目的探討血卟啉衍生物（Hematoporphyrin Derivative,HPD）介導(dǎo)的630nm激光對人肺腺癌A549細(xì)胞裸鼠移植瘤的影響及作用機(jī)制,為臨床光動力治療（Photodynamic Therapy,PDT）提供理論依據(jù)。方法建立肺腺癌A549細(xì)胞裸鼠皮下移植瘤模型24只,待移植瘤平均體積達(dá)到100-150mm³后隨機(jī)分成4組,即空白對照組（無光敏劑無光照）、光敏劑組（只注射光敏劑而無光照）、光照組（無光敏劑只630nm光照）和PDT組（注射光敏劑后630nm光照）,分別作相應(yīng)處理。PDT采用低劑量多次照射的方式,即以10mg/kg劑量在瘤體內(nèi)注射光敏劑,從腫瘤的三個方向分三點(diǎn)式注射盡量讓其均勻分布,避光4小時后,用波長630nm、功率密度80mw/cm²,光圈直徑5cm的激光照射10分鐘。用游標(biāo)卡尺測量并記錄瘤體長短徑并計(jì)算體積,2周后處死裸鼠剝?nèi)∧[瘤標(biāo)本。（1）繪制腫瘤生長曲線,比較各組移植瘤體積生長變化并計(jì)算腫瘤生長抑制率;剝?nèi)〉哪[瘤標(biāo)本分別進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn):（2）腫瘤組織切片經(jīng)蘇木精-伊紅（Hematoxylin-eosin... 

【文章來源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

HPD-PDT對裸鼠皮下移植瘤體積的影響

結(jié)果36圖2HE染色觀察各組腫瘤組織形態(tài)結(jié)構(gòu)（×400）a.空白對照組b.單純光敏劑組c.單純光照組d.HPD-PDT組3.TUNEL染色結(jié)果鏡下觀察經(jīng)Tunel染色的四組裸鼠移植瘤組織切片，均可見凋亡細(xì)胞，且凋亡細(xì)胞散在于瘤細(xì)胞之間，胞漿減少，核內(nèi)可見棕黃色顆粒物質(zhì)，呈核碎裂、核固縮或核溶解現(xiàn)象。與其它三組相比較，光動力治療組凋亡陽性細(xì)胞明顯增多，凋亡現(xiàn)象最為明顯（圖3）。每組TUNEL切片選取5個陽性細(xì)胞數(shù)量最多的高倍視野計(jì)算凋亡指數(shù)，即凋亡細(xì)胞占視野中所有細(xì)胞的百分比。對照組、單純光敏劑組、單純光照組和PDT組的細(xì)胞凋亡指數(shù)分別為6%、6.3%、5%和29.7%。PDT組明顯高于對照組、單純光敏劑組和單純光照組(P<0.05)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

青島大學(xué)碩士學(xué)位論文37圖3TUNEL染色觀察各組細(xì)胞凋亡情況(×400)a.空白對照組b.單純光敏劑組c.單純光照組d.HPD-PDT組注:圖中紅色箭頭為凋亡細(xì)胞4.檢測光動力治療后裸鼠移植瘤組織內(nèi)Bax,Bcl-2,VEGF和HIF-1αmRNA表達(dá)水平與對照組、單純光敏劑組和單純光照組相比，HPD-PDT組BaxmRNA相對表達(dá)量明顯增多，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。Bcl-2、VEGF和HIF-1αmRNA的相對表達(dá)量明顯下降,與其他三組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。然而,其它三組之間Bax,Bcl-2,VEGF以及HIF-1α的mRNA表達(dá)水平無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(表6，圖4)

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碩士論文
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本文編號：3277661