.01vscontrolgroupA:EffectofMDA-7/IL-24onmigrationandinvasionabilityofRajiandDaudicellswasinvestigatedbytranswellandmatrigelassay.Thenumberofmigratedandinvadedwascalculated;B:WesternblottingassaysofthelevelsofMMP2andMMP9proteinexpressioninRajiandDaudicells.圖3轉(zhuǎn)染MDA-7/IL-24降低Raji和Daudi細(xì)胞的侵襲和遷移活性(×200)Fig.3InhibittingeffectofMDA-7/IL-24onmigrationandinvasionpotencyofRajianddaudicells(×200)侵襲性是腫瘤細(xì)胞的主要惡性表型之一，轉(zhuǎn)染MDA-7/IL-24后，Raji和Daudi細(xì)胞的侵襲和遷移能力顯著降低，細(xì)胞表達(dá)與腫瘤細(xì)胞侵襲密切相關(guān)的MMP2及MMP9分子水平均明顯下降，這也提示轉(zhuǎn)染MDA-7/IL-24后，Raji和Daudi細(xì)胞的惡性表型減弱。那么，MDA-7/IL-24是通過何種機(jī)制誘導(dǎo)Raji和Daudi細(xì)胞分化呢？有研究表明[11-16]，BLIMP1和BCL-6分別是促進(jìn)和抑制B淋巴細(xì)胞終末分化的關(guān)鍵調(diào)控因子，BCL-6的過度表達(dá)和BLIMP1的表達(dá)缺失是B細(xì)胞淋巴瘤發(fā)病及進(jìn)展的始動因素之一。而Myb是近年來發(fā)現(xiàn)的一種與B細(xì)胞分化密切相關(guān)的上游轉(zhuǎn)錄因子，其可通過抑制BLIMP1表達(dá)，促進(jìn)BCL-6表達(dá)，抑制B細(xì)胞向終末方向分化。Myb的過度表達(dá)在Burkitt淋巴瘤的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要的促進(jìn)作用[17-20]。本研究發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染MDA-7/IL-24后，Ra-ji和Daudi細(xì)胞表達(dá)Myb及BCL-6的水平明顯減低，而BLIMP1表達(dá)水平明顯增高。Chen等[15]也報(bào)道，Raji和Daudi細(xì)胞中Myb的表達(dá)水平較正常淋巴細(xì)胞明顯增高，如果通過siRNA敲低Myb的表達(dá)水平，則可明顯促進(jìn)Raji和Daudi細(xì)胞向終末B細(xì)胞方向分化，同時(shí)細(xì)胞表達(dá)BLIMP1表達(dá)水平明顯增高，而BCL-6的表達(dá)水平明顯減低，因此我們認(rèn)為，轉(zhuǎn)染

馬鳴,等.MDA-7/IL-24對Burkitt淋巴瘤細(xì)胞的誘導(dǎo)分化作用*P<0.05,**P<0.01vscontrolgroup圖4轉(zhuǎn)染MDA-7/IL-24對Raji和Daudi細(xì)胞株表達(dá)Myb、Blimp1及Bcl-6水平的影響Fig.4EffectoftransfectedMDA-7/IL-24ontheexpressionofMyb,Blimp1andBcl-6inRajianddaudicells**P<0.01圖5轉(zhuǎn)染MDA-7/IL-24抑制Raji細(xì)胞裸鼠移植瘤的生長Fig.5InhibitingeffectoftransfectedMDA-7/IL-24onthegrowthofRajicellsinvivo本研究還構(gòu)建了Raji細(xì)胞裸鼠移植瘤模型，觀察了穩(wěn)定轉(zhuǎn)染空載體或MDA-7/IL-24的Raji細(xì)胞在體內(nèi)環(huán)境中的生長狀態(tài)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染MDA-7/IL-24的Raji細(xì)胞在體內(nèi)環(huán)境中生長速度明顯減慢，瘤質(zhì)量明顯減輕。瘤組織細(xì)胞免疫表型的變化與體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。同時(shí)瘤組織表達(dá)MDA-7/IL-24及BLIMP1的水平明顯增高，而Myb及BCL-6的表達(dá)水平明顯減低。這提示，在體內(nèi)環(huán)境中MDA-7/IL-24依然可通過誘導(dǎo)分化作用抑制Burkitt淋巴瘤細(xì)胞的增殖活性�？傊�，本研究發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)染MDA-7/IL-24可促進(jìn)Burkitt淋巴瘤細(xì)胞向終末方向分化，提示MDA-7/IL-24具有成為腫瘤分化誘導(dǎo)劑的潛力，因此可能在今后Burkitt淋巴瘤的臨床治療方面具有廣泛的應(yīng)用空間。**P<0.01vsvector圖6在體內(nèi)環(huán)境中，轉(zhuǎn)染MDA-7/IL-24對Raji細(xì)胞免疫表型的影響Fig.6EffectoftransfectedMDA-7/IL-24onimmunophenotypeofRajicellsinvivo·862·

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Mda-7/IL-24對B細(xì)胞淋巴瘤化療敏感性的影響[J]. 馬鳴,楊興肖,王雪曉,趙連梅,劉麗華,單保恩.  免疫學(xué)雜志. 2016(02)



本文編號：3302915