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負載腫瘤干細胞DRibbles的樹突狀細胞疫苗治療結腸癌的實驗研究

發(fā)布時間:2021-06-05 13:27
  目的:結腸癌作為常見的消化道惡性腫瘤,其發(fā)病率和死亡率都在逐年上升。結腸癌由于手術后易復發(fā),易產生放、化療耐受等特點,目前的臨床治療方法效果都不甚理想。腫瘤干細胞(cancer stem cell,CSC)是腫瘤組織中數(shù)量較少的一個亞群,具有自我更新和無限增殖能力,能夠多向分化并且長期處于“休眠”狀態(tài),不易被傳統(tǒng)的放、化療殺死,成為腫瘤轉移、復發(fā)的關鍵因素,把腫瘤干細胞作為靶點來治療腫瘤的策略成為腫瘤治療的新突破口。樹突狀細胞(dendritic cell,DC)是目前發(fā)現(xiàn)的功能最強的專職抗原提呈細胞,能夠激活T細胞,誘導發(fā)揮免疫應答,增強T淋巴細胞特異性殺傷腫瘤的能力。大量研究顯示,用DC制備抗腫瘤疫苗,能夠有效激活免疫細胞的抗腫瘤應答。DC疫苗的效能主要受限于DC分離培養(yǎng)技術、負載抗原的免疫原性、疫苗應用方式等。目前,應用最廣泛的負載抗原是腫瘤細胞的全裂解物(lyasates),但其負載效果尚有待提高。研究表明,由細胞自噬產生的自噬小體,因其含有缺損的核糖體產物(defective ribosomal products,DRiPs),錯誤折疊的蛋白質等,具有作為新型負載抗原的潛力,... 

【文章來源】:吉林大學吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:76 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

負載腫瘤干細胞DRibbles的樹突狀細胞疫苗治療結腸癌的實驗研究


無血清培養(yǎng)條件下CD44+CT-26細胞的生長(scalebar=100m)

細胞,誘導分化,培養(yǎng)皿,平鋪


4.2 CD44+CT-26 細胞的鑒定4.2.1 誘導分化實驗收集分選得到的 CD44+CT-26 細胞無血清培養(yǎng)后形成的細胞球,離心后用含10%FBS 的 1640 進行培養(yǎng)。觀察發(fā)現(xiàn),成懸浮生長狀態(tài)的細胞球貼壁并且逐漸呈放射狀延展開來,伸出的細胞呈貼壁生長。第 5 天,細胞球基本平鋪于培養(yǎng)皿中,貼壁生長良好(圖 4.2)。提示 CD44+CT-26 細胞經過誘導后能夠分化成為CT-26 小鼠結腸癌細胞。

流式細胞術,細胞,無血清培養(yǎng),比例


4.2 CD44+CT-26 細胞誘導分化實驗(scale bar=200 m細胞術檢測細胞表面標志物集 CT-26 小鼠結腸癌細胞和分選后無血清培養(yǎng)穩(wěn)定傳代的 式細胞儀上檢測中 CD44 在兩種細胞中陽性表達的百分比。結腸癌細胞系中,CD44+細胞比例為 4.07%(圖 4.3 左),無6 細胞中,CD44+細胞的比例為 98.0%(圖 4.3 右)。該結果了 CD44+的細胞,并且通過無血清培養(yǎng)維持了高度的腫瘤干

【參考文獻】:
期刊論文
[1]Immune responses of dendritic cells combined with tumor-derived autophagosome vaccine on hepatocellular carcinoma[J]. Yongxiang Yi,Jianbo Han,Liang Zhao,Chunying Wang,Yuan Fang,Qiang Wei,Liang Hu,Junmao Liu,Yufeng Zhang,Lili Wang.  Chinese Journal of Cancer Research. 2015(06)
[2]腫瘤干細胞的分離與純化研究進展[J]. 王榕,蔣敬庭,楊伊林,吳昌平.  中國組織工程研究與臨床康復. 2009(01)



本文編號:3212254

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