負(fù)載腫瘤干細(xì)胞DRibbles的樹突狀細(xì)胞疫苗治療結(jié)腸癌的實(shí)驗(yàn)研究
發(fā)布時(shí)間:2021-06-05 13:27
目的:結(jié)腸癌作為常見的消化道惡性腫瘤,其發(fā)病率和死亡率都在逐年上升。結(jié)腸癌由于手術(shù)后易復(fù)發(fā),易產(chǎn)生放、化療耐受等特點(diǎn),目前的臨床治療方法效果都不甚理想。腫瘤干細(xì)胞(cancer stem cell,CSC)是腫瘤組織中數(shù)量較少的一個(gè)亞群,具有自我更新和無(wú)限增殖能力,能夠多向分化并且長(zhǎng)期處于“休眠”狀態(tài),不易被傳統(tǒng)的放、化療殺死,成為腫瘤轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)的關(guān)鍵因素,把腫瘤干細(xì)胞作為靶點(diǎn)來(lái)治療腫瘤的策略成為腫瘤治療的新突破口。樹突狀細(xì)胞(dendritic cell,DC)是目前發(fā)現(xiàn)的功能最強(qiáng)的專職抗原提呈細(xì)胞,能夠激活T細(xì)胞,誘導(dǎo)發(fā)揮免疫應(yīng)答,增強(qiáng)T淋巴細(xì)胞特異性殺傷腫瘤的能力。大量研究顯示,用DC制備抗腫瘤疫苗,能夠有效激活免疫細(xì)胞的抗腫瘤應(yīng)答。DC疫苗的效能主要受限于DC分離培養(yǎng)技術(shù)、負(fù)載抗原的免疫原性、疫苗應(yīng)用方式等。目前,應(yīng)用最廣泛的負(fù)載抗原是腫瘤細(xì)胞的全裂解物(lyasates),但其負(fù)載效果尚有待提高。研究表明,由細(xì)胞自噬產(chǎn)生的自噬小體,因其含有缺損的核糖體產(chǎn)物(defective ribosomal products,DRiPs),錯(cuò)誤折疊的蛋白質(zhì)等,具有作為新型負(fù)載抗原的潛力,...
【文章來(lái)源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:76 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
無(wú)血清培養(yǎng)條件下CD44+CT-26細(xì)胞的生長(zhǎng)(scalebar=100m)
4.2 CD44+CT-26 細(xì)胞的鑒定4.2.1 誘導(dǎo)分化實(shí)驗(yàn)收集分選得到的 CD44+CT-26 細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)后形成的細(xì)胞球,離心后用含10%FBS 的 1640 進(jìn)行培養(yǎng)。觀察發(fā)現(xiàn),成懸浮生長(zhǎng)狀態(tài)的細(xì)胞球貼壁并且逐漸呈放射狀延展開來(lái),伸出的細(xì)胞呈貼壁生長(zhǎng)。第 5 天,細(xì)胞球基本平鋪于培養(yǎng)皿中,貼壁生長(zhǎng)良好(圖 4.2)。提示 CD44+CT-26 細(xì)胞經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)后能夠分化成為CT-26 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞。
4.2 CD44+CT-26 細(xì)胞誘導(dǎo)分化實(shí)驗(yàn)(scale bar=200 m細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞表面標(biāo)志物集 CT-26 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞和分選后無(wú)血清培養(yǎng)穩(wěn)定傳代的 式細(xì)胞儀上檢測(cè)中 CD44 在兩種細(xì)胞中陽(yáng)性表達(dá)的百分比。結(jié)腸癌細(xì)胞系中,CD44+細(xì)胞比例為 4.07%(圖 4.3 左),無(wú)6 細(xì)胞中,CD44+細(xì)胞的比例為 98.0%(圖 4.3 右)。該結(jié)果了 CD44+的細(xì)胞,并且通過(guò)無(wú)血清培養(yǎng)維持了高度的腫瘤干
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Immune responses of dendritic cells combined with tumor-derived autophagosome vaccine on hepatocellular carcinoma[J]. Yongxiang Yi,Jianbo Han,Liang Zhao,Chunying Wang,Yuan Fang,Qiang Wei,Liang Hu,Junmao Liu,Yufeng Zhang,Lili Wang. Chinese Journal of Cancer Research. 2015(06)
[2]腫瘤干細(xì)胞的分離與純化研究進(jìn)展[J]. 王榕,蔣敬庭,楊伊林,吳昌平. 中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù). 2009(01)
本文編號(hào):3212254
【文章來(lái)源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:76 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
無(wú)血清培養(yǎng)條件下CD44+CT-26細(xì)胞的生長(zhǎng)(scalebar=100m)
4.2 CD44+CT-26 細(xì)胞的鑒定4.2.1 誘導(dǎo)分化實(shí)驗(yàn)收集分選得到的 CD44+CT-26 細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)后形成的細(xì)胞球,離心后用含10%FBS 的 1640 進(jìn)行培養(yǎng)。觀察發(fā)現(xiàn),成懸浮生長(zhǎng)狀態(tài)的細(xì)胞球貼壁并且逐漸呈放射狀延展開來(lái),伸出的細(xì)胞呈貼壁生長(zhǎng)。第 5 天,細(xì)胞球基本平鋪于培養(yǎng)皿中,貼壁生長(zhǎng)良好(圖 4.2)。提示 CD44+CT-26 細(xì)胞經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)后能夠分化成為CT-26 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞。
4.2 CD44+CT-26 細(xì)胞誘導(dǎo)分化實(shí)驗(yàn)(scale bar=200 m細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞表面標(biāo)志物集 CT-26 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞和分選后無(wú)血清培養(yǎng)穩(wěn)定傳代的 式細(xì)胞儀上檢測(cè)中 CD44 在兩種細(xì)胞中陽(yáng)性表達(dá)的百分比。結(jié)腸癌細(xì)胞系中,CD44+細(xì)胞比例為 4.07%(圖 4.3 左),無(wú)6 細(xì)胞中,CD44+細(xì)胞的比例為 98.0%(圖 4.3 右)。該結(jié)果了 CD44+的細(xì)胞,并且通過(guò)無(wú)血清培養(yǎng)維持了高度的腫瘤干
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Immune responses of dendritic cells combined with tumor-derived autophagosome vaccine on hepatocellular carcinoma[J]. Yongxiang Yi,Jianbo Han,Liang Zhao,Chunying Wang,Yuan Fang,Qiang Wei,Liang Hu,Junmao Liu,Yufeng Zhang,Lili Wang. Chinese Journal of Cancer Research. 2015(06)
[2]腫瘤干細(xì)胞的分離與純化研究進(jìn)展[J]. 王榕,蔣敬庭,楊伊林,吳昌平. 中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù). 2009(01)
本文編號(hào):3212254
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