在腫瘤免疫療法中,Treg細(xì)胞是免疫抑制細(xì)胞。通常,對(duì)Treg細(xì)胞進(jìn)行化學(xué)免疫治療的主要策略是通過(guò)化療藥消除Treg細(xì)胞。然而,研究發(fā)現(xiàn),死亡的Treg細(xì)胞仍能通過(guò)核苷腺苷途徑發(fā)揮免疫抑制作用。為了改善免疫抑制,提高化療敏感性,我們?cè)O(shè)計(jì)了一個(gè)納米系統(tǒng)遞送化學(xué)治療劑和免疫抑制劑,實(shí)現(xiàn)免疫化療的級(jí)聯(lián)增效。合成的化療藥姜黃素類(lèi)似物（CA-1）被α-乳清蛋白（α-LA）包裹,Treg細(xì)胞上表面蛋白特異性抗體（mAb,免疫治療劑）通過(guò)基質(zhì)金屬蛋白酶響應(yīng)肽（P）與載藥蛋白相連。可裂解肽響應(yīng)基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP2）后,將CA-1@α-LA-P-mAb納米顆粒分離為CA-1@α-LA和抗體mAb兩部分,抗體通過(guò)Treg細(xì)胞特異性受體神經(jīng)粘蛋白-1（Nrp-1）靶向Treg細(xì)胞,胞吞作用使載藥蛋白進(jìn)入癌細(xì)胞。乳清蛋白響應(yīng)細(xì)胞內(nèi)谷胱甘肽（GSH）裂解釋放CA-1,進(jìn)而引發(fā)線(xiàn)粒體介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡�？傊�,本文將化療藥物和免疫調(diào)節(jié)劑分別遞送至不同的靶細(xì)胞內(nèi),并對(duì)其響應(yīng)特性、抗血管生成能力及抗腫瘤活性等進(jìn)行了系統(tǒng)研究。具體研究?jī)?nèi)容包括以下幾方面:1.CA-1@α-LA-P-mAb的制備與表征首先以2-吡啶甲醛和環(huán)... 

【文章來(lái)源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：79 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．１?ＣＡ－ｌ＠ａ－ＬＡ－Ｐ－ｍＡｂ納米系統(tǒng)的合成及作用機(jī)制示意圖??Ｆｉｇ．?１．１?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｉｌｌｕｓｔｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?ＣＡ－ｌ＠ａ－ＬＡ－Ｐ?

?第一章ＣＡ－ｌ＠ａ－ＬＡ－Ｐ－ｍＡｂ納米系統(tǒng)的構(gòu)建與表征???３．２投料比的優(yōu)化??３．２．１?ＣＡ－１的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制??將系列標(biāo)準(zhǔn)溶液在３２５ｎｍ處的吸光度收集，然后用所得吸光度數(shù)值繪制ＣＡ－１??的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，得到線(xiàn)性回歸方程為Ａ＝０．０４５９ｃ－０．００９７，?Ｒ２＝０．９９９９，圖１．２證明了??在（０？８０）?ｐｇ／ｍＬ濃度范圍下，ＣＡ－１的吸光度和濃度呈現(xiàn)良好的線(xiàn)性相關(guān)性，??通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)求得ＣＡ－１的含量。??３＿?Ａ＝０．０４５９ｃ－０．００９７??Ｒ２＝０．９９９９?ｙ’??ｉ２：?ｚ??■ｅ?７??ｓ?．?ｙ??Ｘ）??＂１－??０－??Ｉ?１?ｌ?１?ｌ?１?ｌ?１?Ｉ?１??０?２０?４０?６０?８０??Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（?ｊ．ｉｇ／ｍｌ）??圖１．２?ＣＡ－１的紫外標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)??Ｆｉｇ．?１．２?Ｔｈｅ?ＵＶ－ｖｉｓ?ｓｔａｎｄａｒｄ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ＣＡ－１??３．２．２?ＣＡ－１包封率的測(cè)定??通過(guò)“２．２．１所述實(shí)驗(yàn)方法制備ＣＡ－ｌ＠ａ－ＬＡ，然后根據(jù)“２．２．２所述試驗(yàn)方法??測(cè)得ＣＡ－１的包封率為７８％左右，載藥量為１５．３％左右。??３．２．３藥物與載體比例的優(yōu)化??通過(guò)“實(shí)驗(yàn)方法２．１．２”來(lái)確定ＣＡ－１的最佳投入量，結(jié)果如表１．３所示。隨??著ＣＡ－１投入量增大，ＣＡ－ｌ＠ａ－ＬＡ的粒徑相應(yīng)的増大，并且電位也逐漸變負(fù)。??考慮到不僅要控制最終納米制劑的粒徑在１００？２００?ｎｍ之間，減少藥物浪費(fèi)及節(jié)??約成本，最終確定ＣＡ－１與ａ－ＬＡ的投料比為１：３。??１０??

粒子的影響??Ｔａｂｌｅ?１．３?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ＣＡ－１?ｗｉｔｈ?Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?Ｉｎｐｕｔｓ?ｏｎ?ＣＡ＠ａ－ＬＡ?Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ??＾?ｈ３?Ｕ２?ｈｉ??評(píng)價(jià)指??粒徑（ｎｍ）?４５?６０?７５??電位（ｍＶ）?－１４．３?－８．３２?－５．１２??包封率（％）?７５．５３?６０．２０?５３．１２??３．３姜黃素類(lèi)似物的表征??３．３．１?ＣＡ－１的核磁表征??合成的ＣＡ－１，通過(guò)１ＨＮＭＲ與１２ＣＮＭＲ表征其結(jié)構(gòu)。如圖１．４Ａ所示，ＣＡ－１??的１ＨＮＭＲ?（３００ＭＨｚ，ＣＤＣ１３）。結(jié)果為？？?＇ＨＮＭＲ?（ＣＤＣ１３，?３００?ＭＨｚ）?Ｓ?（ｐｐｍ）：??８．６９７（ｍ，?２Ｈ，?ａｒｏｍ），?７．６７３?（ｍ，?４Ｈ，?ａｒｏｍ），?７．４４２?（ｓ，?２Ｈ，?－ＣＨ＝），?７．２０９?（ｍ，?２Ｈ，??ａｒｏｍ）；?３．３０１?（ｔ，?Ｊ＝６．３Ｈｚ，?４Ｈ，?－ＣＨ２ＣＣＨ２－），?１．８６６?（ｑ，?Ｊ＝６．３Ｈｚ，?２Ｈ，?－Ｃ－ＣＨ２－Ｃ－）；??從圖?１．３Ｂ?可以看出，１２ＣＮＭＲ?（ＣＤＣ１３，?７５ＭＨｚ），?５?（ｐｐｍ）：?２２．２５，?２８．４７，?１２２．４７，??１２７．１１，１３４．０４，１３６．１５，?１４０．１２，１４９．５３，１５５．５２，１９１．３９．核磁共振譜圖的分析??結(jié)果和ＣＡ－１的結(jié)構(gòu)相一致，說(shuō)明成功合成了?ＣＡ－１單體分子。??Ａ???Ｂ???＾?５Ｅ?￡２?—?Ｃ??，Ｈ＾ＭＲ?－?ｆ?ＦＦＴｌｆｆＴ?１７??Ｉ?ＩＩＩ?Ｉ?Ｉ??ｏｒｘｒｏ?ｆ?＂｜??ｈｉｌｌ??！?ｉ

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]A multi-functional nanoplatform for efficacy tumor theranostic applications[J]. Jinjin Shi,Hongling Zhang,Zhaoyang Chen,Lihua Xu,Zhenzhong Zhang.  Asian Journal of Pharmaceutical Sciences. 2017(03)

博士論文
[1]姜黃素類(lèi)似物的合成及抗腫瘤活性研究[D]. 韋星船.廣東工業(yè)大學(xué) 2011



本文編號(hào)：3289507