目的:檢測MAP9（microtube-associated protein 9）基因在EB病毒（Epstein Barr virus,EBV）感染的胃癌陰性和陽性細胞株中蛋白表達高低,探究MAP9表達的差異對EBV感染的胃癌陰性和陽性細胞增殖、凋亡產(chǎn)生可能的影響,為確定EBV在感染腫瘤發(fā)生中的作用,對進一步研究MAP9對EBV感染相關(guān)腫瘤的發(fā)生調(diào)控和發(fā)展機制提供了新的研究依據(jù)和實驗思路。方法:采用蛋白免疫印跡（Western blotting）方法檢測MAP9在EBV胃癌陽性細胞株和EBV胃癌陰性細胞株中的表達水平;用小干擾RNA（si RNA）干擾陽性胃癌細胞系GT38中MAP9基因的表達,Western blotting方法檢測干擾效果和細胞周期素依賴性激酶（CDK6、CDK2、p21、p27）在干擾MAP9前后的表達變化情況,細胞增殖活性和毒性實驗（cell counting kit-8）檢測細胞增殖的變化,細胞流式技術(shù)檢測干擾前后的細胞周期、細胞凋亡。采用質(zhì)粒轉(zhuǎn)染方法建立MAP9過表達EBV陰性胃癌AGS細胞株模型。實驗數(shù)據(jù)采用合適的統(tǒng)計學方法進行處理和分析。結(jié)果:（1）EB... 

【文章來源】：青島大學山東省

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

Westernblotting分析MAP9在EBV陽性和陰性細胞系中蛋白表達水平

結(jié)果13圖2Westernblotting檢測siRNA轉(zhuǎn)染效果Fig.2WesternblottinganalysistheeffectofsiRNAtransfection(圖A：Westernblotting結(jié)果；圖B：灰度值分析)3干擾MAP9能夠促進CDK6、CDK2表達上調(diào)敲除MAP9基因后，用Westernblotting方法檢測到在EBV陽性胃癌細胞GT38中周期蛋白CDK6和CDK2表達水平均升高（圖3A）。結(jié)果分析差異均具有統(tǒng)計學意義(F=79.350、102.800，P<0.001)。由此表明，在EBV陽性胃癌細胞中，下調(diào)MAP9的表達能促進CDK6、CDK2蛋白的表達。灰度值分析柱狀圖是三次獨立實驗的統(tǒng)計結(jié)果。圖3干擾MAP9能夠促進CDK6、CDK2蛋白的表達Fig.3InterferencewithMAP9canpromotetheexpressionofCDK6,CDK2protein(圖A：Westernblotting結(jié)果；圖B：灰度值分析)

結(jié)果13圖2Westernblotting檢測siRNA轉(zhuǎn)染效果Fig.2WesternblottinganalysistheeffectofsiRNAtransfection(圖A：Westernblotting結(jié)果；圖B：灰度值分析)3干擾MAP9能夠促進CDK6、CDK2表達上調(diào)敲除MAP9基因后，用Westernblotting方法檢測到在EBV陽性胃癌細胞GT38中周期蛋白CDK6和CDK2表達水平均升高（圖3A）。結(jié)果分析差異均具有統(tǒng)計學意義(F=79.350、102.800，P<0.001)。由此表明，在EBV陽性胃癌細胞中，下調(diào)MAP9的表達能促進CDK6、CDK2蛋白的表達�；叶戎捣治鲋鶢顖D是三次獨立實驗的統(tǒng)計結(jié)果。圖3干擾MAP9能夠促進CDK6、CDK2蛋白的表達Fig.3InterferencewithMAP9canpromotetheexpressionofCDK6,CDK2protein(圖A：Westernblotting結(jié)果；圖B：灰度值分析)

【參考文獻】：
期刊論文
[1]MAP9對EB病毒陽性胃癌細胞生物學行為影響[J]. 孫菁陽,肖華,潘曉雯,劉雯,張忠廣.  青島大學學報(醫(yī)學版). 2020(04)
[2]Inhibitory effect of Polo-like kinase 1 depletion on mitosis and apoptosis of gastric cancer cells[J]. Xue-Hua Chen Ying Qu Xiao-Qing Zhang Qu Cai Bing-Ya Liu Zheng-Gang Zhu,Department of Surgery,Shanghai Institute of Digestive Surgery,Ruijin Hospital,Medical School of Shanghai Jiao Tong University,Shanghai 200025,ChinaBin Lan,Department of Surgical Oncology,the First Affiliated Hospital,Fujian Medical University,Fuzhou 350005,Fujian Province,China.  World Journal of Gastroenterology. 2006(01)

碩士論文
[1]EB病毒對胃癌中Caveolin-1表達的調(diào)控作用和機制研究[D]. 賀薈靜.青島大學 2019
[2]EBV相關(guān)胃癌中EBV對MAP9表達影響的研究[D]. 肖華.青島大學 2018
[3]靶向敲除EB病毒潛伏膜蛋白1（LMP1）編碼基因重組慢病毒的構(gòu)建和應用[D]. 匡曉晶.青島大學 2017



本文編號：3287812