目的:肝細(xì)胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）是世界上第五大常見的癌癥,目前死亡率位居癌癥死亡率第三位。HCC起病隱匿,惡性程度高、多數(shù)患者發(fā)現(xiàn)時(shí)已伴有肝內(nèi)或肝外轉(zhuǎn)移,往往錯(cuò)過手術(shù)等治療的最佳時(shí)機(jī),總體治療效果仍然不佳。癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移通常與腫瘤干細(xì)胞（Cancer Stem cells,CSCs）的存在有關(guān)。轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶2（Tissue transglutaminase,TG2）是轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶家族中的一員,在細(xì)胞內(nèi)廣泛存在,有研究表明TG2與腫瘤的干細(xì)胞特性及轉(zhuǎn)移擴(kuò)散、耐藥有關(guān)。通過檢測(cè)TG2在不同分化程度肝癌組織、不同轉(zhuǎn)移潛能肝癌細(xì)胞系中的表達(dá)情況明確TG2在肝癌中的表達(dá)。對(duì)TG2進(jìn)行沉默及過表達(dá)后檢測(cè)其對(duì)肝癌CSCs及細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力的影響,探索TG2通過與整合素β1（ITGB1）結(jié)合,調(diào)節(jié)下游通路影響肝癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的機(jī)制。研究方法:1.選擇不同分化程度的肝癌組織26例,按照肝癌分化程度分為:低分化組15例、高分化組11例、對(duì)應(yīng)癌旁組織各5例。應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)不同組的TG2表達(dá)水平,并進(jìn)行單因素方差分析,p<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2.選擇不同遷移... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

TG2在不同分化程度肝癌及癌旁組織中的表達(dá)A低分化組織（100X）B.低分化組織（400X）C.高分化組織（100X）D.低分化組織（400X）

中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文16LO2中幾乎不表達(dá)。(圖3.2)因此選擇HCC-LM3作為沉默TG2細(xì)胞系，smmc-7721作為過表達(dá)TG2細(xì)胞系。圖2q-PCR及Westernblot測(cè)定在不同遷移能力肝癌細(xì)胞系中TG2表達(dá)A.q-PCRmRNA測(cè)定TG2在SMMC-7721、HCCLM3、LO2中的mRNA相對(duì)表達(dá)水平B.Westernblot測(cè)定蛋白表達(dá)。差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（*代表P＜0.05，**，＜0.01)。3.3構(gòu)建穩(wěn)定沉默TG2的HCC-LM3細(xì)胞系攜帶沉默TG2基因表達(dá)的shRNA的慢病毒載體成功轉(zhuǎn)染HCCLM3細(xì)胞后，使用RT-PCR及WesternBlot檢測(cè)HCCLM3細(xì)胞、LW977細(xì)胞、LW978細(xì)胞、LW979細(xì)胞及空病毒載體細(xì)胞NCTG2mRNA及蛋白的相對(duì)表達(dá)水平。結(jié)果示，NCTG2mRNA及蛋白相對(duì)表達(dá)水平與HCCLM3細(xì)胞相似，無差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；LW978、LW979細(xì)胞TG2mRNA及蛋白相對(duì)表達(dá)水平較NC顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見圖3。圖3LW978為干擾效果最佳序列

中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文16LO2中幾乎不表達(dá)。(圖3.2)因此選擇HCC-LM3作為沉默TG2細(xì)胞系，smmc-7721作為過表達(dá)TG2細(xì)胞系。圖2q-PCR及Westernblot測(cè)定在不同遷移能力肝癌細(xì)胞系中TG2表達(dá)A.q-PCRmRNA測(cè)定TG2在SMMC-7721、HCCLM3、LO2中的mRNA相對(duì)表達(dá)水平B.Westernblot測(cè)定蛋白表達(dá)。差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（*代表P＜0.05，**，＜0.01)。3.3構(gòu)建穩(wěn)定沉默TG2的HCC-LM3細(xì)胞系攜帶沉默TG2基因表達(dá)的shRNA的慢病毒載體成功轉(zhuǎn)染HCCLM3細(xì)胞后，使用RT-PCR及WesternBlot檢測(cè)HCCLM3細(xì)胞、LW977細(xì)胞、LW978細(xì)胞、LW979細(xì)胞及空病毒載體細(xì)胞NCTG2mRNA及蛋白的相對(duì)表達(dá)水平。結(jié)果示，NCTG2mRNA及蛋白相對(duì)表達(dá)水平與HCCLM3細(xì)胞相似，無差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；LW978、LW979細(xì)胞TG2mRNA及蛋白相對(duì)表達(dá)水平較NC顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見圖3。圖3LW978為干擾效果最佳序列


本文編號(hào)：3220046