目的:觀察環(huán)狀RNA circ-Foxo3在食管鱗癌（ESCC）中的表達(dá)水平及意義,探討其對(duì)ESCC細(xì)胞增殖、凋亡、放射敏感性的影響。方法:采用q RT-PCR法檢測(cè)ESCC病人的癌組織及相鄰正常組織、ESCC細(xì)胞株中circ-Foxo3的表達(dá)水平。選擇兩種食管鱗癌細(xì)胞株（ECA109和TE-13）分別分成兩組進(jìn)行細(xì)胞實(shí)驗(yàn),circ-Foxo3過表達(dá)組及NC組。通過CCK8、Ed U、克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)circ-Foxo3對(duì)食管鱗癌細(xì)胞增殖活性的影響;細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)檢測(cè)circ-Foxo3對(duì)食管鱗癌細(xì)胞周期的影響。兩組細(xì)胞經(jīng)過X線照射處理后,通過流式細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)、Hoechst33258實(shí)驗(yàn)檢測(cè)circ-Foxo3對(duì)食管鱗癌細(xì)胞凋亡的影響;細(xì)胞存活實(shí)驗(yàn)檢測(cè)circ-Foxo3對(duì)食管鱗癌細(xì)胞放射敏感性的影響并通過單擊多靶模型繪制細(xì)胞存活曲線;利用生物信息學(xué)技術(shù)預(yù)測(cè)circ-Foxo3可能的靶mi RNA（mi R-23a）和下游靶基因PTEN,western blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)circ-Foxo3對(duì)PTEN蛋白表達(dá)水平的影響并進(jìn)行灰度分析。最后,用轉(zhuǎn)染后的ECA109細(xì)胞株進(jìn)行裸鼠皮下成瘤實(shí)驗(yàn)... 

【文章來(lái)源】：蚌埠醫(yī)學(xué)院安徽省

【文章頁(yè)數(shù)】：56 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

食管鱗癌組織及細(xì)胞株中circ-Foxo3的表達(dá)

27長(zhǎng)在450nm處的OD值）。以測(cè)量的時(shí)間（0h，24h，48h，72h，96h）為X軸，以所測(cè)的每組數(shù)值為Y軸，繪制兩組食管鱗癌細(xì)胞ECA109、TE-13的生長(zhǎng)曲線（圖2），了解過表達(dá)circ-Foxo3對(duì)細(xì)胞增殖的影響。結(jié)果示，除0h外，過表達(dá)組細(xì)胞的OD值均低于NC組，兩組比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＝0.009、P＝0.002）。提示過表達(dá)circ-Foxo3可抑制食管鱗癌細(xì)胞的增殖。圖2CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)circ-Foxo3對(duì)兩種食管鱗癌細(xì)胞增殖的影響2）EdU經(jīng)試劑盒染色處理后，增殖的細(xì)胞在熒光顯微鏡下呈現(xiàn)明亮的綠色熒光，而總細(xì)胞則呈現(xiàn)藍(lán)色熒光（如圖3、4）。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，ECA109細(xì)胞中，過表達(dá)組增殖細(xì)胞比例為（19.9±1.91%），NC組增殖細(xì)胞比例為（29.9±2.68%）；TE-13細(xì)胞中，過表達(dá)組增殖細(xì)胞比例為（19.0±1.31%），NC組增殖細(xì)胞比例為（24.6±0.87%）。過表達(dá)組的增殖能力低于NC組，兩組比較P均＜0.01。表明過表達(dá)circ-Foxo3可抑制食管鱗癌細(xì)胞的增殖活性。圖3EdU實(shí)驗(yàn)檢測(cè)circ-Foxo3對(duì)ECA109細(xì)胞增殖的影響

27長(zhǎng)在450nm處的OD值）。以測(cè)量的時(shí)間（0h，24h，48h，72h，96h）為X軸，以所測(cè)的每組數(shù)值為Y軸，繪制兩組食管鱗癌細(xì)胞ECA109、TE-13的生長(zhǎng)曲線（圖2），了解過表達(dá)circ-Foxo3對(duì)細(xì)胞增殖的影響。結(jié)果示，除0h外，過表達(dá)組細(xì)胞的OD值均低于NC組，兩組比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＝0.009、P＝0.002）。提示過表達(dá)circ-Foxo3可抑制食管鱗癌細(xì)胞的增殖。圖2CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)circ-Foxo3對(duì)兩種食管鱗癌細(xì)胞增殖的影響2）EdU經(jīng)試劑盒染色處理后，增殖的細(xì)胞在熒光顯微鏡下呈現(xiàn)明亮的綠色熒光，而總細(xì)胞則呈現(xiàn)藍(lán)色熒光（如圖3、4）。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，ECA109細(xì)胞中，過表達(dá)組增殖細(xì)胞比例為（19.9±1.91%），NC組增殖細(xì)胞比例為（29.9±2.68%）；TE-13細(xì)胞中，過表達(dá)組增殖細(xì)胞比例為（19.0±1.31%），NC組增殖細(xì)胞比例為（24.6±0.87%）。過表達(dá)組的增殖能力低于NC組，兩組比較P均＜0.01。表明過表達(dá)circ-Foxo3可抑制食管鱗癌細(xì)胞的增殖活性。圖3EdU實(shí)驗(yàn)檢測(cè)circ-Foxo3對(duì)ECA109細(xì)胞增殖的影響

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]腫瘤微環(huán)境與腫瘤細(xì)胞放射敏感性關(guān)系的研究進(jìn)展[J]. 張玉宇,王利波,趙欽,李戈,龔守良,董麗華.  吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2016(05)



本文編號(hào)：3258729