研究背景:乳腺癌是一種常見的女性惡性腫瘤,是全球第二大導致女性惡性腫瘤患者死亡的疾病。乳腺癌的診斷和治療盡管不斷取得進展,但并未整體生存率得到顯著提高,主要原因是乳腺癌容易產(chǎn)生遠處轉(zhuǎn)移。臨床試驗表明,骨是乳腺癌最常見的遠處轉(zhuǎn)移器官,約70%的乳腺癌患者在自然病程中會發(fā)生骨轉(zhuǎn)移。乳腺癌骨轉(zhuǎn)移發(fā)生后,由于骨結(jié)構的破壞增加,容易發(fā)生骨骼相關不良事件,嚴重影響患者的生活質(zhì)量。更為嚴重的是,乳腺癌一旦轉(zhuǎn)移到骨,就無法治愈。一項正在進行的臨床研究表明,維生素D缺乏是乳腺癌骨轉(zhuǎn)移的常見危險因素,而維生素D水平正常者發(fā)生骨轉(zhuǎn)移的概率顯著降低。然而,活性維生素D缺乏在乳腺癌發(fā)生和骨轉(zhuǎn)移發(fā)生發(fā)展中的作用機制未見報道。研究目的:1)明確活性維生素D在抑制乳腺癌細胞生長和骨轉(zhuǎn)移中的作用;2)明確活性維生素D經(jīng)Bmi-1介導在抑制乳腺癌移植瘤生長和骨轉(zhuǎn)移中的作用;3)揭示活性維生素D在抑制乳腺癌發(fā)生和骨轉(zhuǎn)移的作用機制,為活性維生素D用于臨床防治乳腺癌及其骨轉(zhuǎn)移提供實驗和理論依據(jù)。研究方法:使用鼠源乳腺癌TM40D細胞株通過外源性1,25（OH）₂D₃處理,采用CCK-... 

【文章來源】：南京醫(yī)科大學江蘇省

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

三組小鼠乳腺癌TM40D造模產(chǎn)生骨骼轉(zhuǎn)移病理檢查圖例（200×）

圖 5. X 線和微 CT 檢測脛骨溶骨性骨破壞圖例X 線和微 CT 檢測顯示，三組小鼠脛骨中均有溶骨性破壞（乳腺癌細胞TM40D 移植成功），溶骨性面積：脛骨內(nèi)生長成瘤面積 Cyp27b1-/-BCBM 對照組> Cyp27b1-/-+l,25(OH)2D3干預組> WT BCBM 組。5. 1,25(OH)2D3通過抑制乳腺癌細胞誘導破骨細胞骨吸收降低其溶骨性骨破壞為了明確l,25(OH)2D3抑制乳腺癌細胞溶骨性骨破壞作用是否與其抑制乳腺癌細胞誘導的破骨細胞增殖活化促進骨吸收有關，我們使用TRAP組織化學染色觀察了TRAP陽性細胞在溶骨性病變區(qū)域的數(shù)目變化。結(jié)果顯示：與WT乳腺癌骨轉(zhuǎn)移對照組小鼠相比，TRAP陽性細胞數(shù)在Cyp27b1-/-乳腺癌骨轉(zhuǎn)移對照組顯著增加；與Cyp27b1-/-對照組相比，Cyp27b1-/-+l,25(OH)2D3干預組的破骨細胞數(shù)顯著減少(圖6A & B)。這些結(jié)果說明1,25(OH)2D3能夠通過抑制乳腺癌細胞誘導的破骨細胞增殖活化促進骨吸收而降低其溶骨性骨破壞。A

南京醫(yī)科大學博士學位論文34圖6. 三組溶骨性病變區(qū)域的破骨細胞染色圖例（200×）(A)三組溶骨性病變區(qū)域的破骨細胞染色結(jié)果顯微圖像。(B)三組破骨細胞染色結(jié)果統(tǒng)計圖。***：P <0.001，與WT對照組相比。###：P <0.001，與Cyp27b1-/-對照組相比。6. 1,25(OH)2D3體內(nèi)外能夠明顯下調(diào)Bmi-1在乳癌細胞中的表達為了明確l,25(OH)2D3抑制乳腺癌骨轉(zhuǎn)移后的生長成瘤和溶骨性骨破壞是否與其下調(diào)Bmi-1在乳癌細胞中的表達有關，我們利用Western blot方法比較分析了有或者無10-8M l,25(OH)2D3處理的培養(yǎng)72h的TM40D細胞及WT、Cyp27b1-/-乳腺癌骨轉(zhuǎn)移對照組和Cyp27b1-/-+l,25(OH)2D3干預組骨內(nèi)瘤組織樣本中Bmi-1蛋白表達水平的變化。結(jié)果顯示：Bmi-1蛋白表達水平在l,25(OH)2D3處理的TM40D中(圖7)及在Cyp27b1-/-+l,25(OH)2D3干預組樣本中均較對照組顯著下調(diào)，而在Cyp27b1-/-乳腺癌骨轉(zhuǎn)移對照組顯著上調(diào)(圖8)。這些體內(nèi)外結(jié)果說明l,25(OH)2D3能夠下調(diào)Bmi-1在乳癌骨轉(zhuǎn)移組織中的表達。圖7. l,25(OH)2D3下調(diào)Bmi-1在乳癌細胞中?

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3262639