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超保守RNA uc.106和迷迭香酸甲酯在B細(xì)胞淋巴瘤中的作用和機制研究

發(fā)布時間:2021-06-14 08:08
  淋巴瘤(lymphoma)是來源淋巴造血系統(tǒng)的惡性腫瘤,在常見腫瘤中排名第七位,在所有腫瘤中占3-4%。它包括兩大類:霍奇金淋巴瘤(Hodgkin’s lymphoma,HL)以Reed-Stemberg細(xì)胞(R-S細(xì)胞)為特征;非霍奇金淋巴瘤(Non-Hodgkin’s lymphoma,NHL)包括B細(xì)胞和T細(xì)胞淋巴瘤。在美國霍奇金淋巴瘤的5年生存率是85%,非霍奇金淋巴瘤是69%,在中國,非霍奇金淋巴瘤以每年5%的速度增長,發(fā)病率從上世紀(jì)的2/10萬上升為6.43/10萬,而2012年全球有566 000新發(fā)病例,同時有305 000病人死亡。根據(jù)淋巴瘤的不同亞型,制定有效的治療方案是刻不容緩的。隨著對淋巴瘤生物學(xué)特征的不斷研究,分子靶向藥物的應(yīng)用有效的提高了患者的5年生存率。因此,尋找新的腫瘤標(biāo)志物,研究其在淋巴瘤中的機制有至關(guān)重要的意義。長鏈非編碼RNA(long noncoding RNA,lncRNA)是長度大于200個核苷酸序列且不能翻譯成蛋白的RNA,堿基組成從200bp到10萬bp不等。研究發(fā)現(xiàn)它們具有高度的組織特異性,可通過轉(zhuǎn)錄調(diào)控、mRNA加工、海綿作用、入核轉(zhuǎn)... 

【文章來源】:揚州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】:95 頁

【學(xué)位級別】:博士

【部分圖文】:

超保守RNA uc.106和迷迭香酸甲酯在B細(xì)胞淋巴瘤中的作用和機制研究


圖1.2人彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤石蠟組織和人正常淋巴結(jié)石蠟組織中uc.106的表迗,Beta-actin為內(nèi)參

序列,序列,統(tǒng)計學(xué)意義,單孔


.m|iucerasessayeagen,p的上清,震蕩3?sec,放入單孔酶標(biāo)儀中讀數(shù);??(7)取出EP管,加入50?pi?STOP液,震蕩3?sec,再次放入單孔酶標(biāo)儀中讀數(shù);??(8)依次按照步驟(6)和(7)檢測每個樣本。??1.4統(tǒng)計學(xué)方法??應(yīng)用SPSS?19.0統(tǒng)計分析軟件,實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(無±3)表示,數(shù)據(jù)采用獨立??樣本t檢驗和x2檢驗等相關(guān)分析,以檢驗水準(zhǔn)a?=?0.05,?P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義,??P<?0.01表示差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義。??2結(jié)果??2.1?uc.106質(zhì)粒的構(gòu)建??將uc.106超保守DNA序列克隆到MSCV-pig逆轉(zhuǎn)錄病毒載體上,得到的質(zhì)粒送公司??測序,將測序結(jié)果與原序列比對,100%—致,沒有突變。如圖2.1所示:??uc.106??

逆轉(zhuǎn)錄病毒,細(xì)胞


?龐磊超保守RNAuc.106和迷迭香酸甲酯在B細(xì)胞淋巴瘤中的作用和機制研究?51_??2.2在小鼠淋巴瘤細(xì)胞株38B9和人淋巴瘤細(xì)胞株Romas中過表達(dá)uc.106??將?MSCV-pig、Gagpol、VSVG?和?uc.106、Gagpo]、VSVG?分為兩組分別通過轉(zhuǎn)染?293T??細(xì)胞包裝病毒,然后在36?h、48?h和60?h收集逆轉(zhuǎn)錄病毒。再用收集的病毒感染38B9和??Romas細(xì)胞。感染48?h接著用嘌呤霉素篩選三天后觀察熒光率很高(圖2.2.1),流式測??GFP陽性率達(dá)到90%左右(圖2.2.2),此時提取細(xì)胞總RNA檢測uc.106的表達(dá)情況,發(fā)??現(xiàn)轉(zhuǎn)染uc.?106的細(xì)胞中uc.?106升高約900倍(圖2.2.3)。??

【參考文獻】:
期刊論文
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本文編號:3229413

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