目的研究鞘氨醇激酶1（SphK1）和間隙連接蛋白43（Cx43）在結(jié)直腸癌中的表達(dá)及其與臨床病理特征、患者預(yù)后的關(guān)系,探討其在結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展中的作用及其可能的分子機(jī)制。方法⑴采用免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)92例結(jié)直腸癌及對(duì)應(yīng)癌旁正常組織中SphK1和Cx43的蛋白表達(dá)情況,并分析二者表達(dá)與患者臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系;用CD34/PAS雙染檢測(cè)結(jié)直腸癌組織中VM的存在情況,并分析VM形成與患者臨床病理特征和預(yù)后的關(guān)系,及與SphK1、Cx43的相關(guān)性;用Western Blotting檢測(cè)40例結(jié)直腸癌及其癌旁正常組織中SphK1和Cx43的蛋白表達(dá)水平,進(jìn)一步確認(rèn)其在結(jié)直腸癌中的表達(dá)情況。⑵體外常規(guī)培養(yǎng)人結(jié)腸癌HT-29、HCT116及SW620細(xì)胞株,采用Western Blotting方法檢測(cè)三株細(xì)胞的SphK1蛋白表達(dá)情況,選取低表達(dá)SphK1的細(xì)胞株進(jìn)行過(guò)表達(dá)SphK1慢病毒轉(zhuǎn)染。通過(guò)慢病毒感染方法使低表達(dá)SphK1細(xì)胞株高表達(dá)SphK1,嘌呤霉素篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染株,Western Blotting驗(yàn)證轉(zhuǎn)染效果。為驗(yàn)證過(guò)表達(dá)SphK1對(duì)細(xì)胞功能的影響,采用MTT法和克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)... 

【文章來(lái)源】：廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】：124 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)

SphK1 通過(guò) Cx43 調(diào)節(jié) VM 生成促進(jìn)結(jié)腸癌侵襲轉(zhuǎn)移 2018 屆博士學(xué)位論文結(jié) 果1.1 結(jié)直腸癌組織中 SphK1 蛋白呈高表達(dá)并與腫瘤惡性程度有關(guān)WB 結(jié)果顯示（見(jiàn)表 1-1、圖 1-1），40 例標(biāo)本中，SphK1 在所有結(jié)腸癌組織中均見(jiàn)有蛋白表達(dá)，而癌旁正常黏膜組織中可見(jiàn)蛋白表達(dá)缺失（11例），SphK1 在癌組織中的陽(yáng)性率明顯高于癌旁組織，且其表達(dá)水平均較癌組織明顯降低，結(jié)腸癌組織和癌旁正常粘膜組織中 SphK1 蛋白相對(duì)表達(dá)水平分別為 0.70±0.19 和 0.32±0.14（t=10.300，P=0.000）。表 1-1 結(jié)腸癌及癌旁正常黏膜組織中 SphK1 蛋白的表達(dá)Table 1-1 Expression of SphK1 protein in carcinoma and adjacent normal epithelium specimens部位 總例數(shù) 陽(yáng)性例數(shù) 陽(yáng)性率 χ2值 P 值 蛋白相對(duì)表達(dá)量 t 值 P 值癌組織 40 40 100% 12.754 0.000 0.70±0.19 10.300 0.000癌旁粘膜 40 29 36.21% 0.32±0.14

SphK1 通過(guò) Cx43 調(diào)節(jié) VM 生成促進(jìn)結(jié)腸癌侵襲轉(zhuǎn)移 2018 屆博士學(xué)位論文免疫組化檢測(cè) SphK1 的表達(dá)情況（見(jiàn)圖 1-2）：結(jié)直腸癌組織和癌旁正常黏膜組織中 SphK1 主要表達(dá)于細(xì)胞質(zhì)，陽(yáng)性表達(dá)呈均勻淡黃-棕黃色，其陽(yáng)性表達(dá)率分別為 85.87%（79/92）和 33.70%（31/92），癌組織SphK1 陽(yáng) 性 率 明 顯 高 于 癌 旁 正 常 粘 膜 組 織 ， 差 異 有 統(tǒng) 計(jì) 學(xué) 意 義（χ2=52.081，P=0.000）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
[1]SphK1基因沉默對(duì)結(jié)腸癌RKO細(xì)胞化療敏感性的影響[D]. 覃琳.廣西醫(yī)科大學(xué) 2017
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[3]鞘氨醇激酶-1激活黏著斑激酶通路影響結(jié)腸癌的發(fā)生、發(fā)展[D]. 蘇穎潔.廣西醫(yī)科大學(xué) 2012



本文編號(hào)：3279032