兩種肺腺癌移植瘤放射后殘留細(xì)胞生長(zhǎng)、凋亡及干細(xì)胞變化的比較性研究
發(fā)布時(shí)間:2021-06-27 09:54
[目的]建立普通肺腺癌A549細(xì)胞和云南宣威女性肺腺癌XWLC-05細(xì)胞裸鼠皮下移植瘤和放射后殘余瘤模型,通過體內(nèi)實(shí)驗(yàn)探究?jī)煞N肺腺癌放射后殘余瘤組織細(xì)胞生長(zhǎng)、凋亡、周期分布和腫瘤干細(xì)胞變化,研究比較兩種肺腺癌放射后殘留細(xì)胞生物學(xué)行為的改變和差異。[方法]將A549細(xì)胞和XWLC-05細(xì)胞種植于3-4周鼠齡的BALB/C-nu裸鼠左腋下構(gòu)建移植瘤模型,待腫瘤體積至1cm3后對(duì)腫瘤組織進(jìn)行20Gy的局部單次劑量X線放射,待放射后的殘存腫瘤組織體積縮小至一定大小體積時(shí),取殘存腫瘤組織塊重新種植于3-4周鼠齡的BALB/C-nu裸鼠左腋皮下構(gòu)建移植性殘余瘤模型。定期監(jiān)測(cè)腫瘤體積變化,繪制移植瘤生長(zhǎng)曲線;分別于殘余腫瘤組織生長(zhǎng)至0.5cm3后0天、7天、14天、21天、28天處死裸鼠取移植瘤組織,HE染色觀察移植瘤組織形態(tài)變化,流式檢測(cè)細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期分布和CD44和CD133標(biāo)記的腫瘤干細(xì)胞比例。比較各組之間的變化和差異。[結(jié)果]1.經(jīng)HE腫瘤組織染色后顯微鏡下觀察組織形態(tài)符合腫瘤細(xì)胞鏡下特點(diǎn)。放射后殘余瘤內(nèi)的細(xì)胞間質(zhì)較放射前移植瘤明顯增加,且殘余瘤內(nèi)的細(xì)胞間質(zhì)隨時(shí)間逐漸增加。2.兩種肺腺癌...
【文章來源】:昆明醫(yī)科大學(xué)云南省
【文章頁數(shù)】:55 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖1裸鼠左腋皮下XWLC-05和A549裸鼠移植瘤及殘余瘤模型??(移植瘤及殘余瘤模型建立成功)??
織生長(zhǎng)情況并按計(jì)劃處死。肉眼可見裸鼠左腋下移植瘤包括殘余瘤一開始都有明??顯凸起,隨時(shí)間增加,可逐漸觸及質(zhì)軔的瘤核,后腫瘤組織體積逐漸長(zhǎng)大,時(shí)間??不同剝離下來的腫瘤組織大小不同(見圖卜圖2)。??取成瘤組、照射組、殘余瘤成瘤后0天、7天、14天、21天、28天的裸鼠??處死后剝離腫瘤組織進(jìn)行固定、包埋等,制備石蠟切片,進(jìn)行HE染色,鏡下觀??察腫瘤組織結(jié)構(gòu)和細(xì)胞形態(tài)。鏡下可見細(xì)胞核增大深染、胞質(zhì)染色加深、核質(zhì)比??增加、細(xì)胞極性不明顯、分裂相增多,符合腫瘤細(xì)胞鏡下特點(diǎn)。放射后殘余瘤內(nèi)??的細(xì)胞間質(zhì)較放射前移植瘤明顯增加,可見增粗粉染的膠原纖維,且殘余瘤內(nèi)的??細(xì)胞間質(zhì)隨時(shí)間逐漸增加。XWLC-05裸鼠移植瘤成瘤組較A549裸鼠移植瘤成??瘤組細(xì)胞間質(zhì)差異不大;放射后殘余瘤中XWLC-05較A549細(xì)胞組膠原組增多??(圖?3)。??lllllli??A549成瘤組?A549照射組?A549殘余瘤成A549殘余搢成A549殘余瘤成A549殘余瘤成A549殘余瘤成??擂0天組?瘤7天組?瘤14天組?瘤21天組?瘤28天組??國(guó)_補(bǔ)1_??XWLC?>05?成瘤組?XWLC-05?照射?XWLC-05?殘余?XWLC*05?殘余?XWLC-05?殘余?XWLC-05?殘余?XWLC*05?殘余??組?瘤成瘤0天組?瘤成瘤7天組瘤成搢14天組瘤成瘤21
取成瘤組、照射組、殘余瘤成瘤后0天、7天、14天、21天、28天的裸鼠處死??后剝離腫瘤組織,秤取腫瘤組織重量,繪制XWLC-05和A549裸鼠移植瘤及殘余??瘤模型不同時(shí)間點(diǎn)重量圖(圖4),XWLC-05裸鼠移植瘤和A549裸鼠移植瘤重量??隨時(shí)間逐漸增加,放射后較放療前減;殘余瘤質(zhì)量隨時(shí)間重量逐漸增加;經(jīng)獨(dú)??立樣本T檢驗(yàn)可以發(fā)現(xiàn),XWLC-05及A549裸鼠移植瘤及殘余瘤重量無明顯差異??(表?1)。??41?畫A549細(xì)胞??ED?XWLC-05?細(xì)胞??s2'?||?I?圖n?_r??Jill?ajunjllllljj??"/////??圖4?XWLC-05和A549裸鼠移植瘤及殘余瘤重量??(同組別XWLC-05和A549裸鼠移植瘤及殘余瘤重量差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義)??表1?XWLC-05和A549裸鼠移植瘤及殘余瘤重量變化??成瘤組?照射組?殘余瘤成殘余瘤成殘余瘤成殘
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Research on human glioma stem cells in China[J]. Yao-dong Zhao,Quan-bin Zhang,Hua Chen,Xi-feng Fei,Yun-tian Shen,Xiao-yan Ji,Jia-wei Ma,Ai-dong Wang,Jun Dong,Qing Lan,Qiang Huang. Neural Regeneration Research. 2017(11)
[2]X線輻射對(duì)A549肺腺癌細(xì)胞周期和增殖的影響[J]. 王溪,佟志敏,胡媛媛,金鵬,李寧,李詩揚(yáng),崔營(yíng)營(yíng),張紅梅. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué). 2017(10)
[3]肺癌腫瘤干細(xì)胞表面標(biāo)志物的研究[J]. 于鴻. 中國(guó)組織工程研究. 2012(36)
[4]PI3K/AKT通路在肺癌轉(zhuǎn)移和耐藥中的研究[J]. 祝冰晶,周向東. 中國(guó)肺癌雜志. 2011(08)
[5]宣威肺腺癌xwlc-05和肺腺癌A549細(xì)胞株體外培養(yǎng)細(xì)胞活力的比較研究[J]. 張?jiān)戚x,譚燕,袁兵,王盛蘭,趙珊,王廷華. 昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2011(07)
[6]PI3K/Akt/mTOR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與非小細(xì)胞肺癌[J]. 祁慧薇,范理宏. 中國(guó)肺癌雜志. 2010(12)
[7]X射線對(duì)人肺腺癌細(xì)胞及其耐藥細(xì)胞株的影響[J]. 任堯堯,張鵬,曹永珍,馬力,周清華. 生物醫(yī)學(xué)工程與臨床. 2009(02)
博士論文
[1]MET-PI3K-Akt信號(hào)通路介導(dǎo)miRNA-31調(diào)控肺腺癌腫瘤干細(xì)胞功能[D]. 侯春英.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 2016
碩士論文
[1]兩種肺腺癌細(xì)胞體外放射后殘留細(xì)胞增殖遷移及干細(xì)胞變化的比較性研究[D]. 杜小雙.昆明醫(yī)科大學(xué) 2017
[2]循環(huán)中Hsa-miR-9、Hsa-miR-21、Hsa-miR-501的表達(dá)水平與非小細(xì)胞肺癌的相關(guān)性研究[D]. 陳凱.昆明醫(yī)科大學(xué) 2017
[3]新一代測(cè)序技術(shù)對(duì)宣威肺癌全基因組和全外顯子組的研究[D]. 王瀟.昆明醫(yī)科大學(xué) 2015
[4]宣威肺腺癌患者放療前后免疫功能的變化[D]. 李國(guó)苗.昆明醫(yī)科大學(xué) 2013
[5]PI3K/AKT通路及DNA損傷修復(fù)對(duì)XWLC-05與A549肺腺癌細(xì)胞放射敏感性影響的研究[D]. 李田芊.昆明醫(yī)科大學(xué) 2012
[6]宣威肺腺癌XWLC-05細(xì)胞和A549細(xì)胞放射敏感性與細(xì)胞周期分布及凋亡的相關(guān)性研究[D]. 于書慧.昆明醫(yī)科大學(xué) 2012
本文編號(hào):3252628
【文章來源】:昆明醫(yī)科大學(xué)云南省
【文章頁數(shù)】:55 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖1裸鼠左腋皮下XWLC-05和A549裸鼠移植瘤及殘余瘤模型??(移植瘤及殘余瘤模型建立成功)??
織生長(zhǎng)情況并按計(jì)劃處死。肉眼可見裸鼠左腋下移植瘤包括殘余瘤一開始都有明??顯凸起,隨時(shí)間增加,可逐漸觸及質(zhì)軔的瘤核,后腫瘤組織體積逐漸長(zhǎng)大,時(shí)間??不同剝離下來的腫瘤組織大小不同(見圖卜圖2)。??取成瘤組、照射組、殘余瘤成瘤后0天、7天、14天、21天、28天的裸鼠??處死后剝離腫瘤組織進(jìn)行固定、包埋等,制備石蠟切片,進(jìn)行HE染色,鏡下觀??察腫瘤組織結(jié)構(gòu)和細(xì)胞形態(tài)。鏡下可見細(xì)胞核增大深染、胞質(zhì)染色加深、核質(zhì)比??增加、細(xì)胞極性不明顯、分裂相增多,符合腫瘤細(xì)胞鏡下特點(diǎn)。放射后殘余瘤內(nèi)??的細(xì)胞間質(zhì)較放射前移植瘤明顯增加,可見增粗粉染的膠原纖維,且殘余瘤內(nèi)的??細(xì)胞間質(zhì)隨時(shí)間逐漸增加。XWLC-05裸鼠移植瘤成瘤組較A549裸鼠移植瘤成??瘤組細(xì)胞間質(zhì)差異不大;放射后殘余瘤中XWLC-05較A549細(xì)胞組膠原組增多??(圖?3)。??lllllli??A549成瘤組?A549照射組?A549殘余瘤成A549殘余搢成A549殘余瘤成A549殘余瘤成A549殘余瘤成??擂0天組?瘤7天組?瘤14天組?瘤21天組?瘤28天組??國(guó)_補(bǔ)1_??XWLC?>05?成瘤組?XWLC-05?照射?XWLC-05?殘余?XWLC*05?殘余?XWLC-05?殘余?XWLC-05?殘余?XWLC*05?殘余??組?瘤成瘤0天組?瘤成瘤7天組瘤成搢14天組瘤成瘤21
取成瘤組、照射組、殘余瘤成瘤后0天、7天、14天、21天、28天的裸鼠處死??后剝離腫瘤組織,秤取腫瘤組織重量,繪制XWLC-05和A549裸鼠移植瘤及殘余??瘤模型不同時(shí)間點(diǎn)重量圖(圖4),XWLC-05裸鼠移植瘤和A549裸鼠移植瘤重量??隨時(shí)間逐漸增加,放射后較放療前減;殘余瘤質(zhì)量隨時(shí)間重量逐漸增加;經(jīng)獨(dú)??立樣本T檢驗(yàn)可以發(fā)現(xiàn),XWLC-05及A549裸鼠移植瘤及殘余瘤重量無明顯差異??(表?1)。??41?畫A549細(xì)胞??ED?XWLC-05?細(xì)胞??s2'?||?I?圖n?_r??Jill?ajunjllllljj??"/////??圖4?XWLC-05和A549裸鼠移植瘤及殘余瘤重量??(同組別XWLC-05和A549裸鼠移植瘤及殘余瘤重量差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義)??表1?XWLC-05和A549裸鼠移植瘤及殘余瘤重量變化??成瘤組?照射組?殘余瘤成殘余瘤成殘余瘤成殘
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Research on human glioma stem cells in China[J]. Yao-dong Zhao,Quan-bin Zhang,Hua Chen,Xi-feng Fei,Yun-tian Shen,Xiao-yan Ji,Jia-wei Ma,Ai-dong Wang,Jun Dong,Qing Lan,Qiang Huang. Neural Regeneration Research. 2017(11)
[2]X線輻射對(duì)A549肺腺癌細(xì)胞周期和增殖的影響[J]. 王溪,佟志敏,胡媛媛,金鵬,李寧,李詩揚(yáng),崔營(yíng)營(yíng),張紅梅. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué). 2017(10)
[3]肺癌腫瘤干細(xì)胞表面標(biāo)志物的研究[J]. 于鴻. 中國(guó)組織工程研究. 2012(36)
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[5]宣威肺腺癌xwlc-05和肺腺癌A549細(xì)胞株體外培養(yǎng)細(xì)胞活力的比較研究[J]. 張?jiān)戚x,譚燕,袁兵,王盛蘭,趙珊,王廷華. 昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2011(07)
[6]PI3K/Akt/mTOR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與非小細(xì)胞肺癌[J]. 祁慧薇,范理宏. 中國(guó)肺癌雜志. 2010(12)
[7]X射線對(duì)人肺腺癌細(xì)胞及其耐藥細(xì)胞株的影響[J]. 任堯堯,張鵬,曹永珍,馬力,周清華. 生物醫(yī)學(xué)工程與臨床. 2009(02)
博士論文
[1]MET-PI3K-Akt信號(hào)通路介導(dǎo)miRNA-31調(diào)控肺腺癌腫瘤干細(xì)胞功能[D]. 侯春英.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 2016
碩士論文
[1]兩種肺腺癌細(xì)胞體外放射后殘留細(xì)胞增殖遷移及干細(xì)胞變化的比較性研究[D]. 杜小雙.昆明醫(yī)科大學(xué) 2017
[2]循環(huán)中Hsa-miR-9、Hsa-miR-21、Hsa-miR-501的表達(dá)水平與非小細(xì)胞肺癌的相關(guān)性研究[D]. 陳凱.昆明醫(yī)科大學(xué) 2017
[3]新一代測(cè)序技術(shù)對(duì)宣威肺癌全基因組和全外顯子組的研究[D]. 王瀟.昆明醫(yī)科大學(xué) 2015
[4]宣威肺腺癌患者放療前后免疫功能的變化[D]. 李國(guó)苗.昆明醫(yī)科大學(xué) 2013
[5]PI3K/AKT通路及DNA損傷修復(fù)對(duì)XWLC-05與A549肺腺癌細(xì)胞放射敏感性影響的研究[D]. 李田芊.昆明醫(yī)科大學(xué) 2012
[6]宣威肺腺癌XWLC-05細(xì)胞和A549細(xì)胞放射敏感性與細(xì)胞周期分布及凋亡的相關(guān)性研究[D]. 于書慧.昆明醫(yī)科大學(xué) 2012
本文編號(hào):3252628
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