胰腺癌（Pancreatic cancer）是世界范圍內(nèi)最惡性的疾病之一。胰腺癌早期,多數(shù)患者無明顯癥狀或體征,直到腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移到其他器官后發(fā)展為晚期才被診斷出來。因此,尋找胰腺癌發(fā)生發(fā)展、早期診斷及預(yù)后相關(guān)的新的生物學(xué)指標(biāo),對于早期發(fā)現(xiàn)胰腺癌并改善胰腺癌患者的預(yù)后具有重要意義。隨著基因組和轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)的進(jìn)步,鑒定出許多新型非蛋白編碼轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,在這些大量非蛋白質(zhì)編碼轉(zhuǎn)錄物中,長鏈非編碼RNA（lncRNA）是一類新型的非蛋白質(zhì)編碼轉(zhuǎn)錄物,長度超過200個核苷酸,在多種病理生理過程中具有重要的調(diào)節(jié)作用。研究發(fā)現(xiàn),TUG1是一種新型的長鏈非編碼RNA,長度為7.1-kb,位于染色體22q12,首次發(fā)現(xiàn)被認(rèn)為是一種新型的視網(wǎng)膜非編碼RNA,為各種惡性腫瘤中的關(guān)鍵致癌基因。隨著對TUG1研究增多,TUG1在多種腫瘤中被發(fā)現(xiàn),然而目前在胰腺癌中TUG1的研究仍處于起步階段,在胰腺癌發(fā)生發(fā)展中作用機(jī)制尚不明確,有待進(jìn)一步闡釋。miR-299-3p是miRNAs的一種,目前國內(nèi)外文獻(xiàn)對其有較少報道。有研究表明,miR-299-3p在骨肉瘤組織中表達(dá)下調(diào),與腫瘤細(xì)胞增殖、凋亡以及化療等有關(guān)。生物信息... 

【文章來源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：122 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１－１?ｑＲＴ－ＰＣＲ檢測胰腺癌組織和癌旁正常組織（ｎ＝３１）及正常組織（ｎ＝８）中ＴＵＧｌ表達(dá)??７尺平，＊Ｐ＜０．０５??

?第一部分ＴＵＧ１和ｍｉＲ－２９９－３ｐ在胰腺癌中的表達(dá)及臨床意義研究???Ｉ?＾￣￣－￣￣Ｉ??＜〇?６－，?Ｉ?１??曰?■■??？?２－?？？？?■土－??？?參魯?■■??ＣＣ?〇Ｊ??，?，???Ｎｏｒｍａｌ?Ａｄｊａｃｅｎｔ?Ｔｕｍｏｒ??圖１－１?ｑＲＴ－ＰＣＲ檢測胰腺癌組織和癌旁正常組織（ｎ＝３１）及正常組織（ｎ＝８）中ＴＵＧｌ表達(dá)??７尺平，＊Ｐ＜０．０５??Ｆｉｇｕｒｅ?１－１?ｑＲＴ－ＰＣＲ?ｗａｓ?ｕｓｅｄ?ｔｏ?ｄｅｔｅｃｔ?ｔｈｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ＴＵＧｌ?ｉｎ?ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ?ｃａｎｃｅｒ?ｔｉｓｓｕｅｓ，??ａｄｊａｃｅｎｔ?ｔｉｓｓｕｅｓ?（ｎ?＝?３１）?ａｎｄ?ｎｏｒｍａｌ?ｔｉｓｓｕｅｓ?（ｎ?＝?８），?＜?０．０５．??４．２?ＴＵＧｌ在胰腺癌惡性等級（ＴＮＭ分期）中的表達(dá)??為探討胰腺癌不同分期中的ＴＵＧｌ表達(dá)水平，檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與Ｉ＋ＩＩ期胰??腺癌患者相比，丨ＩＩ＋ＩＶ期胰腺癌患者癌組織中ＴＵＧ?１的表達(dá)顯著增加，表明ＴＵＧ?１??的表達(dá)可能與腫瘤的ＴＮＭ分期有關(guān)系（Ｐ＜０．〇５）結(jié)果見圖１－２。??６－｜?｜?＂?１??－?？？？？？??（Ｄ??＞??？?—??４－??—?？？??卜?■?Ｊ??＞?２－?ｍ９??０）??０Ｊ?１?？？?１?????Ｓｔａｇｅ１／２?Ｓｔａｇｅ３／４??圖１－２ＴＵＧ１在胰腺癌惡性等級（ＴＮＭ分期）中的表達(dá)，＊Ｐ＜〇．〇５??Ｆｉｇｕｒｅ?１－２?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ＴＵＧｌ?ｉｎ?ｍａｌｉｇｎａｎｔ?ｇｒ

?第二部分?ＴＵＧ１和ｍｉＲ－２９９－３ｐ在胰腺癌細(xì)胞中的功能研究???將重組慢病毒載體質(zhì)粒（ｐｌｅｎｔｉ－ｓｈ－ＴＵＧｌ、ｐｌｅｎｔｉ－ａｎｔｉ－ｍｉＲ－２９９－３ｐ）與包裝質(zhì)??粒共轉(zhuǎn)染２９３Ｔ細(xì)胞后，觀察細(xì)胞熒光表達(dá)情況，如圖２－９所示，９５％細(xì)胞表現(xiàn)??有綠色熒光，表明慢病毒包裝成功。收集病毒，經(jīng)濃縮后進(jìn)行對重組慢病毒進(jìn)??行滴度測定，經(jīng)測定ＬＶ－ｓｈ－ＴＵＧｌ、ＬＶ－ａｎｔｉ－ｍｉＲ－２９９－３ｐ病毒滴定值為５．２７ｘｌ〇８??和６．３５ｘｌ〇８ＴＵ／ｍＬ，二者滴度之間沒有顯著性差異。??ＬＶ－ｓｈ－ＴＵＧ１?ＬＶ－ａｎｔｉ－ｍｉＲ－２９９－３ｐ??．??Ｂｒｉｇｈｔ?＿晷：。繼滅顏Ａ＇?．?：?．孤忒??ＧＦＰ｜＾ｇ｜＾＾??圖２－９重組慢病毒載體和包裝質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染２９３Ｔ細(xì)胞（１０〇ｘ）??Ｆｉｇｕｒｅ?２－９?２９３Ｔ?ｃｅｌｌｓ?ｗｅｒｅ?ｃｏ－ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ?ｌｅｎｔｉｖｉｍｓ?ｖｅｃｔｏｒ?ａｎｄ?ｐａｃｋａｇｉｎｇ??ｐｌａｓｍｉｄｓ?（１０〇ｘ）．??４．４穩(wěn)定細(xì)胞系的構(gòu)建??用重組慢病毒ＬＶ－ｓｈ－ＴＵＧｌ感染ＰＡＮＣ－１和ＢＸＰＣ－３細(xì)胞，得到ｓｈ－ＴＵＧｌ??細(xì)胞，然后用ＬＶ－ａｎｔｉ－ｍｉＲ－２９９－３ｐ感染ｓｈ－ＴＵＧｌ細(xì)胞，得到??ｓｈ－ＴＵＧｌ＋ａｎｔｉ－ｍｉＲ－２９９－３ｐ細(xì)胞，于顯微鏡下觀察細(xì)胞中熒光表達(dá)情況，結(jié)果如??圖２－１０所示，９０％細(xì)胞中有綠色熒光表現(xiàn)，說明重組慢病毒感染效率較高，所??感染得到的細(xì)胞可以用于后續(xù)功能分析。??４４??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3271563